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相似文献
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1.
研究培养液中血清的添加时间和添加浓度及不同培养体系对牛孤雌胚胎体外发育潜力的影响。结果表明:牛成熟卵母细胞孤雌激活后的第3天添加10%的FBS对孤雌胚的体外发育效果;良好。4种培养体系在孤雌激活后的第3天添加10%的FBS,平均囊胚率分别可达46.25%(SOFaar)、43.58%(CRlaa)、40.25%(KSOMaa)、17.98%(TCM199);TCM199组的囊胚率显著低于其他3组(P〈0.05),SOFaa优于CRlaa和KSOMaa组,但差异不显著(P〉0.05)。  相似文献   

2.
培养液及血清浓度对山羊孤雌胚胎体外培养的影响   总被引:7,自引:0,他引:7  
试验比较了在SOFaa,CRlaa,mCRlaa3种培养液中添加不同浓度的成年山羊血清(NGS)对山羊孤雌胚胎进行体外培养的效果。结果表明:在3种培养液中,添加10%的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好,囊胚率分别可达62.79%(81/129)、53.52%(38/71)、13.64%(12/88);mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组,SOFaa组优于CRlaa组.但SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在现有试验条件下,以在SOFaa培养液中.山羊孤雌胚胎的体外培养的第72小时时加入10%的NGS的发育效果较好,囊胚率可达62.79%。  相似文献   

3.
山羊孤雌胚胎的体外培养   总被引:2,自引:2,他引:2  
系统地研究了培养液微滴的大小、培养液体系及血清浓度对山羊孤雌胚胎早期体外发育的影响。结果表明,培养液微滴以较大体积(200~500μL)的培养效果较好;在3种培养液中,添加10%的NGS对山羊孤雌胚胎的体外发育效果较好,囊胚率分别可达62.79%(81/129)、53.52%(38/71)、13.64%(12/88);mCRlaa组囊胚发育率和囊胚细胞数显著低于SOFaa组和CRlaa组,SOFaa组优于CRlaa组,尽管SOFaa组和CRlaa组间无显著差异。在本试验条件下,以SOFaa培养液,山羊孤雌胚胎体外培养72h时加入10%的NGs,500μL微滴培养,其发育效果较好,囊胚率可达62.79%。  相似文献   

4.
为了探讨瘦素(Leptin)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活后胚胎早期发育的影响,研究选择在Earle's盐缓冲的TCM199中添加10IU/mLeCG,10IU/mLhCG,10ng/mLEGF配制成化学限定的基础液,以添加不同浓度Leptin设定各试验组,对猪卵母细胞进行体外成熟培养。以未添加Leptin的基础液为对照组1,而添加5%的胎牛血清(FBS)、10%猪卵泡液为对照组2。比较分析各组卵母细胞核成熟效率,孤雌激活后胚胎的卵裂率,囊胚发育率。结果表明:各添加组卵母细胞成熟率与对照组之间无显著差异(P>0.05);孤雌激活后,各组间的卵裂率和囊胚发育率也无明显差异。同时,在化学限定的猪卵母细胞体外成熟液中添加Leptin对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后早期胚胎的发育无显著效果。  相似文献   

5.
采用离子霉素和6-DMAP对黄淮白山羊体外成熟卵母细胞进行联合激活,分别在不同的培养体系进行体外培养,观察孤雌胚胎的发育情况。培养体系分别为:无共培养条件下,M199(10?S)、CR1aa和HTF P1;颗粒细胞共培养条件下,CR1aa、HTF P1和SOFaa。结果发现,无共培养条件下,CR1aa和HTF P1组孤雌胚胎的卵裂率显著高于M199组(P<0.05),但3组均未有囊胚;共培养条件下,HTF P1组的卵裂率显著高于CR1aa和SOFaa组(P<0.05),而CR1aa组的囊胚率却显著高于其他2组(P<0.05)。综合试验结果说明,CR1aa联合颗粒细胞共培养能够获得较好的培养效果,适用于山羊孤雌胚胎的体外培养。  相似文献   

6.
山羊卵母细胞孤雌激活及孤雌胚的体外培养   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了比较不同的激活方法对卵母细胞孤雌激活的影响,以及培养液(CR1aa)中添加不同类型的血清对孤雌激活胚体外发育的影响。采用Eth 6-DMAP、A23187 6-DMAP和Ion 6-DMAP三种方法激活山羊卵母细胞,Eth 6-DMAP组孤雌激活胚的卵裂率和囊胚率(35.2%和4.8%)显著低于A23187 6-DMAP组(68.9%和24.1%)和Ion 6-DMAP组(88.1%和48.0%),表明以Ion 6-DMAP激活最为理想。在培养液(CR1aa)与颗粒细胞共同培养条件下,分别添加100 mL/L的发情牛血清(OCS)、胎牛血清(FBS)和新生牛血清(NCS)。添加OCS和FBS后,孤雌胚囊胚率分别为48.1%和45.0%,显著高于添加NCS组(26.0%)。表明OCS、FBS和NCS能有效的提高孤雌胚的体外发育能力,尤其是对提高孤雌胚的囊胚发育能力更佳。  相似文献   

