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重组褐藻胶裂解酶基因工程菌超声波破碎条件研究 总被引：1，自引：0，他引：1
褐藻胶裂解酶是制备褐藻胶寡糖的重要工具酶,利用工程菌进行褐藻胶裂解酶基因的克隆与高效表达是提高酶活的主要途径之一。工程酶位于胞内,需采取有效破碎手段获取。对重组褐藻胶裂解酶基因工程菌E.coli TOP10采用超声波破碎,分析了超声波破碎强度、总工作时间、NaCl浓度对菌体破碎程度及酶活力的影响。通过单因素试验和正交试验得出重组大肠杆菌的最佳破碎条件为:菌液浓度40 mg/mL,菌液体积50 mL,超声波工作时间4 s,间歇时间8 s,超声波破碎强度50%,总工作时间6min,NaCl浓度为0.15 mol/L。在该条件下获得褐藻胶裂解酶粗酶液的酶活为21 U/mL。 相似文献
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该研究以鲍鱼脏器为原料,通过冷提取工艺单因素试验,探讨了缓冲液种类、缓冲液p H、料液比、浸提时间对鲍鱼脏器中β-葡萄糖苷酶活力的影响,并通过正交试验确定提取的最佳工艺。在此基础上,采用超声波辅助提取鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶粗酶液,确定超声辅助提取的最佳工艺条件。结果表明:料液比、缓冲液p H对提取具有显著性的影响(P0.05),而浸提时间、缓冲液种类对提取的影响不显著。通过比较超声波辅助提取前后β-葡萄糖苷酶活力的大小,可以看出,超声波处理有利于鲍鱼脏器β-葡萄糖苷酶粗酶液的提取,最佳提取工艺条件为:缓冲液为0.1mol/L p H3.5乙酸-乙酸钠,料液比1∶4,浸提时间4h,超声时间20min,超声功率200W。 相似文献
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采用酶-超声波辅助法提取金柑果皮黄酮,在酶用量、乙醇体积分数、超声功率、液料比、超声时间的单因素试验的基础上,采用响应面法优化金柑黄酮提取条件,得到金柑果皮黄酮提取的回归方程预测模型,确定最佳提取工艺条件:酶用量酶75 U/m L,乙醇体积分数67%,超声功率460 w,液料比45 m L/g,超声时间20 min,重复提取2次。在此条件下,黄酮得率预测值为2.02%,经验证,实际得率为1.98%,与模型相符,说明拟合方程可靠。采用酶-超声提取法,黄酮得率高,时间短,为金柑果皮的开发利用提供理论参考。 相似文献
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以指状青霉(Penicillium digitatum) DSM62840为研究对象,采用高压细胞破碎法破碎菌体,对其转化柠檬烯生成α-松油醇过程中的相关酶的提取条件进行优化。以柠檬烯转化酶活性为指标,在单因素试验的基础上结合响应面试验法,确定最佳提取条件;同时,对柠檬烯转化酶的酶学性质进行了初步探索。结果显示,最佳提取条件为:破碎压力100 MPa、破碎6次、液料比15∶1 (mL/g),在此条件下,α-松油醇的质量浓度为855.75 mg/L,酶活力达到71.31 U。柠檬烯转化酶最佳转化时间为4 h,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活性最高;该酶可能为细胞色素P450,且不同的金属离子对酶活性的影响不同:Fe~(2+)对酶有轻微的抑制作用,而Ca~(2+)、Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Co~(2+)、Ba~(2+)、Na~+、K~+、Fe~(3+)、Ni~(2+)则对酶有不同程度的激活作用。粗酶液SDS-PAGE电泳结果表明优化后的提取工艺效果较好。 相似文献
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【目的】以葵花籽仁为原料,优化提取绿原酸的工艺条件。【方法】以乙醇为提取溶剂,绿原酸提取率为指标,采用超声波微波辅助法提取葵花籽绿原酸,在单因素试验的基础上,选取液料比、超声波功率、微波功率为影响绿原酸提取率的主要因素,采用响应面试验方法对绿原酸提取工艺进行优化,并对绿原酸提取率的二次回归模型进行分析。【结果】单因素试验结果表明,绿原酸的提取率随着液料比的增加呈现先增大后保持不变的趋势,而随着乙醇体积分数、超声波功率、微波功率、微波辐射时间的增加呈现先增大后减小的变化趋势。响应面法优化的绿原酸最佳提取工艺条件为:液(mL)料(g)比25.47∶1,超声波功率307.1W,微波功率539.36W。经过修正得到的最佳工艺条件为:液料比25∶1,超声波功率300 W,微波功率540 W,乙醇体积分数65%,微波辐射时间90s,此时绿原酸的提取率最高,可以达到3.27%。【结论】超声波微波辅助法提取葵花籽绿原酸具有操作简单、时间短、提取率高等特点。 相似文献
