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1.
鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察 总被引：2，自引：0，他引：2
用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。 相似文献
2.
本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）用于检测ＥＤＳ－７６病毒抗原的标准化程序。对纯化ＥＤＳ－７６病毒抗原的最低检出量为１ｎｇ／Ｄｏｔ,其敏感性约为ＨＡ的１５．６倍。ＥＤＳ－７６阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对ＥＤＳ－７６病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。 相似文献
3.
ND-EDS-76异源二联油苗田间试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
鸭源ＮＤＶ－Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２每株混合接种同一鸭胚，培养９６ ｈ收集尿囊液，制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群，在 １０，２０，３０，１８０，３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较，结果差异不显著。在免疫后 ３０，１８０，３６０ ｄ随机取鸡各 ６０只为 １组，用 ＮＤＶ－Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较，结果表明两种疫苗在 ３０，１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％，３６０ ｄ对ＮＤ和ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２％和８７％以上．对临床２００万只开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ－ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗，可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６强毒的攻击。 相似文献
4.
从发病鸡群中分离的产蛋下降综合症病毒（ＥＤＳ＿（－７６））Ｈ＿（９１）株接种鹅胚收获的尿囊液，用氯化铯密度梯度离心等方法纯化了ＥＤＳ病毒。电镜下观察到病毒无囊膜，大小为７０～８５ｎｍ。从纯化的病毒悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现一条分子量为３４ｋｂ、背景清晰的核酸带。用６种限制性内切酶对其基因组ＤＮＡ进行了酶切分析，各种酶消化分别产生４，４，９，９，１１和３条片段。将此结果与ＥＤＳ标准株ＡＶ＿（－１２７）株基因组ＤＮＡ由相同的内切酶消化的结果进行比较发现，由ＨｉｎｄⅢ和ＳｍａⅠ消化２个病毒基因组ＤＮＡ产生的片段数及大小有些差异。 相似文献
5.
从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。 相似文献
6.
ＥＤＳ７６ＳＤ—１株油乳剂灭活苗免疫试验钱凤芹，胡贞延（山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南２５０１００）某养鸡场４０００只罗曼商品代蛋鸡，经流行病学调查，血清学检测确诊为鸡产蛋下降综合症。利用自制的ＥＤＳ７６ＳＤ－１毒株制成的油乳剂灭活苗与标准毒株Ｅ... 相似文献
7.
采用鸭胚传代的方法，首次从陕西省关中地区ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性鸡群的卵巢和输卵管中分离到１株病毒，经血凝与血凝抑制试验、电镜现实、乙醚和氯仿的敏感性试验、核酸型鉴定试验及回归动物试验等，鉴定该分离物为ＥＤＳ－７６病毒。从病原学上证实陕西省已有该病的发生与流行 相似文献
8.
鸭源ＮＤＶ—Ｄ１０毒株与ＥＤＳ－７６ＧＣ２毒株混合接种同一鸭胚,培养 ９６ ｈ后收集尿囊液,制成ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗。然后与普通二联油乳剂灭活疫苗接种同一鸡群,在 １０ ｄ、２０ ｄ、３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ分别检测抗体滴度并进行比较,结果差异不显著。在免疫后３０ ｄ、１８０ ｄ、３６０ ｄ,随机取鸡各 ６０只为一组,用 ＮＤＶ—Ｆ４８Ｅ９和 ＥＤＳ－７６ＧＣ２强毒株进行攻毒保护试验并进行比较,结果两种疫苗在 ３０ ｄ、１８０ ｄ免疫保护率均为 １００％,３６０ ｄ对 ＮＤ和 ＥＤＳ－７６的免疫保护率分别为９２ ％和８７ ％以上,差异不显著。对开产前１２０日龄左右蛋鸡群免疫接种ＮＤ—ＥＤＳ－７６异源二联油乳剂灭活疫苗,可有效地保护整个产蛋期对ＮＤ和ＥＤＳ－７６自然强毒的攻击,是一种理想的生物防疫制剂。 相似文献
9.
