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《上海畜牧兽医通讯》1993,(4)
关于牛的冷冻受精卵移植的研究(胚胎移植)。供卵牛是经过超排处置的10头黑白花牛和2头黑毛和牛,另外对2头自然发情的牛自其桑椹胚采取66个胚泡供本次试验使用。冻结的容器采用6×70mm的玻璃安瓿,用1.0摩尔的甘油作冻结保护物质。冻结法:35℃～-5℃以1℃1分的速度冷却(置于-5℃的冰中),再以0.3℃/分的速度冷却至-36℃。然后由-36℃直接移入液氮中保存;其融解的方法是置于37℃温水中融解。融解后,66个受精卵中有39 相似文献
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山羊胚胎简易冷冻试验 总被引：3，自引：0，他引：3
用RPE冷冻器冷冻20枚山羊桑椹胚和囊胚。冷冻液为1M甘油杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)。胚胎装于0.25ml塑料细管内,0℃时置入冷冻器。以1℃/分降温,-6.5～-7℃诱发结晶,再以0.5℃/分(0.3～0.8℃/分)降温至-30℃,然后投入液氮保存5～12天。35℃水浴解冻。20枚胚胎冻后形态正常率为65％(13/20)。将13枝形态基本正常的胚胎移植给5只受体羊,结果4只受体羊妊娠,产羔7只,冻胚存活率为35％(7/20)。除1只冻胚羔产下后90分钟死亡外,另6只冻胚羔生长发育正常。 相似文献
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用6～7日龄奶牛胚胎进行超低温冷冻保存试验。有10个胚胎在1.5MDMSO中以1℃/分从室温降到-7℃,诱发结晶后,以0.3℃/分降温到-60℃,然后放入液氮内保存373～375天。解冻时从液氮取出,以4℃/分的速率(-50℃到-10℃)升温到-10℃,直接放入20℃水中。除去DMSO后,有5个形态正常。把8个(其中3个异常)移给4头受体后,有2头妊娠,1头生下1对双胎(1母1公),另1头产1母犊。试验比较了不同冷冻保护剂和不同方法冷冻保存奶牛胚胎后的结果。40个胚胎在1.5M DMSO中用缓慢冷冻—解冻方法冷冻保存2-375天后,有17个形态正常(42.50％)。把20个胚胎移给13头受体,有2头妊娠(15.38％),63个胚胎在1.0M甘油中用快速冷冻—解冻方法冷冻保存1-297天后,找回的57个中有30个形态正常(52.63％)。把29个胚胎移给22头受体没有1头受孕。试验表明,奶牛胚胎在1.5M DMSO中用缓慢冷冻—解冻方法冷冻保存1年后仍然存活。解冻后正常胚胎的百分率和在1.0M甘油中用快速冷冻—解冻方法冷冻保存的胚胎解冻后的正常胚胎百分率没有显著差异。但后一种冷冻方法冷冻的胚胎移植后没有成功。应再进一步试验研究。 相似文献
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绵羊冷冻胚胎移植成功 总被引：3，自引：0，他引：3
以成年寒羊母羊做供、受体。使用 FSH(300单位)和 LH(150单位),进行供体超数排卵,并在发情周期的第6～8天(发情开始当天=0天)用杜氏磷酸盐缓冲液(PBS)+5%失活犊牛血清,冲洗子宫角手术采卵。只有形态正常的胚胎用于冷冻。胚胎冻前分6步(0.25M、0.5M、0.75M、1.0M、1.25M 和1.5M,每种浓度停留7～10分钟)添加抗冻剂(DMSO)。解冻后也分6步(1.5M、1.25M、1.0M、0.75M 和0.25M,每种浓度停留10分钟)除去 PBS 液中的 DMSO。胚胎在盛有0.25～0.3毫升 PBS 液(Whitting-ham,1971)的安瓿(容量1.0毫升)中冷冻,PBS 液含1.5M 的 DMSO。自1979年8月24日至12月27日,胚胎的冷冻和移植试验分三批进行。