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以葡萄酒泥酵母为试验材料,采用超声波辅助法分离提取超氧化物歧化酶(SOD).通过单因素试验,研究了料液比、超声波功率、超声波时间和热变性温度对SOD比活力的影响,并采用正交试验确定了超声波法分离提取SOD的最佳工艺参数.结果表明:葡萄酒泥酵母SOD提取的最佳工艺参数为料液比1∶2.5、超声功率400W、超声作用时间16min、热变性温度45℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力最高为169.32U/mg.此方法操作简单,成本低,所得SOD比活力较高. 相似文献
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通过研究超声波辅助酶法提取马尾藻多糖的最佳条件,为提高马尾藻的利用率提供理论依据。采用响应面分析优化酶解法提取多糖工艺与正交优化超声波破碎工艺,得到超声波辅助酶法提取多糖的最佳提取条件。结果表明：超声波辅助酶法提取马尾藻多糖最佳条件为：超声波作用时间40min,功率350W,工作温度80℃,酶解温度44.95℃、酶解pH5.0、酶解时间2.05h,酶添加量2.5%,所得马尾藻多糖提取率为17.43%,比单独酶解法提取马尾藻多糖提高了3.41%。 相似文献
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以梅列产的长梗黄精为原料,研究液料比、提取温度、超声波功率和超声波时间等因素对超声波辅助提取长梗黄精多糖得率的影响规律,经优化确定超声波提取长梗黄精多糖的最佳工艺。由单因素试验结果确定液料比、提取温度、超声波作用功率和超声波处理时间各因素的优化参数,采用DPS 9.05和Design Expert7.0数据分析软件,建立响应面模型进行结果分析,通过响应面法分析结果获得各因素与长梗黄精多糖得率的交互关系,从而确定超声波提取长梗黄精多糖的最佳工艺条件。结果显示长梗黄精多糖优化后的提取工艺为:液料比18:1,超声波处理时间59.7min,浸提的温度72.9℃,超声波作用功率152.8W,所得的长梗黄精多糖的得率理论值16.65%。经响应面模型验证,实际得率为16.59%,表明该模型可靠。 相似文献
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小球藻营养丰富且全面,具有重要的生理功能和保健功效,在营养品、保健品、功能食品方面具有良好的应用前景。然而,由于小球藻的细胞壁十分坚硬,破碎困难,胞内的有效成分不易释放,抑制了其产业化发展。因此,一种安全有效的破壁方法是小球藻产业化发展的关键。该研究采用超声波破壁技术处理小球藻,通过单因素试验考察超声时间、超声波功率、料液比对细胞破碎的影响,并进一步采用Box-Behnken试验设计和响应面分析法优化其工艺参数。结果表明:通过单因素试验得到破壁效果的影响力大小依次为超声时间、超声波功率、料液比。Design-Expert 8.0.6软件优化的工艺条件为料液比1∶200(g∶mL)、超声波功率为450 W、超声时间为15 min。该条件下细胞破壁率为79.51%,与模型预测值80%非常接近。采用响应面法对超声波破碎藻细胞条件进行优化合理可行。 相似文献
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超声波协同纤维素酶提取骏枣多糖工艺优化 总被引：4，自引：0，他引：4
在单因素试验的基础上,选择纤维素酶添加量3 500 U/g(酶活200 U/mg以上),浸提时间40 min,利用Box-Behnken的中心组合设计及响应面法(RSM)探讨了超声波功率、液料比、pH值和温度等因素的优化组合提取骏枣多糖,通过建立二次回归模型,确定其最佳提取工艺条件为:超声波功率330 W、液料比18、pH值6.7、温度54℃。在此工艺条件下,骏枣多糖的提取量为7.25 g。结果表明,超声波协同纤维素酶法是提高骏枣多糖得率的有效途径之一。 相似文献
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《福建农业学报》2015,(11)
