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为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果，新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA，A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精，并利用金霉素荧光染色（chlortetracycline，CTC）法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组, 说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。 相似文献
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哺乳动物输卵管峡部上皮细胞以其顶部质膜唾液酸化的多糖-蛋白复合物暂时黏附精子头部,在此处形成精子库,不仅确保了适当条件下有适当数量的精子到达受精部位,而且还有益于精子在体内外的活力,调节精子获能速率;过氧化氢是雌性哺乳动物生殖道内杀死精子的元凶,而输卵管液中的过氧化氢酶则促进精子在雌性哺乳动物生殖道内的存活。研究输卵管对精子的影响对彻底搞清受精过程的调节、改进精子体外获能技术及治疗某些不育症具有重要的理论及实践意义。 相似文献
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精子获能现象的发现大大促进了体外受精技术的发展。近年来，在精子体外获能的研究过程中不断加深了人们对精子获能机理的认识，同时也不断提高了精子体外获能的效果．进一步推动了体外受精技术的发展。就当前猪精子体外获能研究概况进行综述，希望能对进一步深入研究有所启示。 相似文献
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获能是哺乳动物精子的成熟过程和受精的必要前提,获能液中添加物从不同方面影响精子获能;本文阐述了肝素、Ca2 载体A23187、葡萄糖、孕酮、咖啡因等添加物对精子体外获能的影响及其作用机制。 相似文献
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在牛精子获能液中添加不同浓度的钙离子载体,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育作了研究。通过对顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率的观察,筛选出获能液中最适的钙离子载体浓度,作用时间及其有利于早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明:钙离子载体在诱导牛精子获能上存在一个浓度-时间阈值,其最佳浓度和时间组合是0.1μM处理2min或者0.15μM处理0.5min,此时的囊胚率最高;钙离子载体的添加不能诱导牛精子获能的发生。 相似文献
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《畜牧与兽医》2014,(7):40-43
为了探究猪精子在获能、顶体反应及冷休克处理后对精子顶体酶抑制剂表达量的影响,以及顶体酶抑制剂在精子中何时被降解,低温是否会损伤顶体酶抑制剂,利用SDS-PAGE、Western blot分析射精精子、获能精子、顶体反应精子和冷休克精子组的总蛋白种类及猪精子顶体酶抑制剂表达量的变化。结果显示:射精精子处理组与获能精子、顶体反应精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异显著(P<0.05),且获能和顶体反应处理组间的差异不明显(P>0.05);射精精子与冷休克精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异极显著(P<0.01),且冷休克处理组的顶体酶抑制剂出现异常表达。推测:精子在获能或顶体反应期间,顶体酶抑制剂可能通过泛素-蛋白酶体途径被降解,释放出有活性的顶体酶;低温可能导致顶体酶抑制剂蛋白结构的改变或损坏,导致其表达量异常。 相似文献
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咖啡因和肝素、钙离子载体对家畜冷冻精子体外获能的协同作用 总被引：3，自引：0，他引：3
本文报道了用咖啡因与肝素、钙离子载体(I-A)协同处理诱导马、驴、猪冷冻精子体外获能的研究结果.咖啡因与肝素、I-A均有协同作用.在肝素或I-A处理中添加咖啡因,不仅能提高穿透率,而且能促进卵内雄原核的形成和发育.精子先经洗涤,再用咖啡因与肝素或I-A协同处理,可得到良好的获能效果. 相似文献
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鲜精离心洗涤除去精浆,然后用0.4 μmol/L钙离子载体(IA组)作用10 min或用10 mg/L肝素(HE组)作用90 min获能后,与DNA孵育,再用地高锌(DIG)末端标记的线形外源DNA进行转染,用免疫组化的方法分别检测它们的转染效率;用透射电镜观察精子获能前后的超微结构变化,并用碘化丙锭和羟化荧光素双探针检测获能对精子质膜完整性的影响,探讨精子获能影响精子结合及内化外源DNA变化的原因.结果显示,获能处理降低了精子结合和内化外源DNA能力,IA组和HE组结合率分别为(17.41±4.69)%和(15.00±4.36)%,都极显著低于未经获能处理的精子(32.97±4.58)%(P<0.01).IA组、HE组和对照组(未获能)内化率分别为(12.09±2.50)%、(8.93±1.79)%和(25.52±2.57)%,IA组、HE组均极差异小于对照组(P<0.01).超微结构观察和双荧光探针检测都发现精子获能后质膜完整性降低.用IA或HE获能后的精子质膜完整率是分别是(33.16±6.46)%和(33.90±4.14)%,与对照组差异极显著(P<0.01).结果表明,精子结合及内化外源DNA不是纯粹的分子渗透现象,而是受严格的分子调控的. 相似文献