7.
不同培养体系对牛胚胎体外发育的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用离子霉素和6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)对牛体外成熟卵母细胞进行联合激活,激活后采用不同的培养体系进行体外培养,观察不同的培养液对牛孤雌激活胚体外发育能力的影响。3种培养体系分别为:A(0~48 h:CR1aa+3 mg/mL BSA;48 h~7 d:CR1aa+10%FBS),B(连续7 d均为SOFaa+3 mg/mL BSA),C(0~5 d:SOFaa+3 mg/mL BSA;6~7 d:SOFaa+10%FBS)。结果表明:3种培养液对卵裂率没有显著性影响,分别为87.22%,94.33%和91.30%,但囊胚发育率存在显著性差异,以A效果最好,其囊胚发育率为25.56%;C次之,囊胚发育率为11.80%;B最低,囊胚发育率为3.55%。之后选择最佳的培养液进行体外受精实验,结果表明CR1aa可用做牛胚胎体外生产的培养液。  相似文献   

8.
猪胚胎体外培养影响因素的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
以孤雌激活胚胎为研究对象,对猪胚胎体外培养过程中的相关影响因素进行了探讨。体外成熟的猪卵母细胞经孤雌激活后,用添加0.5%牛血清蛋白(BSA)的NCSU-23(北卡罗来纳州立大学-23)培养基培养的囊胚率(36.7%)极显著高于添加5%、10%和15%胎牛血清(FCS)的NCSU-23(11.8%,18.5%和10.3%,P0.01)。在NCSU-23中添加一定比例的TCM-199(10%,25%和50%),虽然对猪卵母细胞孤雌激活后的分裂率无显著影响(89.6%vs87.0%,83.4%和82.6%,P0.05),但囊胚发育率随着TCM-199比例的增加而显著下降(30.1%vs25.0%,11.1%和1.1%,P0.05)。结果表明:培养液中添加BSA的猪胚胎体外培养效果优于添加FCS;猪胚胎的体外培养不需要成分复杂的培养液。  相似文献   

9.
为进一步优化绵羊卵母细胞孤雌胚胎的体外发育系统,试验研究了二甲基亚砜(DMSO)和胎牛血清(FBS)对绵羊孤雌胚胎发育能力的影响。结果表明:化学激活液中DMSO的含量增加到1%,卵裂率(80.92%)和囊胚率(15.45%)极显著提高(P0.01);在有糖的胚胎发育液中添加FBS,囊胚率(26.13%)极显著提高(P0.01)。  相似文献   

10.
本试验比较了在SOFaa培养体系下化学激活(5 μmol/L离子霉素5 min,2mmol/L 6-DMAP 4h)与电激活(1.3 kv/cm,60 μ s,1次脉冲)方法对囊胚率的影响,结果表明化学激活囊胚率显著高于电激活(12.30% vs 2.4%,p<0.01),而二者的卵裂率(90.61%vs 94.40%)和囊胚细胞数(48.24±13.12 vs 38±3.56)均没有显著性差异(p>0.05);同时比较了在SOFaa培养体系下第4天更换添加10% FBS的SOFaa液与在SOFaa液中连续培养7天对囊胚率的影响,结果更换添加FBS的培养液使囊胚率显著降低(3.69% vs 11.64%,p<0.01).  相似文献   

11.
采用不同型血清分别添加到TCM199和mTCM199培养液、RPMI1640和mRPMI1640培养液中,对兔原核期受精卵进行了体外序贯培养,并对各组间不同时期发育率进行了分析比较。结果显示:体外培养至第72h时,3个体外序贯培养体系间8-细胞胚率、桑椹胚率差异不显著(P〉0.05),当体外培养至囊胚时,100mL/L NBS+TCM199(mTCM199)培养体系、100mL/L NBS+RPMI1640(mRPMI1640)培养体系的囊胚率均显著低于100mL/L FBS+RPMI1640(mRPMI1640)培养体系的囊胚率(三组的囊胚率依次是27.3%、35.9%、97.2%,P〈0.01)。但前两组之间差异不显著。结果表明,不同型血清对兔早期胚胎体外正常发育具有很大影响,序贯培养中添加国产NBS的培养液的培养效果明显低于添加进口FBS的培养液的培养效果。  相似文献   

