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相似文献
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1.
本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应。  相似文献   

2.
盐酸克仑特罗单克隆抗体的研制   总被引:1,自引:1,他引:0  
本研究通过将盐酸克仑特罗分别与自制血清白蛋白、牛血清白蛋白和卵清蛋白相偶联后,制成免疫原和包被抗原,利用单克隆抗体制备技术,制备了能够分泌抗盐酸克仑特罗的单克隆抗体细胞株。而以自制血清白蛋白效价最好,且该株细胞分泌的抗体特异性强,与其它克仑特罗类药物无交叉反应。  相似文献   

3.
在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0.1ng/ml,检测范围在0.1~10ng/ml,通过对24份阳性样品检测并与德国r-biopharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%。  相似文献   

4.
采用重氮化法,将半抗原副品红(Pararosaniline,PA)分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,反应得到免疫抗原和包被抗原,其偶联最佳结合比分别为8.8∶1,12.7∶1,6.9∶1,经紫外扫描光谱和蛋白电泳鉴定得到全抗原。用制备的抗原乳化后免疫小鼠获得了效价较高的多克隆抗体。为进一步制备抗孔雀石绿单克隆抗体打下基础。  相似文献   

5.
磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的研制   总被引:20,自引:2,他引:18  
本研究将磺胺二甲嘧啶与人血清白蛋白、卵清白蛋白联接 ,分别作为免疫原、包被原 ,建立 EL ISA筛选方法 ,并利用杂交瘤技术 ,制备了分泌抗磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的细胞株。经鉴定的单克隆抗体的蛋白亚型为 Ig G1 ;染色体数为 88~94条 ;分子量为 170 .2 KDa;亲和常数为 2 .5× 10 1 0 M- 1 ;与其他 6种磺胺药 (SDM、SDEP、SMM、SMZ、SD、SQ)无交叉反应  相似文献   

6.
在筛选盐酸克仑特罗单克隆抗体的基础上,首次研制出利用单克隆抗体对动物组织中残留的盐酸克仑特罗进行检测的试剂盒,本研究通过对几种包被抗原种类和包被浓度进行筛选,并对单抗和二抗最佳工作效价进行严格的筛选和研究。本试剂盒的最低检测限为0.1ng/m1,检测范围在0.1~10ng/ml,通过对24份阳性样品检测并与德国r—b1opharm公司和英国的RANDOX公司同类试剂盒作对比试验,阳性符合率95.8%。  相似文献   

7.
以重氮化方法将磺胺甲噁唑分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及酶联免疫吸附测定法(ELISA)试验,经筛选产生了特异性单克隆抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲噁唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。  相似文献   

8.
为了制备盐酸克伦特罗(CL)人工抗原及抗体,试验采用重氮化法将盐酸克伦特罗与经过活化的牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别偶联,合成免疫抗原(CL-BSA)和检测抗原(CLOVA),经紫外光谱扫描对偶联物进行鉴定;用免疫抗原免疫BALB/c小鼠制备盐酸克伦特罗多克隆抗体,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定抗体效价。结果表明:盐酸克伦特罗人工抗原合成成功,制备的鼠源多克隆抗体效价达1∶64 000,该抗体可用于下一步试验。  相似文献   

9.
采用N-羟基琥珀酰亚胺法将恩诺沙星(Enro)半抗原与载体蛋白-牛血清白蛋白(BSA)相偶联,制备出了抗Enro单克隆抗体的免疫抗原Enro-BSA。同样的方法,将Enro与卵清白蛋白(OVA)相偶联制备了抗Enro单克隆抗体的检测抗原Enro-OVA。紫外扫描光谱及动物免疫试验结果表明,其偶联成功。  相似文献   

10.
为制备克伦特罗(clenbuterol,CL)单克隆抗体,鉴定其特性,采用重氮化法合成克伦特罗-人血清白蛋白(CL-HSA)作为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤技术建立杂交瘤细胞株,利用体内诱生法制备单克隆抗体,用间接ELISA和间接竞争ELISA分别测定抗体效价和特异性.将细胞反复冻存和传代,考察稳定性.获得细胞株C611...  相似文献   

11.
在饲料中添加使用盐酸克仑特罗(瘦肉精)在我国属违法行为.为考察新疆的饲料安全情况,我们抽取区内生产和经营的近300份饲料进行盐酸克仑特罗的检测试验,现报告如下.  相似文献   

12.
继“磺胺二甲嘧啶和盐酸克仑酶联免疫试剂盒”成果通过农业部组织的专家鉴定后,“玉米赤霉醇、克仑特罗、氯霉素、恩诺沙星和链霉素单克隆抗体试剂盒”及“四环素类酶联免疫试剂盒”又通过了农业部组织的专家鉴定。  相似文献   

