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体外分离、培养仔猪关节软骨细胞 ,然后在细胞培养液中分别添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μm ol/ L 铜。结果表明 ,软骨细胞在 4种浓度的铜中可存活并增殖 ,而且能增加胰岛素样生长因子 (IGF- )、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3 )的分泌量。但随铜浓度的增加 ,其存活率、增殖率、3 H- Td R掺入率及 IGF- 、IGFBP3 的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加 31.2μmol/ L铜对软骨细胞的增殖作用最强 ,增殖率、3 H- Td R掺入数、IGF- 、IGFBP3 的分泌量显著高于对照组 (P <0 .0 1)。表明 31.2 μmol/ L 铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌 IGF- 、IGFBP3 的最适浓度。 相似文献
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铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF—I、IGFBP的影响 总被引:9,自引:3,他引:6
体外分离、培养仔猪关节软骨细胞,然后在细胞培养液中分别添加0、7.8、15.6、31.2、62.5μmol/L铜。结果表明,软骨细胞在4种浓度的铜中可存活并增殖,而且能增加胰岛素样生长因子(IGF-I)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3)的分泌量。但随铜浓度的增加,其存活率、增殖率、^3H-TdR掺入率及IGF-I、IGFBP3的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加31.2μmol/L铜对软骨细胞的增殖作用最强,增殖率、^3H-TdR掺入数、IGF-I、IGFBP3的分泌量显著高于对照组9P<0.01)。表明31.2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌IGF-I、IGFBP3的最适浓度。 相似文献
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铜对体外仔猪软骨细胞增殖和细胞骨架的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
体外分离、培养仔猪关节软骨细胞,在细胞培养液中分别添加铜0、7.8、15.6、31.2、62.5μmol/L。结果表明,软骨细胞在4种铜浓度中可存活并增殖,但随铜浓度的增加,其存活率、增殖率、3H-TdR掺入率有明显的差异,且能破坏软骨细胞骨架。培养液中添加铜31.2μmol/L,对软骨细胞的增殖作用最强,增殖率、3H-TdR掺入数显著高于对照组(P<0.01),软骨细胞形态及骨架均正常。表明31.2μmol/L铜浓度是促进体外软骨细胞增殖的最适浓度。 相似文献
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分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采用RT-PCR法扩增出关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF—Ⅰ)的cDNA,与pMD18-T载体相连,转化JM109大肠埃希氏菌,提取质粒,经鉴定,所扩增的片段为目的片段。在此基础上培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在第0、12、24、48h收集软骨细胞,提取总RNA,采用RT—PCR法扩增出IGF—Ⅰ的cDNA,以β-actin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,计算IGF—Ⅰ mRNA基因表达的相对水平。结果,在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGF—Ⅰ mRNA基因表达,其中以铜浓度31.2μmol/L的效果最好。表明铜对软骨细胞的增殖作用是通过促进IGF—Ⅰ mRNA的表达来实现的。 相似文献
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应用Real-time PCR方法检测不同浓度(0、1、10和100 ng/mL)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)处理后的体外培养奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白和脂肪合成相关基因mRNA的相对表达量。结果表明,添加不同浓度IGF-Ⅰ对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞IGF-Ⅰ受体基因(IGFIR)、IGF-Ⅰ结合蛋白-3基因(IGFBP3)、α-s1-酪蛋白基因(CSN1S1)和κ-酪蛋白基因(CSN3)mRNA的相对表达丰度均无显著影响(P>0.05)。随着IGF-Ⅰ添加浓度的增加,β-酪蛋白基因(CSN2)、乙酰辅酶A羧化酶基因(ACACA)、脂肪酸合成酶基因(FASN)和脂肪酸结合蛋白-3基因(FABP3)mRNA的相对表达丰度显著上调(P<0.05)。提示,IGF-Ⅰ作为一种重要细胞因子参与调节乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪相关基因mRNA的表达。 相似文献
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为了研究胰岛素样生长因子1(IGF-Ⅰ)对奶牛卵母细胞体外成熟和植入前胚胎发育的影响,在卵母细胞体外成熟(IVM)和胚胎体外培养(IVC)期间添加不同浓度(0、20、40、60、80 ng/m L)的IGF-Ⅰ。结果表明:与对照组相比,IVM培养液中添加60、80 ng/m L IGF-Ⅰ显著提高了卵母细胞的成熟率(75.8%、76.2%vs.62.1%);IVM和IVC培养液中添加60、80 ng/mL IGF-Ⅰ显著提高了卵裂率(59.2%、61.5%vs.40.2%)和囊胚率(28.1%、27.6%vs.18.3%)并显著降低了囊胚内ROS水平(55.2、57.1 vs.79.8)。与对照组相比,IVM和IVC培养液中添加40 ng/mL IGF-Ⅰ提高了囊胚IGFBP2基因的表达;IVM和IVC培养液中添加IGF-Ⅰ没有改变IGFBP3基因表达;IVM和IVC培养液中添加60、80 ng/mL IGF-Ⅰ提高了囊胚IGFBP6基因表达(0.36、0.39 vs.0.23)。结果提示,在IVM和IVC培养液中添加适量浓度的IGF-Ⅰ可降低胚胎内ROS水平,增加胚胎细胞内IGFBP6基因表达,提高胚胎的早期发育能力。 相似文献