12.
从屠宰场收集水牛卵巢上抽取的卵母细胞,经体外成熟培养后分别进行孤雌激活(PA)和体外受精(IVF),将获得的PA或IVF胚胎分别培养于添加浓度均为5%的牛血清白蛋白(BSA)、胎牛血清(FBS)、炭情水牛血清(OBS)、发情牛血清(OCS)和混合血清(OCS与FBS按1:1混合)的培养液中培养7~9 d,并观察胚胎的体外发育情况.结果,PA胚胎培养在OCS和混合血清组的卵裂率(73.52%,68.07%)和囊胚率(30.59%,27.73%)均显著高于BSA(38.37 %.6.40%)、OBS(44.97%,10.05%)和FBS(52.02%,17.04%)组(P<0.05);IVF胚胎的卵裂率和囊胚率以OCS组最高(62.50%,22.62%),显著高于BSA(30.50%,6.38%)、OBS(35.48 %,7.10 %)和FBS组(40.11%,11.76%,P<0.05),但与混合血清组(60.42%,21.35%;P>0.05)差异不显著.结果表明,在水牛胚胎体外培养体系中添加5%的OCS或混合血清均能有效地促进水牛胚胎的体外发育.  相似文献   

13.
不同培养液及血清浓度对绵羊孤雌生殖胚胎发育的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
体外成熟的绵羊卵母细胞,经5 μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后,分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养,试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度(10%、20%)胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FCS组的卵裂率显著低于SOFaa+BSA和SOFaa+FCS组(P<0.05),SOFaa+BSA组的囊胚率显著低于M-199+BSA、SOFaa+FCS、M-199+FCS三组(P<0.05);SOFaa+10% FCS与SOFaa+20% FCS组的卵裂率及囊胚率均无显著差异,M-199+10% FCS和M-199+20% FCS组的卵裂率及囊胚率间均无显著差异。结果表明:SOFaa比M-199更适合绵羊孤雌生殖胚体外发育,此外添加10%的FCS即可达到较好的培养效果。  相似文献   

14.
主要比较了离子霉素、电脉冲及培养基更换对牛羊体外成熟卵母细胞孤雌激活的影响。两种方法对牛胚胎的研究中,牛胚胎卵裂率无显著差异(90.61%vs94.40%,P>0.05),而离子霉素激活胚胎的囊胚发育率极显著高于电激活方法(12.3%vs2.4%,P<0.01)。两种方法对羊胚胎的研究中,羊胚胎卵裂率无显著差异(72.4%vs77.4%,P>0.05)。但是离子霉素激活胚胎的囊胚发育率显著高于电激活方法(3.67%vs10.4%,P<0.05)。本试验还采用两种方法来培养牛化学激活孤雌胚。方法一是把化学激活牛体外成熟卵母细胞放于SOFaa(Synthetic Oviduct Fluid aa)培养基中连续培养7d;方法二是把化学激活牛体外成熟卵母细胞放于SOFaa培养基中4 d后,再转移进入含有10?S(Fetal Bovine Serum)的SOFaa培养基中继续培养3 d。试验结果表明:方法一中的囊胚发育率显著高于方法二(11.64%vs3.49%,P<0.01)。这也说明了更换培养基不利于其体外囊胚发育率。  相似文献   

15.
探讨了在猪孤雌胚体外发育的第3、4、5、6天分别添加胎牛血清(FCS)对孤雌胚发育能力的影响.结果,在体外培养的第5,6天添加10%FCS组得到的囊胚率和囊胚孵化率最高,第5天添加FCS组的囊胚细胞数最多.结果表明,FCS可以促进猪孤雌胚胎的早期体外发育.  相似文献   

16.
体外成熟对牛卵母细胞孤雌激活后发育潜力的影响   总被引:2,自引:1,他引:1  
本试验在卵母细胞体外成熟的研究基础上,研究了培养用水、卵泡液和成熟时间对卵母细胞体外成熟及孤雌激活后发育潜力的影响.结果表明(1)将卵母细胞分别于蒸馏水和Milli-Q超纯水配制的成熟培养液中培养22~24 h, 孤雌激活后, 卵裂率无显著差异(P>0.05); 但孤雌卵在超纯水配制的胚胎培养液中培养,囊胚发育率为22.3%, 明显高于在蒸馏水配制的培养液中的囊胚发育率14.1%(P<0.05).(2)在成熟培养液中添加10%、20%卵泡液,成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚发育率(32.3%, 30.9%)明显高于添加5%和0%卵泡液组的囊胚发育率(21.8%, 22.7%,P<0.05).卵母细胞在添加20%卵泡液的培养液中成熟培养,孤雌激活后囊胚孵化率明显低于添加0、5%、10%卵泡液组的囊胚孵化率(P<0.05).(3)成熟28 h或30 h的卵母细胞孤雌激活后,其囊胚发育率(30.5%或29.4%)明显高于成熟24 h或26 h组的囊胚发育率(20.5%或22.1%,P<0.05).  相似文献   

