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热休克蛋白（HSP）是生物细胞在受热、生物应激、理化因素等应激原刺激后所产生的一类在生物进化中最保守的蛋白，其中HSP70是最受关注、研究较为深入的一种。本文介绍了HSP70的分类及其主要生物学功能，并阐述了猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae）USPT0（伴侣蛋白Dnak）的研究概况及应用前景。 相似文献
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热应激蛋白（heat stress proteins，HSPs）是机体受到应激原的刺激后产生的几族（如HSP70家族、HSP90家族等）高度保守的蛋白质，对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。其中HSP70家族的HSP70是研究最多的，因为它在大多数生物中含量最多，在细胞应激后生成最显著。HSP70是机体一种重要的非特异性细胞保护蛋白，具有多种生物学功能，如分子伴侣，抗细胞凋亡，抗氧化作用，此外在免疫反应中也起重要作用。HSP70-肽疫苗是HSP70和抗原多肽结合形成的复合物，它可以直接从肿瘤组织或肿瘤细胞系中提取得到，即HSP70-肽肿瘤疫苗；也可以采用生物工程技术的方法在体外表达HSP70，再与已知的抗原多肽交联得到。其中HSP70-肽肿瘤疫苗是研究最多的，已成为肿瘤研究的一个重要内容，HSP70-肽肿瘤疫苗的可行性在实验动物已得到证实，显示了良好的应用前景。 相似文献
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通过检测热休克蛋白70（heat shock protein,HSP70）在免疫器官及细胞上的分布规律,研究热应激雏鸡免疫器官中热休克蛋白70的定位及表达。结果显示：HSP70在常温饲养雏鸡的胸腺、脾脏、法氏囊中均有明显的表达,在胸腺、脾脏的细胞中主要以胞浆表达为主,而法氏囊中则以胞核表达为主,脾脏中HSP70的表达强度最为稳定。热应激时,胸腺中HSP70的IOD值随日龄增长而逐渐降低,末期显著低于对照组（P〈0．05）;脾脏中HSP70的IOD值随日龄增长逐渐降低,末期稍低于对照组（P〉0．05）;法氏囊中HSP70的IOD值与饲养日龄间无明显规律,末期高于对照组（P〉0．05）。结果表明,热应激对雏鸡胸腺的损伤明显,胸腺细胞通过自身合成HSP70抵抗热应激的能力较差,而对脾脏和法氏囊影响较小。 相似文献
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以东北野猪成纤维细胞为研究对象,利用实时荧光定量PCR技术,分析4、15、25和32℃不同温度冷应激条件下细胞内HSPT0mRNA表达变化规律。结果显示在冷应激的低温处理过程中,HSP70mRNA转录量在各温度均为见显著增加;在冷应激的复温培养过程中,HSP70mRNA转录量在4℃和15℃处理后4h后,复温培养的4～8h显著增加（P〈O．05）;在25℃和32℃处理后4h后,复温培养未能诱导细胞内HSP70mRNA转录量显著增加（P〉0．05）;细胞在4℃和15℃处理2、4、6和8h后,复温培养4h,HSP70mRNA转录量随处理温度的减低和时间的延长而增加,处理4～8h组显著高于对照组（P〈0．05）,在25℃和32℃处理2、4、6和8h后,复温培养未能显著诱导HSP70mRNA的转录（P〉0．05）。结果表明,冷应激诱导东北野猪成纤维细胞内HSP70mRNA转录量的增加,不是发生在低温处理的应激阶段,而是发生在复温后的细胞应激阶段,温和冷应激（25～32℃）未能诱导复温后HSP70mRNA转录量的显著增加,强度冷应激（4～15℃）诱导复温后HSP70mRNA转录量的显著增加,且与冷应激的强度和时间成正比。 相似文献
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根据已发表的Bcl-2基因序列设计3对siRNA（Small interference RNA）序列，构建干扰表达载体，转染体外培养的鹅卵泡颗粒细胞，48h后利用流式细胞术（Flow cytometry，FCM）检测颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量、凋亡和增殖情况，收集细胞培养液用放射免疫分析法检测孕激素（P）的分泌水平；此外，还检测了F1～F4卵泡、最小的排卵前卵泡（The smallest preovulatory follicle，SPF）、小黄卵泡（Small yellow follicle，SYF）和闭锁卵泡（Atresic follicle）颗粒细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡情况。结果表明：（1）各级卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白的表达存在着差异，正常卵泡颗粒细胞Bcl-2蛋白表达量显著高于闭锁卵泡（P〈0．05），SPF颗粒细胞Bcl-2蛋白表达水平显著高于SYF（P〈0．05）；（2）干扰组Bcl-2蛋白表达水平显著低于所有对照组（P〈0．05），而细胞凋亡指数（Apoptosis index，AI）、增殖指数（Proliferation index，PI）和P分泌水平均高于对照组。 相似文献
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<正>热休克蛋白(heat shock protein,HSP)或热应激蛋白(heat stress protein,HSP)是机体受到应激原的刺激后产生的几族高度保守的蛋白质,对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。其中热休克蛋白70(HSP70)是最重要的一种HSP,它具有多种生物学功能,包括分子伴侣功能、参与免疫反应、抗细胞凋亡功 相似文献