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研究了外源性胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养的奶牛成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。应用组织块移行法分离奶牛成骨细胞,姬姆萨染色及碱性磷酸酶(ALP)染色进行鉴定。MTT法检测不同质量浓度IGF-1对成骨细胞增殖的影响,比色法检测及放射免疫法(RIA)分别测定细胞基质ALP活性及骨钙素(OC)水平,评价细胞分化功能。结果显示,1~200μg/LIGF-1均能促进奶牛成骨细胞增殖,100μg/L组具有最大刺激效应,且IGF-1干预组细胞光密度值(D值)从第1天到第5天逐渐增加,第7天降低。与对照组相比,10μg/L与100μg/LIGF-1均可显著增强ALP活性及OC水平,增幅达20%~180%(P0.05或者P0.01)。结果表明,IGF-1是奶牛成骨细胞增殖和分化代谢促进剂,因此推测IGF-1可以成为动物骨代谢性疾病潜在治疗手段。 相似文献
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通过体外分离培养鸡小肠上皮细胞,在含10%血清的培养液中分别添加O、15.6、31.2、46.8和62.4μmol/L质量浓度的铜.结果表明:鸡小肠上皮细胞对铜的刺激敏感,铜可以有效促进细胞增殖,与对照组相比铜添加组细胞的增殖率显著升高,且当培养液中添加的铜质量浓度达到46.8 μmol/L时鸡小肠上皮细胞的增殖率最高.且处理组各质量浓度间细胞数量差异极显著,各时间段间细胞数量差异极显著,质量浓度与时间的交互作用差异极显著. 相似文献
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本文旨在研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对育肥羊生长性能及生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ(GH/IGF-Ⅰ)轴的影响.试验采用单因素随机区组设计,将12只3月龄东北细毛羊与德国肉用美利奴羊杂交一代育肥羊分为3组,每组4个重复,每组羊公母各占1/2.对照组饲喂基础日粮,试验组1和试验组2分别在基础日粮的基础上添加500和800 mg/kg的GSH,试验期为60 d.测定谷胱甘肽对育肥羊生长性能和血清中GH和IGF-Ⅰ浓度及组织中IGF-Ⅰ mRNA表达量的影响.结果表明:日粮中添加GSH显著提高了试验组育肥羊的日增重(P<0.05),显著降低了试验组育肥羊的料重比(P<0.05),但对育肥羊的日采食量无显著影响(P>0.05);试验20、40和60 d时,试验组育肥羊血清中的生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,试验组育肥羊肝脏和背最长肌中IGF-ⅠmRNA的表达量有所提高,当GSH添加量达到800 mg/kg时,育肥羊背最长肌中IGF-Ⅰ mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05).因此,本试验初步得出,日粮中添加GSH促进了肝脏IGF-Ⅰ的分泌,提高了肌肉中IGF-Ⅰ mRNA的表达量,提高血清中GH与IGF-Ⅰ浓度,从而促进了育肥羊的生长. 相似文献
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本试验旨在探讨生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞内调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响。试验对纯化后的荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行4种处理,对照组采用无血清生长培养基,试验组在对照组的基础上分别添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(100 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL)。培养24 h后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)法测定κ-酪蛋白基因以及调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子的mRNA表达量,并测定生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达量。结果表明:体外培养的奶牛乳腺上皮细胞可以表达GHR和IGF-ⅠRmRNA,各试验组均能显著提高κ-酪蛋白(CSN3)mRNA表达量(P<0.05),但未发现GH和IGF-Ⅰ复合存在累积效应;与对照组相比,GH组有提高E74-样转录因子5(ELF5)mRNA表达量的趋势(P<0.10),而IGF-Ⅰ组显著提高了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA表达量(P<0.05),GH+IGF-Ⅰ组未呈现加强作用。结果提示,GH和IGF-Ⅰ可能单独通过影响调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达来调节κ-酪蛋白的合成。 相似文献
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胰岛素样生长因子-Ⅰ是胰岛素样生长因子家族的成员,是生长激素发挥促生长作用的主要介导因子。本文介绍了家禽的IGF-Ⅰ结构,阐述了当前IGF-Ⅰ在组织中的表达水平、基因多态性与家禽经济性状相关的研究现状。 相似文献
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选择21日龄断奶长白仔猪37头随机分为4组,每组3个重复,每个重复3头,分别施以表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、基础日粮、自然哺乳处理,表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ的剂量均为17.86μg/d。试验自断奶之日起,试验期14d。试验结果表明,第1周EGF组和IGF-Ⅰ组日增重均低于其他两组第2周EGF组日增重高于其他3组,IGF-Ⅰ组低于其他3组;整个试验期EGF组日增重高于基础日粮组,低于自然哺乳组,但差异均不显著(P>0.05)。第1周自然哺乳组的料重比均显著优于其他各组(P<0.05),第2周EGF组的料重比均显著优于其他各组(P<0.05),整个试验期EGF组和自然哺乳组的料重比接近,优于其他两组,但无显著性差异(P>0.05)。 相似文献
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胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor Ⅰ,IGF-Ⅰ)是生长激素促生长作用的主要介导因子.通过对IGF-Ⅰ的阐述,揭示了其在动物的生长发育过程中发挥的重要作用. 相似文献
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胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor Ⅰ, IGF-Ⅰ),因其结构与胰岛素类似而得名,是生长激素产生生理作用过程中必须的一种活性蛋白多肽物质.它是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞自分泌和旁分泌的产物.本实验采用PCR技术时猪肝脏中的IGF-Ⅰ进行扩增,并测定了其部分序列,共424bp,并与其它物种IGF-Ⅰ基因进行同源序列比较得出:猪肝脏扩增出IGF-Ⅰ与其他物种IGF-Ⅰ基因具有很高的同源性.本研究为进一步研究IGF-Ⅰ在猪肝脏中的作用提供理论基础. 相似文献