为提取短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX的胞内代谢物质,利用超声波破碎其细胞,对胞内代谢物质进行优化提取。在超声波输出功率、超声时间以及料液比进行单因素试验的基础上,利用Design-expert进行试验设计,响应面优化得到胞内代谢物质的最佳提取工艺。单因素试验结果表明,当超声时间为30min时,获得的胞内代谢物质较多,胞内代谢物质得率为11mg·g~(-1);超声波功率为100 W时,所得胞内代谢物质得率最高,为9.33mg·g~(-1);料液比1∶25时所得胞内代谢物质得率最高,为12.22mg·g~(-1)。进一步通过响应面优化发现,超声时间、超声功率、料液比3个因素对胞内代谢物质得率的影响程度依次为:料液比超声破碎时间超声功率。最佳超声波提取方法为:超声功率为318.68 W,超声时间为10min,料液比为1∶25,在此条件下提取的胞内代谢物质得率为12.987 8mg·g~(-1)。 相似文献
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采用超声波辅助有机溶剂法对3种不同品种石榴籽油进行提取。在单因素试验基础上,选择液料比、超声波功率、处理时间、处理温度为自变量,石榴籽油提取率为响应值,采用Box-Behnken试验设计方法,研究各自变量及其交互作用对石榴籽油提取率的影响。利用DesignExpert软件得到回归方程的预测模型并进行响应面分析。结果表明,提取温度、时间、液料比3个因素对石榴籽油提取率都有显著影响,温度和时间、液料比和其他3个因素的交互作用都有显著影响。确定超声波辅助提取石榴籽油的最佳条件为:提取温度39.93℃,时间33.20min,超声波功率346.24W,液料比11.40mL·g-1,此时提取率为96.48%。 相似文献
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陈文娟 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2013,39(5):559-564
为了充分提取和利用大黄鱼鱼卵中的磷脂,研究酶水解法提取大黄鱼鱼卵磷脂的工艺。通过单因素试验和响应面设计优化试验,确定酶水解法的最佳工艺条件,并比较酶水解法与溶剂法、超声波法的提取效果。结果表明,选用内切型木瓜蛋白酶、料液比1∶2、pH 6.0、酶解温度45 ℃、酶解时间1.5 h和加酶量125 U/g为较佳工艺条件。在此条件下,产品的平均提取率可达70.92%,表明响应面法用于对大黄鱼鱼卵磷脂提取条件的优化是可行的。工艺放大试验结果表明,酶水解法的提取率比溶剂法和超声波法分别提高了22.02%和9.6%,说明酶水解法是提高大黄鱼鱼卵磷脂提取率的较好方法。 相似文献
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采用微波辅助提取技术,研究微波功率、处理时间及料液比对脱脂酸浆籽中多糖提取率的影响。运用minitab15.0数据分析软件,采用Box-Behnken的中心组合设计,采用三因素三水平的响应面法优化工艺条件,建立微波提取多糖的二次多项数学模型,并以多糖的提取率为响应值做响应面,得到优化条件为:料液比1∶12,微波功率610 W,微波处理时间83 s。在此条件下实际多糖提取率为5.57%。 相似文献
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《广西农学报》2020,(2)
【目的】采用响应面法优化超声辅助提取红薯粗蛋白工艺,为超声波辅助水浸提法红薯粗蛋白提取工艺提供参考依据。【方法】以市售广西产"西瓜红"红薯为原料,超声波辅助提取红薯粗蛋白,在单因素试验结果的基础上,通过响应面试验优化提取工艺。【结果】实验结果表明,红薯粗蛋白提取率受各因素的影响大小顺序为:A(液料比) C(超声功率) B(超声时间);得到红薯粗蛋白提取的最优工艺条件为超声功率300 W,超声时间81min,液料比11:1,预测提取率为1.003%。【结论】采用响应面法优化超声辅助提取红薯粗蛋白工艺简单稳定,对红薯深加工过程中回收功能性成分,减小加工废水环境污染具有经济意义。 相似文献
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对提取工艺主要参数进行三因素五水平试验设计,采用响应面试验优化超声波辅助提取木棉花花青素的提取条件.结果表明,超声波辅助提取的最佳工艺条件为提取时间50 min,料液比1∶40(m/V,g:mL),超声波功率210W. 相似文献