本试验对２株ＥＤＳ７６病毒进行了培养特性，理化特性，感染性和血清学相关性研究。结果表明，Ｂ４株和Ｎ３株在鸭胚中生长最佳，可使鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ），鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）产生细胞病变。在理化特性和感染性方面，Ｂ４株可抵抗５６℃６０ｍｉｎ、６０℃２０ｍｉｎ，ｐＨ３、ｐＨ１０作用和０．０２５％甲醛溶液灭活，对ＤＥＦ、ＣＥＬ的感染滴度ＴＣＤ５０为１０６．５０，１０５．７８；Ｎ３株可抵抗５６℃１５０ｍｉｎ、６０℃６０ｍｉｎ，ｐＨ２、ｐＨ１１作用和０．１％甲醛灭活，对ＤＥＦ、ＣＥＬ的ＴＣＤ５０为１０７．５６、１０６．３０。Ｂ４株和Ｎ３株的血清学关系相同，并与标准毒株ＡＶ１２７一致。本研究发现，Ｂ４株和Ｎ３株之间在理化特性和感染性方面存在差异。 相似文献
10.
用减蛋综合症（ＥＤＳ‘７６）ＡＶ－１２７和新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ毒株，分别接鸭胚和鸡胚，收获尿囊液，福尔马林灭活，用白油佐剂乳化成二联灭活疫苗。本苗接种产量鸡后１４天产生ＮＤ和ＥＤＳ’７６抗体，１个月持续升高，而ＮＤＨＩ抗体产生时间略早。二联苗物单苗有相同的免疫效果，两者无干扰性，免疫剂量以０．５ｍｌ／只为宜。接种后９个月ＨＩ抗体仍维持在较高水平，并能经受强毒的入击，疫苗在４－８℃条件下贮存１ 相似文献
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鸭源禽流感病毒的分离与鉴定 总被引：5，自引：0，他引：5
用灭菌棉拭共采集蛋鸭和肉鸭的泄殖腔样品６２只，鸡胚尿囊腔传代接种法分离到１株病毒，该病毒可凝集鸡红细胞，且不能被ＮＤ，ＥＤＳ－７６阳性血清抑制，用病变绒毛尿囊膜制备抗原与禽流感琼扩标准阳性血清作用，出现明显的白色沉淀线，证明该分离株为Ａ型流感病毒，血凝素亚型分析结果为Ｈ９，电镜负染观察可见典型的禽流感病毒粒子，致病性试验结果表明该分离株对鸡表现为弱致病性，研究结果还表明，环境（特别是水体）贮毒可能 相似文献
12.
对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清（其中非免疫鸡群３２３份，免疫鸡群１８２份）用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感；疫苗注射对该病的发生具有很好的预防作用 相似文献
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鸭源新城疫病毒（ＮＤＶ－Ｄ１０）和减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）可以在鸭胚中同时良好增殖，两种病毒的血凝价分别与单独接种时一致；同胚增殖病毒对鸭胚或ＳＰＦ鸡胚的感染能力和致病性分别与单独接种组无显著差异；利用同鸭胚增殖病毒的尿囊液制备的二联油乳剂灭活疫苗接种免疫鸡可以分别抵抗ＤＮＶ强毒和ＥＤＳＶ强毒的攻击。 相似文献
14.
采用ＲＴ－ＰＣＲ技术，利用２对此物，从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）强毒石门株感染的猪血中成功扩增了ＮＳ４Ｂ基因，片段大小分别为７５７ｂｐ和７７４ｂｐ。克隆后经酶切鉴定，自动测序和序列分析，结果显示该基因较保守，与其他猪瘟病毒毒株均有很同的同源性，与同 ＢＶＤＶＳＤ－１株和ＮＡＤＬ株也有较高的同源性。 相似文献
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陕西关中地区鸡产蛋下降综合征的调查 总被引：1，自引：0，他引：1
对陕西省宝鸡市等９个市（县、区）的３５个ＥＤＳ－７６非免疫鸡群和某大型养鸡场的１４个ＥＤＳ－７６免疫鸡群进行了流行病学调查，并采集５０５份血清用微量血凝抑制试验进行了ＥＤＳ－７６抗体监测。首次确定陕西省确有ＥＤＳ－７６的发生与流行，其非免疫鸡群的阳性率为３５．０９％，有６０％的鸡群受到感染，发病情况和病程与国内外报道的基本一致。调查结果还表明：红壳蛋鸡比白壳蛋鸡对该病更为易感，疫苗注射对该病的发生 相似文献
16.