第一批胚胎是按 Willadsen(1976)冷冻羊胚胎的方法冷冻的,并降温至-120℃时将安瓿移入液氮。安瓶从-80℃--5℃,以12℃/分钟的速度解冻,从-5℃放入手中快速升温解冻。第二和第三批,胚胎是按 Willadsen(1978)所述及的牛胚胎冷冻和解冻方法进行的,并降温至-60℃将安瓿直接投入液氮。将安瓶放入-50℃的酒精浴中,以4℃/分钟的速度解冻至-10℃。从-10℃将安瓿放入手中快速解冻。第三批试验的受体根据母羊的健康和繁殖情况进行了挑选。共49个胚胎(47个形态正常的和2个形态异常的)移入23只受体,4只母羊妊娠。其中一只受体早产,羔羊死亡;一只受体母羊产了3只羊羔,共产了五只羊羔。三批试验的受体妊娠率和胚胎成活率分别如下:0%(0/8)、0%(0/18)、11.1%(1/9)、6.2%(1/16)和50%(3/6)、33.3%(5/15)。 相似文献
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为了研究山羊胚胎冷冻贮藏的快速方法,以二甲亚砜(DMSO)和甘油作为防冻剂采用两步法将80个16-细胞胚进行冷冻。在液氮中贮存30天,并以50℃/分进行融解。将在 DMSO中冷冻的41个胚胎和在甘油中冷冻的20个胚胎 相似文献
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<正> 许多文章都介绍了有关牧草种子长期贮存以后的发芽情况,但是只有少数有关长期亚冷冻贮存对发芽影响的研究报导。近几年应用亚冷冻温度贮存牧草种子的研究日渐增多。Knowles 把三种禾草种子贮存在21°、1°和-18℃温度下大约8年,发现在-18℃温度下后四年种子生活力丧失不多,或者没有丧失,不过他并未报导开始时的种子活力 相似文献
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牛胚胎两步冷冻 总被引：1，自引：0，他引：1
8枚61/2～71/2日龄黑白花奶牛胚胎,采用两步冷冻和细管包装法进行了冷冻。同时配合使用甘油抗冻剂,即以1℃/分钟的速度由室温降至-5℃;在-5℃下诱发结晶并在投入液氮前以0.3℃/分钟的速度降温至-36℃。胚胎在液氮中贮存4天～7个月后,直接在17℃温水中解冻。除去甘油后,用评定胚胎形态的方法进行胚胎存活的鉴定,6枚形态评为优和良的胚胎,用凯苏式输卵器非手术分别移入6头同期受体母牛。其中2头妊娠,1头妊娠母牛在孕后第四个月流产,另1头于1983年元月26日产1公犊,犊牛初生重为45公斤。试验结果证明,采用两步冷冻法冷冻的牛胚胎移植后可以成活。 相似文献
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本研究应用密闭式呼吸测热器对生长肥育猪分两个体重阶段(前期30—40公斤;后期70—80公斤)进行了10℃、20℃和30℃环境条件下的饥饿代谢试验。得出绝食产热量(FHP)与环境温度(T)的回归方程:前期为FHP(千卡/公斤~(0.75)·天)=165.38-2.41T(r=-0.81,n=15),后期为FHP(千卡公斤~(0.75)天)=142.63-2.14T(r=-0.76,n=15)。在10℃、20℃、和30℃环境中,体蛋白分解量(克/公斤~(0.75)天),前期分别为2.77±0.35、3.45±1.46、3.06±1.14;后期分别为3.02±1.0、2.88±1.04、3.06±1.15。在10℃和20℃环境中,呼吸商为0.76—0.81;但30℃时,呼吸商偏高,其值为0.80—0.98。 相似文献