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本试验旨在研究HSP60与马立克病肿瘤发生、发展之间的相关性。通过人工感染,建立鸡马立克病肿瘤模型,定期剖杀,利用病理组织学和免疫组织化学方法,检测HSP60与肿瘤细胞定位之间的相关性;设计HSP60 RNA干扰序列,构建重组慢病毒,转染MSB-1细胞,利用流式细胞技术,探索降低HSP60转录表达对MSB-1细胞凋亡水平的影响。结果显示：HSP60在肿瘤细胞的细胞质内强表达;成功构建了HSP60 RNA干扰慢病毒,且5147序列干扰效果最佳;5147序列慢病毒转染48 h时,与对照序列组和空白对照组相比,HSP60转录、表达水平极显著降低（P<0.01）,MSB-1细胞凋亡水平极显著升高（P<0.01）。在马立克病肿瘤发生、发展过程中,HSP60组织细胞定位与肿瘤细胞具有明显的相关性,降低HSP60表达水平能够导致MSB-1细胞凋亡升高,说明HSP60对肿瘤细胞的存活具有重要的生物学作用。 相似文献
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热休克蛋白70生物学功能及在家禽组织中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
热休克蛋白(Heat Shock Protein,HSP)是生物细胞在受到热应激等应激源刺激后所产生一类多肽类蛋白质,其中HSP70是HSP家族中最重要、最保守且表达最广泛的蛋白之一,其普遍存在于各种生物体之中。现对HSP70调节细胞凋亡、增强细胞耐热、细胞抗氧化、机体免疫和分子伴侣等生物学功能进行综述,并对其分子调控机制及在家禽组织中的表达水平作了阐述,为进一步探讨HSP70调控家禽的热应激反应及分子机制奠定理论基础。 相似文献
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采用实时荧光定量PCR法分析了牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid，TCDCA）对佐剂性关节炎模型（adjuvant arthritis，AA）大鼠成纤维滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes，FLS）中由糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）介导的热休克蛋白90基因（heat shock protein 90 gene，HSP90）mRNA表达的影响。结果表明，TCDCA可以极显著性（P〈0.01）下调FLS细胞内HSP 90 mRNA的表达，同时加入GR的特异性抑制剂RU486后可抑制TCDCA对HSP 90 mRNA的作用。由此证明了TCDCA是通过GR受体发挥抗炎和免疫调节作用的。 相似文献
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中药制剂抗肉鸡热应激作用机理研究 总被引：1，自引：1，他引：0
将50只1日龄AA肉仔鸡饲养（高温条件下饲养）于MFD-233型人工气候室内,随机分成对照组和试验组,试验组肉仔鸡7日龄时在日粮中添加0．1％的中药,连用7d;然后分别于14,21日龄取法氏囊,用流式细胞仪检测应激状态下法氏囊细胞凋亡率和细胞周期时相变化,用Western—blot方法检测法氏囊中Bcl-2和caspase-3基因蛋白表达水平。试验结果表明：试验组肉仔鸡14,21日龄法氏囊细胞凋亡率明显低于对照组,差异显著（P〈0．05）;细胞周期时相发生变化,G1期细胞数量明显减少（P〈0．05）,G2期细胞数量明显增加（P〈0．05）,S期细胞数量变化不大（P〉0．05）;试验组肉仔鸡法氏囊中Bcl-2蛋白表达量高于对照组且差异显著（P〈0．05）,而caspase-3基因蛋白表达水平与Bcl-2相反,对照组表达量明显高于试验组且差异显著（P〈0．05）。这表明中药制剂对缓解热应激造成的法氏囊细胞凋亡作用可能是通过上调Bcl-2和下调caspase-3基因蛋白表达水平来完成的。 相似文献
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马广鹏 《中国预防兽医学报》2011,33(10)
细胞凋亡是与机体组织自我稳定机制有关的主动的程序性死亡,是细胞在一定生理和病理条件下遵循自身程序的生理性死亡.热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)是广泛存在于原核和真核细胞中的一组结构上高度保守的多肽,HSP 70家族因具有分子伴侣、细胞保护、抗细胞凋亡、抗氧化以及参与免疫应答等多种重要生理功能而成为研究热点. 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）侵染Marc145过程中HSP27和Annexin A2蛋白可参与病毒粒子的组装过程,且HSP27可起到抑制侵染早期细胞凋亡,增加病毒复制时间的作用。本研究分别构建HSP27和Annexin A2下调的Marc145细胞系,经PRRSV感染后发现,与空白对照相比,两者子代病毒TCID50值有明显下降。这一结果为研究PRRSV侵染过程及HSP27和Annexin A2调控机制奠定了基础,也为疫苗的研制提供了新的思路。 相似文献
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《中国兽医杂志》2016,(11)