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采用上游法分离优化精子,用mTyrod’s液(T)、BO液(B)以及高渗液(HIS)3种不同培养液,在5%CO2的培养箱中进行获能培养,获能培养时间为6h。利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率以及观测法检测精子活力。在培养的0、1、2、4、6h时分别检测上述指标并统计分析,从而筛选出适合蓝狐精子体外获能的培养液。结果显示:B培养液优于T、HIS培养液,最佳获能培养时间t≥6h;HIS可以提高精子顶体反应率,但较高的渗透压不利于精子保存,不建议使用。 相似文献
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肝素和钙离子载体诱导波尔山羊精子体外获能和体外受精 总被引：4，自引：0，他引：4
运用肝素、钙离子载体（IA）协同咖啡因诱导波尔山羊精子体外获能，利用去透明带金黄地鼠卵穿透试验检测了精子的获能效果。结果发现：精卵孵育4h和6h时的穿透率均高于2h时的穿透率；肝素和钙离子载体对精子获能有明显的促进作用，与未添加组相比差异极显著（P〈0．01）；20mg／L和50mg／L的肝素剂量组，去透明带金黄地鼠卵穿透率为64．7％、68．4％；钙离子载体的添加剂量在0．3μmol／L时，穿透率达到68．2％；咖啡因与肝素、钙离子载体具有明显的协同作用。将获能的精子与山羊卵母细胞进行体外受精孵育17h，也获得了60％以上的受精率。 相似文献
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海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响 总被引：8，自引：0，他引：8
在传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液基础上，分别添加25％、50％、75％、100％的海藻糖，研究不同浓度海藻糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明，海藻糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果，其最佳添加浓度为25％，冷冻-解冻后猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高（P〈0．05），分别达到41．38％、46．34％、44．56％、43．51％和64．09％。海藻糖可以明显抑制精子获能，获能处理前精子获能率仅为3．68％，而获能处理后达到41．82％，有利于促进精子获能。精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为2％，海藻糖只有与甘油共同作用，才能在冷冻-解冻过程更加有效地保护精子。猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整率、顶体完整率等之间存在极显著的正相关关系（P〈0．01），而与获能处理前精子的获能率存在显著的负相关关系（P〈0．05）。 相似文献
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精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
精子获能是精子发生顶体反应以及精卵结合受精前重要的生理过程,许多因素参与调节精子获能,其中精子蛋白酪氨酸磷酸化是精子运动力、精子超激活运动、精子获能等多种生理生化过程的重要调控因素。本文就目前有关精子蛋白酪氨酸磷酸化与精子获能之间的研究进展进行综述。 相似文献
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用去透明带金黄地鼠卵异种体外受精技术制备了牛精子单倍染色体。冻精复苏、洗涤、获能用 Ｈａｍ Ｆ１０ 和 Ｒ Ｐ Ｍ Ｉ１６４０ 为主的混合培养基，辅以亚牛磺酸、肾上腺素，１０ μｍ ｏｌ／ Ｌ 钙离子载体（ Ｉ Ａ）处理牛精子 １２～１５ ｍ ｉｎ，诱导获能。异合卵用 Ｔ Ｃ１９９ 培养，以鬼臼毒素和长春花碱阻断原核融合和纺锤体形成，其浓度为常规浓度的 ２ 倍，在第 １ 次卵裂中期制备染色体。结果显示穿卵率达 ８３８％ ，可分析精子染色体核型成功率为 ４２４％ 。认为这是一种有效制备牛精子染色体的方法，并对其影响因素进行了探讨。 相似文献
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【目的】评估泛素激活酶(E1)对猪精子获能、膜重构和体外受精的影响。【方法】选取5头长白猪采集精液,以硫醇酯法评估泛素激活酶(ubiquitin activating enzyme, E1)抑制剂(TAK-243)对精子中泛素(ubiquitin, Ub)与E1结合的影响;将精子分为鲜精组(Fresh)、DMSO组(DMSO)、获能组(Capacitated)及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组,鲜精组用2 mL PBS重悬精子沉淀;获能组用2 mL获能液重悬精子沉淀;DMSO组及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243组分别用2 mL含0.07%DMSO及2.4、4.8和7.2 nmol/L TAK-243的获能液重悬精子沉淀,使用微生物动(静)态图像检测系统检测精子的动力学参数;以Western blotting法检测精子的酪氨酸磷酸化水平;Zn2+荧光探针检测精子的Zn2+含量;花生凝集素染色检测精子的顶体膜重构;免疫荧光法检测顶体表面精子黏附蛋白(AQN-1、AWN)的表达;体外受精法检测TAK-243... 相似文献
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对棕熊精子体外获能前后和异种穿卵的超微结构观察表明，棕熊精子全长７７μｍ，由头、颈和尾３部分组成，头部长７．３ｍ，宽２．５μｍ，主要由核、顶体及顶体后区组成；颈部由中心粒和９条纵行分节的节柱组成；尾部全长６８．２μｍ，其中中段长１３．２１ｍ，线粒体为６５－６８旋，主段中央为“９＋２”的微管结构，基外方被９条致密纤维和纤维鞘包裹。精子获能前群集成簇，运动缓慢；获能后精子呈超激活运动。获能的精子质膜膨 相似文献