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将384个 8～16细胞期的兔胚胎分成四个不同的试验组。用PBS+50％兔血清作为保存液,1.5M的DMSO或甘油作冷冻保护剂,以1℃/分的速度从13～17℃降到-40或-78℃投入液氮。用DMSO和甘油作冷冻保护剂,-40℃投入液氮的两组胚胎解冻后,经体外培养发育成胚泡的比率(分别为35.7％和32.8％)较-78℃投入液氮的两组(分别为22.9％和7.0％)为高。将-40℃投入液氮的两组胚胎解冻后,分别移植给5只受体母兔,受体妊娠率在DMSO组为80.0％,甘油组为60.0％;妊娠20天胎儿存活率分别为>44.9％和>34.0％;仔兔出生率分别为2.04％和22.6％。 相似文献
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从以精子耐冻性为指标而选择的公鸡和普通公鸡中采精,按1℃/分和6℃/分的速率将精液冷冻至-70℃然后投液氮保存。解冻后这两种公鸡精子的受精力不同。经过选择的公鸡,其精液以1℃/分的速率降至-70℃,解冻后受精率最高。而以6℃/分的速率冷冻时,两种公鸡精液的受精率没有差异。这一结果表明,可以用精子的耐冻性为指标进行公鸡的选择,而且在冷冻这种公鸡的精液时,冷冻速 相似文献
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精液采出后,经过滤立即镜检评定精液品质。镜检完毕,将原精液用葡萄糖——卵黄液作3∶1稀释,至30℃灭菌自控恒温箱内以1500转/分的速度离心10分钟。除去上清液,将浓缩精子部分,用合甘油的冷冻稀释浓至室溫下作1∶6一次稀释,随即分装入塑料薄膜袋内(7×3),每袋3毫升,放入特制网夹中定型成薄片,置于0°—5℃下平衡1.5—3小时后,在特制的冷冻箱内的干冰中,冷冻10钟即完成。薄膜法与安瓿、颗粒法冷冻效果比较,解冻后平均有效精子活力,分别为∶薄膜法0.4(0.3—0.5),颗粒法0.37(0.3—0.45),安瓿法0.32(0.25—0.4)。经过四年生产试验,输精母马头数在一百匹以上。一个情期平均受胎率为52.3％(46.6—55％),达到了鲜精受胎率水平(P>0.05)。 相似文献
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试验用15%脱脂奶稀释液(450毫渗摩—毫克分子浓度/公斤水),0～16%甘油浓度和1～100℃/分的降温速度共同对公羊精子冷冻-解冻存活率(活率和活力)的影响。结果表明4～6%甘油浓度和10～100℃/分的降温速度时精子存活率最高.用8%甘油浓度和5～30℃/分降温速度也获得了近似的结果。虽然在每一种甘油浓度中公羊精子能耐受好几种降温速度,但是提高甘油浓度会使最佳降温速度下降.甘油浓度超过8%就对精子有毒性了,使精子存活率显著下降。15%与19%脱脂奶稀释液(600毫渗摩),以4～6%甘油浓度和10～100℃/分降温速度冷冻均获得了很高的冷冻存活率。 相似文献
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本研究旨在了解投入液氮前的平衡温度及时间对兔胚冻后存活的影响。经0.5M蔗糖与1.5,2.0或2.5M乙二醇组成的冷冻液处理后的兔胚,在-30℃或-37℃平衡10或20分钟后即投入液氮保存或直接投入液氮保存。胚胎解冻在37℃的水浴进行。当平衡温度由-30℃下降到-37℃时,胚胎的冻后形态正常率及存活率均极显著下降(P<0.01)。在-30℃平衡20分钟与10分钟的冻后存活率无明显差异(P>0.05),但直接投入液氮时,冻后存活率则很低(8.3％)。由此表明:兔胚冻前在-30℃平衡10—20分钟是必要的。 相似文献
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本研究中使用了4头荷斯坦公牛的32次射精。所得精液用20％卵黄—柠檬酸盐稀释(1:10),在0.5小时和3小时内冷却至5℃,再加入甘油,平衡2小时。然后将细管置于氮液面上冷冻,在-196℃液氮中贮存。将冻精分别在46、37和23℃解冻12、20和60秒。用聚乙烯做伪阴道 相似文献