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Dot-PPA-ELISA联合检测猪PRV.Brucella和Chlamydia抗体方法的建立和应用研究 总被引：2，自引：0，他引：2
首次将Dot-PPA -ELISA用于联合检测猪衣原体、伪狂犬病毒和布氏杆菌抗体 ,并进行了较大规模的田间猪血清检测。实验对制作诊断膜片的工艺流程和关键材料做了细致研究 ,并进行同步监测、分析。确定了本方法的最佳反应条件和阳性标准。联合诊断膜片 (简称膜片 )具有良好特异性、灵敏性和稳定性。诊断膜片在 4℃保存 8个月、室温 (15～ 2 5℃ )保存 2个月、37℃保存 1个月灵敏性 ,特异性不变。 1∶6 4、1∶12 8、1∶6 4为联合检测猪伪狂犬病、衣原体病和布氏杆菌病抗体的阳性标准。结果表明 ,Dot -PPA -ELISA联合检测法操作方便、快速 ,结果客观 ,易于判读 ,诊断膜片便于寄送、保存 ,性能稳定、可靠 ,并能同时检测多种疫病等优点 ,适宜应用于猪衣原体病、伪狂犬病和布氏杆菌病抗体的联合检测 相似文献
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本试验以布氏杆菌ＳＡＴ 为对照试验,建立了Ｄｏｔ ＰＰＡ ＥＬＩＳＡ 检测猪布氏杆菌病抗体的方法,该法检测的猪ＩｇＧ 含量可达６９９２×１０－ ９ｇ,灵敏性高,不同猪抗ＰＲＶ、ＰＰＶ、ＨＣＶ、ＪＥＶ、ＣＨＬ 等阳性血清发生交叉反应,特异性强;此外该法还具有操作简便、快捷不需特殊试验条件、结果客观、肉眼易于判断、反应膜片可长期保存等优点。适宜在广大基层单位应用,对布病的快速诊检有着十分重要的意义。 相似文献
3.
本试验用鸡胚大量繁殖鸡传染性支气管炎病毒,收集尿囊液,用１％胰蛋白酶处理制备ＩＵＢＶ血凝抗原,建立了血凝－血凝抑制检测ＩＢＶ抗体的方法,其特异性强,操作简便。另外,本试验建立Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法用于检测ＨＢＶ,病料经处理后,点样于硝酸纤维素膜,加兔抗ＩＢＶ抗体,经ＰＰＡ－ＤＡＢ－Ｈ２Ｏ２显色,其检测结果与双抗体夹心ＥＬＩＳＡ的检测结果一致。 相似文献
4.
BA-Dot-ELISA检测牛结核乳清抗体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究建立了快速检测牛乳中结核病抗体的ＢＡ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。用该法检测２８份结核变反阳性牛乳清，阳性率为７８．５７％，比常规ＥＬＩＳＡ（６４．２８％）高。用该法检测布鲁氏菌病牛乳清无交叉反应，但对５份副结核变反阳性牛乳清出现了一定的交叉反应。 相似文献
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本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）用于检测ＥＤＳ－７６病毒抗原的标准化程序。对纯化ＥＤＳ－７６病毒抗原的最低检出量为１ｎｇ／Ｄｏｔ,其敏感性约为ＨＡ的１５．６倍。ＥＤＳ－７６阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对ＥＤＳ－７６病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。 相似文献
6.
本试验利用猪的繁殖与呼吸综合征病毒美洲株和上海分离株ＳＨ１建立了ＩＦ，ＩＰＭＡ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ三种抗体检测方法，对１２０份随机抽样猪血清检测表明，美洲株原组ＩＦＡ的阳性率为３０．８％，ＩＰＭＡ的阳性率为３０％，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性率为３２．５％，ＳＨ１分离株抗原组ＩＦＡ的阳性率为３７．５％，ＩＰＭ阳性率为３７．５％，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的阳性率为４０％，进口ＥＬＩＳＡ试剂盒的检测阳性率为２６ 相似文献
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用SPA—ELISA检测牛结核乳清抗体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从用牛ＰＰＤ皮试阳性奶牛中采取１８头份牛乳，不稀释，做ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测，进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ条件优选工作，建立了检测牛乳清中结核抗体的ＥＬＩＳＡ工作程序。检测结果表明：１８份ＰＰＤ皮试阳性牛乳，经ＳＰＡ－ＥＳＩＳＡ检测阳性为１５份，阴性为３份，结果附合率为８３．３３％。 相似文献
8.
[目的]了解河南省部分地区规模化养猪场繁殖障碍性疫病的流行情况,为有目的、有重点地开展相应的猪繁殖障碍性疫病免疫预防工作提供参考。[方法]对河南部分猪场送检于河南农业大学动物疫病检测诊断中心的血清进行监测,其中6 825、2 609、1 177、123和53份血清分别用于检测猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病和衣原体病抗体。[结果]血清学监测结果显示,血清中猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病和衣原体病相应抗体阳性率分别为63.28%、61.44%、25.49%、39.84%、5.66%。[结论]河南省部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病的防疫工作亟待加强,猪伪狂犬病的防治需要进一步强化,衣原体病已得到有效控制。 相似文献
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利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫，再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平，带 相似文献
10.