葛根素(Pue)是从中药野葛或甘葛藤根中提取的黄酮类化合物,有明显的抗氧化功能。Pue是否有对热应激时牛睾丸支持细胞(SCs)保护作用尚不清楚。本研究采用42℃热应激1 h,然后34℃恢复6 h。用CCK-8检测细胞存活率;用Hoechst33258检测细胞凋亡;用分光光度法检测细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的变化,以及Western-Blot检测HSP70蛋白表达。结果显示,热应激后细胞存活率下降,细胞发生凋亡,产生氧化损伤。葛根素和维生素E可以极显著降低热应激时细胞MDA含量,显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。Pue与维生素E组相比无显著性差异。此外,葛根素可显著增加受热应激SCs中HSP70蛋白的表达。上述结果表明,葛根素能减少热应激下SCs的氧化损伤,其机制可能与提高抗氧化酶活性及增加热休克蛋白HSP70的表达有关。 相似文献
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为探讨银杏叶提取物（EGb）对去卵巢大鼠神经细胞的保护作用及其机制，采用免疫组织化学SP法检测了假手术大鼠、去卵巢大鼠和去卵巢后用EGb治疗大鼠的大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl～2和Bax的表达量。结果，与假手术大鼠相比，摘除双侧卵巢的大鼠大脑皮质中Bcl-2阳性细胞的数目和表达强度极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的数目和表达强度极显著增加（P〈0．01）；用EGb对摘除双侧卵巢的大鼠治疗后，其Bcl-2阳性细胞的表达强度极显著增加（P〈0．01），而Bax阳性细胞的数目极显著下降（P〈0．01），Bax阳性细胞的表达强度也显著下降（P〈0．05）。结果表明，摘除双侧卵巢后大鼠因缺乏内源性雌激素而导致大脑皮质中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达量发生了改变，而EGb能通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达对神经细胞起保护作用。 相似文献
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本试验以谷氨酰胺作为热休克蛋白70(HSP70)诱导剂,从细胞凋亡线粒体信号转导途径探讨HSP70对热应激猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)凋亡相关因子的影响。试验以体外培养的猪小肠上皮细胞为模型,分别加入不同浓度(1、2、4、6、8、10 mmol/L)谷氨酰胺的培养基中培养24 h,提取总RNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR和Western blot检测HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量,筛选出谷氨酰胺诱导HSP70表达的最佳浓度。取对数生长期的细胞分为3组,分别为对照组(Con组,37℃培养12 h)、热应激组(Hs组,42℃培养12 h)、谷氨酰胺组(Gln组,6 mmol/L谷氨酰胺、42℃培养12 h)。采用Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HSP70、凋亡酶激活因子-1(Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的mRNA和蛋白的相对表达量。结果表明:谷氨酰胺对HSP70上调表达呈先上升后下降的趋势,6 mmol/L的谷氨酰胺诱导时HSP70 mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于其他浓度(P<0.05),作为后续试验中Gln组的诱导条件。与Con组相比,Hs组细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),HSP70、Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01)。与Hs组相比,Gln组细胞凋亡率极显著降低(P<0.01),但仍极显著高于Con组(P<0.01);Gln组HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01);Gln组Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的相对表达量极显著降低(P<0.01),但极显著高于Con组(P<0.01);Gln组Bcl-2 mRNA和蛋白的相对表达量极显著升高(P<0.01),但极显著低于Con组(P<0.01)。由此可见,上调HSP70的表达可有效缓解热应激导致的猪小肠上皮细胞凋亡。 相似文献
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鸡免疫器官中半胱天冬酶-3、Bcl-2的表达与细胞凋亡的关系 总被引：11，自引：4，他引：7
用流式细胞法测定了30日龄AA肉鸡的胸腺、法氏囊和脾脏细胞中半胱天冬酶－3（caspase-3）、Bcl-2蛋白的表达及细胞周期和细胞凋亡率。结果：胸腺、法氏囊、脾脏中G0／G1期细胞比例分别是：96.44％、68.09％、92.97％；G2／M期细胞比例是：0.80％、1.04％、2.36％；S期细胞分别为：2.77％、30.52％、4.67％，表明细胞增殖活性的增殖指数（PI）是：3.56、31.92、7.03。胸腺、法氏囊、脾脏细胞凋亡率分别为：3.99％、0.32％、0.22％；caspase-3表达的阳性细胞率是：14.24％、8.60％、5.49％，与细胞凋亡率呈方向一致的变化；Bcl-2蛋白表达阳性细胞率依次是：20.59％、30.24％、31.32％，与细胞凋亡率呈反向变化。上述结果表明：鸡免疫器官细胞凋亡是依赖caspase-3介导的细胞凋亡，caspase-3和Bcl-2是鸡免疫器官发育的重要调节物。 相似文献