采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致 相似文献
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RT-PCR和Digoxigenin标记的核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒试验研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用２对已发表的引物和１对自行设计的引物对同一ＩＢＶＨ１２０株进行ＲＴ－ＰＣＲ，分别获得了Ｓ１基因上与引物设计相一致的１７２０ｂｐ，２２８ｂｐ，６０２ｂｐ，的扩增片段。用自行设计的引物对７个毒株（Ｈ１２０，Ｈ５２，Ｍ４１，Ｃｏｎｎ，Ｇｒａｙ，Ｔ，Ｈｏｌｔｅ）和５个分离株（宜毒，上毒，云毒，ＨＫ，１１８）的含毒尿囊液或纯化病毒进行ＲＴ－ＰＣＲ。结果除Ｈｏｌｔｅ株，２个分离株（宜毒，云毒）外，其余均被成功地扩增出６０２ｂｐ的片段。将ＩＢＶＨ１２０株０６ｋｂＰＣＲ产物用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记为探针，分别与上述各ＩＢＶ毒株的核酸及其扩增产物进行核酸杂交，均呈现阳性反应，而该探针不与ＩＢＤＶ和ＮＤＶ的ＤＮＡ，ＥＤＳ－７６病毒的ＤＮＡ及正常鸡胚尿囊液抽提物反应。ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交技术提供了直接从尿囊液中快速检测出病毒，作为诊断ＩＢＶ的新方法。 相似文献
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免疫增强剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响 总被引：27，自引：0，他引：27
用维生素Ｅ－硒（ＶＥ－Ｓｅ）注射液、中草药１号、硫酸锌、牲血素、胸腺肽和左旋咪唑作免疫增强剂，采用β－微量鸡新城疫血凝抑制试验（ＮＤ－ＨＩ）、醋酸纤维薄膜电泳（测血清丙球蛋白γ－Ｉｇ）以及α－蔡酯酶法（ＡＮＡＥ），检测了参试雏鸡的３种免疫学指标。结果表明：ＶＥ－Ｓｃ注射液对蛋用雏鸡的ＮＤ－ＨＩ抗体、γ－Ｉｇ和ＡＮＡＥ＾＋淋巴细胞均比对照组明显提高，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。中草药１号具有与ＶＥ－ 相似文献
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减蛋综合征病毒基因文库的构建 总被引：5，自引：0，他引：5
采用差速离心法纯化了鸭胚尿囊液中的减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）ＷＰＤＶ２０５病毒并提取了病毒基因组核酸。选用ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ两种限制性内切酶对病毒基因组ＤＮＡ进行双酶切处理，结果产生７个片段，在这７个片段中，只具有ＢａｍＨⅠ酶切位点的片段有２个，只具有ＥｃｏＲⅠ酶切位点的片段有３个，具有双酶切位点的片段有２个。将其中的５个片段分别插入到ｐＵＣ１８相应多克隆位点中，建立了ｐＥＤＳＶＢＥ１、ｐＥＤＳＶＢＥ２、ｐＥＤＳＶＢ１、ｐＥＤＳＶＢ２、ｐＥＤＳＶＥ５个重组子，并对这５个重组子进行了酶切鉴定 相似文献
20.
采用ＲＴ－ＰＣＲ技术,利用２对引物,从猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）强毒石门株感染的猪血中成功扩增了ＮＳ４Ｂ基因,片段大小分别为７５７ｂｐ和７７４ｂｐ。克隆后经酶切鉴定,自动测序和序列分析,结果显示该基因较为保守,与其他猪瘟病毒毒株均有很高的同源性,与同属的ＢＶＤＶＳＤ－１株和ＮＡＤＬ株也有较高的同源性。 相似文献