用不同保存温度和时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗注射豚鼠,检测ＰＰＶ－Ｎ株弱毒苗的保存期,结果为４℃至少能保存一年,－２０℃至少能保存３年。根据抗体反应的规律性,证明豚鼠可用作ＰＰＶ弱毒苗抗体检测的试验动物。 相似文献
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《浙江大学学报(农业与生命科学版)》2006,32(6):620
“863”计划现代农业专题在动植物无特定疫害生产关键技术创新上取得重要突破，完善了系列重要猪病的ELISA诊断试剂盒，对进一步提高我国猪病的诊断水平将起到积极作用．猪繁殖与呼吸综合征诊断与监测ELISA试剂盒、伪狂犬病gE鉴别ELISA诊断试剂盒、伪狂犬病gG鉴别ELISA诊断试剂盒的保存期试验表明，生产的3批试剂盒均可以在2℃～8℃条件下保存6个月以上； 相似文献
12.
对上海某鸭场１３日龄急性死亡角弓反张的病鸭进行了系列诊断。病鸭肝脏病理变化典型,肉眼观察呈土黄色,且肿胀,出血,细菌分离培养结果阴性,进一步取病肝制成悬液,接种鸡胚,收集尿囊液分离病毒,并用雏鸭病毒性肝炎单抗酶标抗体采用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ鉴定呈阳性。 相似文献
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珍禽霉形体抗体检测方法的建立和应用 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验经培养特性,形态特征,红细胞吸附试验和生长抑制试验等从８株珍禽霉形体中筛选出１株具有代表性的菌株ＭＧ－Ｐ,将ＭＧ－Ｐ和标准株ＭＧ－Ｓ０分别建立了ＨＩ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验,检测了３批１２０份共１００种珍禽动物的血清样本,ＭＧ－Ｐ的阳性检出率为ＨＩ１４．２％（１７／２０）,Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ１６．７％（２０－１２０）,两法阳性符合率为８５％（１７／２０）;ＭＧ－Ｓ０的阳性检出率为ＨＩ９．２％ 相似文献
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采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。 相似文献
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猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种猪及其他多种动物的急性传染病。该病毒对外界环境有较强的抵抗力,经过呼吸道、消化道等途径传播,发病率和死亡率均较高,严重影响养猪业经济效益。诊断过程中由于相似的临床症状需要与猪链球菌病,仔猪水肿病及猪李氏杆菌病相鉴别,防止误诊耽误防治时机,导致疾病大规模的扩散和流行。针对该病的预防,需要加强引种检疫和抗体水平监测,并通过免疫接种提高猪只体内抗体水平。本文简单论述了猪伪狂犬病的鉴别诊断及防治措施,供养殖户参考。 相似文献
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衰变加速因子（ＤＡＦ）是补体激活途径中的一个重要膜调节蛋白，转入ＤＡＦ基因猪可以作为人器官移植的供体。采用斑点杂交试验（Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ），对经显微注射导入了ｈＤＡＦ闰片段、用聚合酶链反应（ＰＣＲ）鉴定的阳性猪所产仔猪３２头进行了整合检测，获得转基因阳性仔猪１４头。说明了Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ可作为转基因动物外源基因整合检测的一种手段。 相似文献
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研究用ELISA方法对2020—2021年河南省18个市的猪进行猪伪狂犬病感染抗体检测,检测样品份数为39523份。结果显示,2020—2021年猪伪狂犬病感染抗体个体阳性率分别为20.93%、17.28%;种猪场阳性率分别为14.78%、9.54%,商品代养殖场阳性率分别为21.56%、20.93%;屠宰场阳性率分别为24.45%、19.16%。可见,河南省部分猪场和屠宰场总体猪伪狂犬病感染情况2021年低于2020年,说明该病防控与净化工作取得一定成效。 相似文献
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利用鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）细胞适应株在鸡胚ＣＥＦ单层培养物上增殖后经超速冷冻离心制备抗原，以国产ＮＣ膜为载体建立了检测与诊断鸡ＩＢＤ的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。经与ＡＧＰ、ＶＮ、ＥＬＩＳＡ等方法进行比较，表明本方法灵敏，快速，简易，特异性强，重复性良好。对ＩＢＤ免疫抗体的检测结果表明，采用首次以ＩＢＤ弱毒苗与灭能油乳剂苗同时免疫、再次用油乳剂苗加强免疫的接种程序，可获得显著而持久的抗体水平；带母源抗体（ＭＡｂ）的雏鸡于２１日龄首次免疫，效果良好；带ＭＡｂ的鸡胚于１８日胚龄接种ＩＢＤ弱毒苗，雏鸡出壳后可在较长时间内获得良好的保护。 相似文献
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上海郊区某两猪场自１９９４年初起不断有少量仔猪死亡，经诊断为猪瘟持续感染（亚临床隐性感）。对发病舍的母猪和仔猪应用ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测系统重点检测其血清猪瘟抗体水平，表明８．３％的母猪和相当数量的仔猪抗体郊价处于低水平状态。普查表明，在１１５８头母猪中ＯＤ值小于０．５的有５７头，占４．９２％。用４头份的猪瘟疫苗对抗体水平低的母猪进行强化免疫，一个月后检测其抗体效价；再用６头份的猪瘟疫苗对抗体效价 相似文献