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1.
光生物素标记六邻体蛋白基因探针检测减蛋综合征病毒的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
根据基因文库中减蛋综合征病毒（EDSV）AV127株的序列设计1对引物，从四川本地分离的EDSVSG9301株中扩增出六邻体蛋白基因并将其克隆到PUC18的多克隆位点中，经PCR、酶切分析、DNA杂交分析和序列测定证明，所扩增、克隆的基因包括了六邻体蛋白基因从起始密码子到终止密码子在内的完整序列。用光生物素对含六邻体蛋白基因的重组质粒标记后，采用斑点印迹法对4株EDSV（标准株AV-127株和3株四川分离株）、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和鸭瘟病毒的核酸进行检测，结果，该探针能检测出4株EDSV，但不能检出新城疫病毒、传染性支气管炎病毒和鸭瘟病毒。表明该六邻体蛋白基因探针具有特异性，检测的灵敏度高达1pg。 相似文献
2.
鹑源减蛋综合征病毒QAVc—94株的酶切图谱分析 总被引：2，自引：0，他引：2
选HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、SphⅠ、BamHⅠ、BamHⅠ和BglⅠ6种限制酶，对QAVc-94株和AV－127国际标准株的DNA进行酶切图谱比较结果发现，QAVc-94株用上述6种酶酶切得到的片段数分别为10、3、12、4、6、9条，将各片段碱基数相加得出其基因组长34.7kb，略高于国内的报道，而与Zask等的结果相接近，从分子水平上将QAVc-94鉴定为一株EDSV。对照AV－127株的酶切结果与文献报道相符。QAVc-94株酶切图谱分析显示：HindⅢ和EcoRⅠ的酶谱与报道的其他EDSV分离株基本相似，HindⅢ的酶谱与国内研究最多的AA－2长春分离株一致，EcoRⅠ的酶谱结果与Zask等报道的B8／78株相同。而其他4种限制酶的酶切图谱与已报道的各地分离株相比，差异较大，如PstⅠ和BglⅠ多出2－5个识别位点。说明鹌鹑源EDSV已与鸡源、鸭源、鹅源EDSV有较大的变异，是一株血清型相同而基因型不同的鹌鹑减蛋综合征病毒。 相似文献
3.
从豫西地区发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒 (EDSV) ,经非免疫鸡胚增殖后 ,用差速离心法纯化和蛋白酶 K法抽提 ,得到全长约 34.3kb的 EDSV基因组。分别以 Hind 、Bam HI、Eco RI及 Bam HI Eco RI对 EDSV -g DNA进行限制性酶切 ,分别得到 10、4、4和 7个片段。用 10 g/ L琼脂糖凝胶电泳酶切样品并以凝胶成像系统对酶切片段的大小和分子量进行测定。将这些结果与 NE4、WPDV2 0 5、AV-12 7标准株及 B8/ 78株基因组 DNA由相同酶切的结果进行比较 ,发现豫西地区 EDSV与AV- 12 7和 B8/ 78较为相似 ,但也存在微小差别 ,与其他毒株的差别较大 相似文献
4.
1994年～ 1995年 ,从云南呈贡县爆发的一群有减蛋综合征症状 ,血清含有EDSV血凝抑制抗体的鹌鹑泄殖腔分离到一株病毒 ,并命名为QAVc 94株。经形态学、培养特性、血凝特性、理化特性、免疫电镜、酶切图谱分析、交叉血凝抑制试验以及动物接种结果确定 ,QAVc 94株属于禽腺病毒Ⅲ群中血清型相同而基因型不同的鹌鹑减蛋综合征病毒。病毒颗粒略似球形 ,无囊膜 ,直径为 70～ 75nm ,核酸大小为 34 7kb ,分子量为 2 2 9× 10 6Da ,其TCID50 为 4 5。 相似文献
5.