17.
本试验主要比较了离子霉素、电脉冲两种方法激活牛、羊体外成熟卵母细胞的效率。两种激活方法中。牛胚胎卵裂率无显著差异(90.61%对94.40%,P〉0.05),而离子霉素激活胚胎的囊胚发育率极显著高于电激活方法(12.3%对2.4%,P〈0.01)。两种方法对羊胚胎的研究中,羊胚胎卵裂率无显著差异(72.4%对77.4%,P〉0.05)。但是离子霉素激活胚胎的囊胚发育率显著高于电激活方法(3.67%对10.40%,P〈0.05)。本试验中还比较了用化学激活法(离子霉素)激活牛体外成熟卵母细胞后,用SOFaa体系培养,换液与不换液对孤雌激活胚胎体外发育的影响。结果表明:在第4天不换液的胚胎卵裂率和囊胚率极显著高于换液的胚胎(11.64%对3.49%。P〈0.01)。  相似文献   

18.
本研究主要探讨氨基酸对水牛孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响.在SOF液中添加1.5%的MEM非必需氨基酸(NEAA)显著提高PA(79.8%vs 67.7%)胚胎的分裂率(P<0.05),囊胚发育率和囊胚孵化率无显著差异;添加1.0%的EAA显著提高PA胚胎的囊胚孵化率(77.3%vs 43.3%,P<0.05),但各组间的分裂率和囊胚发育率无显著差异;在改良SOF基础液中联合添加1.0%NEAA和2.0?A可显著提高孤雌激活胚胎的分裂率(84.4%vs 68.8%,P<0.05),但囊胚发育率和孵化率均无显著差异.  相似文献   

19.
猪植入前胚胎体外培养条件的优化   总被引:2,自引:1,他引:1  
探讨了更换胚胎培养液及添加FBS、高渗透压和不同浓度VE对猪卵母细胞体外受精(IVF)和孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响,进一步优化了猪植入前胚胎体外培养体系。试验一:在第2天、第4天更换新的培养液(换液组),在换液基础上第4天更换为添加10%FBS的培养液(FBS组)。试验二:胚胎分别在0.05 mol/L蔗糖(蔗糖组)和138 mmol/L氯化钠(氯化钠组)的PZM-3(300~320 mOsmol)中培养2 d后移至PZM-3(288 mOsmol)中培养5 d。试验三:在培养液中分别添加50、100和200 μmol/L VE。对照组均在PZM-3(288 mOsmol)中培养7 d。结果表明:试验一,IVF和PA胚胎FBS组囊胚率显著高于对照组和换液组(P<0.05);试验二,IVF胚胎氯化钠组卵裂率、囊胚率均显著高于对照组与蔗糖组(P<0.05);试验三,IVF胚胎添加100 μmol/L VE组囊胚率显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,在换液的基础上添加FBS有利于猪IVF和PA胚胎的体外发育;氯化钠调节的高渗透压可以促进猪IVF胚胎的早期发育;添加100 μmol/L VE可以改善猪IVF胚胎的体外发育体系。  相似文献   

20.
Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
本研究的目的是探讨Ghrelin对水牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响.体外成熟的水牛卵母细胞经体外受精或离子霉素孤雌激活后.分别在舍0,0.5,5,50和500 μg/L Ghrelin的培养液中进行体外培养,观察各组胚胎的卵裂率和囊胚率.结果显示,在培养液中添加不同浓度的Ghrelin对体外受精和孤雌激活胚胎的卵裂率均无显著影响(P>0.05),但添加500 μg/L的Ghrelin显著提高体外受精胚胎的囊胚发育率(33.5% vs 13.7%,P<0.05),50 μg/L或500 μg/L的Ghrelin均显著提高孤雌激活胚胎的囊胚发育率(32.4%和34.6% vs 14.5%,P<0.05).结果表明,培养液中添加Ghrelin对胚胎的早期卵裂没有影响,但可促进水牛体外受精和孤雌激活胚胎囊胚的形成.  相似文献   

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