13.
金晓峰  章厉劼  古海 《饲料工业》2007,28(10):51-53
<正>盐酸克仑特罗易溶于水,由于饲料中成分复杂,若直接用水溶液提取,则提取液中含大量杂质。利用克仑特罗易溶于乙酸乙酯和水的特性,采用二次提取方法来溶出和纯化样品,即将饲料中的盐酸克仑特罗  相似文献   

14.
近年来随着我市加大对盐酸克仑特罗的检测力度,一些违规养殖户已不再使用盐酸克仑特罗,转而使用另一种违规添加剂——莱克多巴胺。莱克多巴胺属肾上腺素能兴奋剂  相似文献   

15.
应用ELISA检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗方法的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
应用酶联免疫吸附法(ELISA),检测肉猪尿液中盐酸克仑特罗残留,实现了肉猪活体盐酸克仑特罗快速测定。实验结果表明,盐酸克仑特罗的线性范围为200—2000ng/kg,最小检出限为100ng/L,样品不用前处理可直接检测,1个样品的2个平行样测定时间为45min。  相似文献   

16.
《中国动物保健》2011,(11):83-85
国家食药监局:"瘦肉精"不许用了盐酸克仑特罗有个不太光彩的名字,俗称"瘦肉精",但其实它是主要用于支气管哮喘治疗的药物。国家食品药品监督管理局日前发出通知,决定停止盐酸克仑特罗片剂在我国的生产、销售和使  相似文献   

17.
高效液相色谱/质谱联用仪测定盐酸克仑特罗   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用高效液相色谱质谱检测器 ,建立了检测盐酸克仑特罗的方法。其中质谱 (SIR)检出限为 0 .0 1~ 5 μg/kg ,液相色谱中外检测器的检测限为 0 .3μg/kg ,最大吸收峰 2 96nm ,符合农业部规定动物性食品中的盐酸克仑特罗检测限 :1μg/kg。本方法可用于定量、定性检测  相似文献   

18.
为制备抗绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)囊膜蛋白(ENV)胞质尾区(CT)的单克隆抗体,利用生物信息学分析JSRV囊膜蛋白氨基酸序列,根据分析结果合成多肽,将此多肽分别连接钥孔血蓝蛋白(CT-KLH)和牛血清白蛋白(CT-BSA),用CT-KLH作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接ELISA方法筛选分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,获得1株能稳定分泌抗CT蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为8E5,亚类为IgG2a/κ。间接ELISA检测培养上清效价为6.4×103,腹水效价为1×105。Western blot及免疫组化结果显示,这株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体能识别JSRV抗原,与其发生特异性反应。试验结果证明,单抗8E5是绵羊肺腺瘤的重要诊断试剂。应用8E5细胞株分泌的单克隆抗体建立JSRV-ENV的双抗体夹心ELISA检测方法,该ELISA检测方法特异性、重复性和敏感性良好,为快速检测诊断绵羊肺腺瘤和研究囊膜蛋白功能奠定了基础。  相似文献   

19.
旨在制备禽腺病毒血清4型(fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)中国流行株的fiber2蛋白的特异性单克隆抗体。以纯化的FAdV-4中国流行株CH/HNJZ/2015免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,采用基于fiber2蛋白的间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞,经过5次亚克隆,获得2株分泌抗fiber2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2C3和7B4。以制备的2C3和7B4腹水进行亚型鉴定、反应原性、特异性以及中和活性测定。结果显示,成功制备了抗FAdV-4 fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,获得的单克隆抗体均为IgM亚型,可特异性识别FAdV-4及其fiber2蛋白,为FAdV-4的免疫检测和fiber2蛋白功能研究提供了研究材料。  相似文献   

20.
本研究旨在制备犬血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体和研制犬VEGF双抗夹心的ELISA检测试剂盒。研究利用原核表达的方法制备出具有良好反应原性的重组融合蛋白犬VEGF-His,并在此基础上进行了犬VEGF单克隆抗体的制备及鉴定,结果表明,所获得的犬VEGF单克隆抗体对犬VEGF蛋白具有良好的反应原性和较高的特异性。利用此单克隆抗体,与VEGF的兔多克隆抗体血清分别作为夹心ELISA检测试剂盒的上下层抗体使用,建立了以犬VEGF为抗原的夹心ELISA试剂盒的检测方法,并对正常健康犬及乳腺肿瘤患犬血清进行了检测,得出了此试剂盒的阳性和阴性临界值。实验结果表明,此试剂盒具有良好的敏感性、特异性和重复性,且利用本试剂盒对临床样本进行验证时,阳性符合率为87. 5%,阴性符合率为97. 56%,具有较高的临床应用价值。  相似文献   

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