用SDS-ProteinaseK消化EDSV抗原-抗体复合物,苯酚-氯仿抽提DNA,得到了完整的EDSV基因组DNA,用限制性内切酶BalⅠ、BalⅡ、BamHⅠ、ClaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、HpaⅠ、KpnⅠ、PstⅠ、PvuⅡ、SalⅠ、SmalⅠ、XbaⅠ酶切及EcoRⅠ BamHⅠ双酶切消化,对EDSV分离株Hd1的DNA进行了限制性内切酶酶切分析。结果表明,分离株Hd1与标准株AV127DNA各酶切片段数及各片段的相对分子量(kb)未见差异,说明分离株Hd1和标准株AV127属于同一基因型。将EcoRⅠ BamHⅠ双酶切得到的7个片段,与双酶切线性化的pUC19载体质粒连接,转化E.coliDH5α,克隆了其中的5个片段。 相似文献
6.
通过电镜观察、理化特性、致病性、血凝性及血清型鉴定，证实从广西鸡减蛋综合征（egg drop syndromes,EDS）抗体阳性鸡群所产软壳蛋蛋清中分离的毒株GEV属鸡减蛋综合征病毒（EDSV），与EDSV国际标准毒株AV127属同一血清型。用GEV株研制的灭活油佐剂疫苗，每只鸡肌肉注射0．5mL、1．0mL均能产生高效价EDS抗体，且持续至少5个月以上。 相似文献
7.
鸭源新城疫病毒分离株的生物学特性鉴定 总被引：1，自引：1，他引：1
从河北某鸭场产蛋锐减而无其他典型新城疫症状的高抗体蛋鸭群中分离到1株病毒(命名为HB/1/06/Dk).经过鉴定,该分离株具有血凝性,可被新城疫病毒(NDV)标准阳性血清所抑制,不能被禽流感病毒(AIV H5与H9亚型)阳性血清和减蛋综合征病毒(EDSV)标准阳性血清抑制;该病毒致死鸡胚的平均时间(MDT)为67.2 h,1日龄SPF雏鸡的脑内接种致死指数(ICPI)为0.86,表明该病毒属中等毒力毒株. 相似文献
8.
山羊痘病毒基因组DNA的提取及酶切分析 总被引：1，自引：0，他引：1
对山羊痘病毒贵州分离株（LD株和QL株）和参考株（Y株和B株）,采用Vero细胞增殖和差速离心浓缩后,以SDS-蛋白酶K法提取病毒基因组DNA,以3种核酸内切酶EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ进行酶切图谱分析。接种山羊痘病毒48h～60h后,Vero细胞呈现典型的细胞病变;病毒基因组提取样本的纯度在1．8～1．9之间,经琼脂糖凝胶电泳均出现一条纯净的DNA条带;经3种内切酶酶切后,贵州分离株的酶切图谱与参考疫苗毒株Y株基本一致,比参考弱毒株B株少3条～4条酶切片段。这为山羊痘病毒毒力基因的进一步研究奠定了基础。 相似文献
9.
分离自不同种、不同部位的6种牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)毒株经限制罂内切酶 EcoRⅠ、HindⅢ、RstⅠ和 SmalⅠ消化分析后呈现3种酶切电泳图.2株分离自精液的病毒(美精株和洛精株)4种酶切电泳图完全相同;Bartha Nu/67株与美精株和洛精株仅在 EcoRⅠ酶切图谱上有微小差异(一个酶切位点的变化),其它3种酶切图也完全相同。分离自水牛的 B7株与其它5种病毒DNA 的酶切图谱差异十分显著。2株分离自呼吸道的病毒(IBR-125和 LA 侏)与其它几株病毒差异也较明显,但二者之间也有一定的差异。 相似文献
10.
根据已发表的鸡产蛋下降综合征病毒(egg drop syndrome virus,EDSV)基因序列设计特异性引物,目的基因片段大小为273 bp,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)对EDSV进行扩增。结果表明,该方法对EDSV标准株扩增为阳性,对鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病毒及肾型传染性支气管炎病毒的扩增结果均为阴性。应用PCR技术对试验样品进行检测,均能够扩增出预期的DNA片段。由此可以得出,PCR技术可以用于鸡产蛋下降综合征病毒的检测。 相似文献