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相似文献
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1.
对2007~2017年从我国主要养殖区临床病料中分离的86株禽腺病毒(FAd V)血清型鉴定结果表明,我国流行的主要血清型为FAd V-11、FAd V-4、FAd V-8b和FAd V-8a,常与鸡传染性贫血病病毒混合感染。蛋鸡流行的FAd V血清型主要为FAd V-4(88.9%),肉鸡主要为FAd V-11(47.6%),而危害最大的是FAd V-4引起的心包积水-肝炎综合征。在鸡LMH细胞上进行的交叉中和试验结果表明,FAd V-4的高免阳性血清可中和其自身和FAd V-11,但不能中和FAd V-8a、FAd V-8b。提示,有必要研制FAd V-4、FAd V-8a和FAd V-8b三价灭活疫苗和FAd V亚单位通用疫苗。  相似文献   

2.
为建立一种快速检测鸡群中禽腺病毒4型(FAd V-4)的血清学方法,本研究利用纯化的FAd V-4中国流行株作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测FAd V-4血清抗体的间接ELISA方法。FAd V-4抗原与抗新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒阳性血清均无交叉反应,表明该方法具有较好的特异性;批内和批间重复试验的最大变异系数分别为3.735%和4.373%,显示该方法具有较好的稳定性;利用所建立的ELISA方法对40份来自疑似FAd V-4感染病鸡的血清样品进行检测,检测结果与FAd V-4 PCR检测结果符合率为100%。对我国河南、山东、安徽、山西和江苏等不同地区的676份鸡血清样品进行了FAd V-4流行病学调查,结果显示上述省份均存在不同程度的FAd V-4感染,抗体阳性率在69.3%~89.1%。表明该方法为FAd V-4流行病学调查和防控提供了一种快速有效的检测方法。  相似文献   

3.
用LMH细胞扩繁I群禽腺病毒血清4型(FAd V-4)并通过口服途径感染24周龄SPF公鸡,心脏无菌采血制备鸡抗FAdV-4血清。通过ELISA、AGP、IFA和HI等方法检测血清,结果未见其他禽类常见病毒抗体。该血清用于间接免疫荧光检测FAd V-4,染色效果较好,测定FAID_(50)敏感性高。试验结果表明,该批血清2000倍稀释可以作为一抗用于FAd V-4毒价检测。  相似文献   

4.
禽腺病毒(fowl adenovirus,FAd V)2015年开始在我国鸡群中大规模流行,目前在鸭群中的检出也日益频繁。为了解山东省鸭群中FAd V流行及遗传变异情况,2019—2020年从山东省中西部8个地区21个鸭场,收集病死鸭组织样品237份,通过PCR进行病原学检测,并将阳性病料接种鸡肝癌细胞进行病毒分离,扩增其六邻体(Hexon)基因进行遗传进化和氨基酸位点突变分析;利用蚀斑试验和高通量测序纯化鸭源FAd V(命名为CHSD-2)并分析其全基因组序列。结果显示:237份样品中,有68份检测为FAd V阳性,阳性检出率为28.69%;冬、夏季节FAd V阳性检出率较高。共分离到16株鸭源FAd V,全部为血清4型(FAd V-4);所有分离毒株与鸡源FAd V-4亲缘关系最近,与参考毒株的Hexon蛋白氨基酸同源性为99.1%~99.9%,仅有个别氨基酸发生突变,分离毒株间的Hexon氨基酸同源性为98.6%~100%;纯化后分离毒株CHSD-2基因组全长43724bp,与鸡源FAd V-4参考毒株全基因组核苷酸同源性为100%。结果表明,FAd V在山东省中西部地区鸭群中分布较为广泛,与鸡群中流行的毒株相同,未发生大的变异,因此使用疫苗免疫依然是防控该病的有效措施。  相似文献   

5.
为了阐明Ⅰ群禽腺病毒在我国部分地区鸡群的感染状况,对2015年10月~2016年10月采集自山东、河北等鸡场疑似禽腺病毒感染病鸡的肝脏样品,通过病毒分离、PCR、动物回归试验等进行分离鉴定,最终鉴定出11株血清4型禽腺病毒。根据Gen Bank上发表的Ⅰ群禽腺病毒(FAd VⅠ)Hexon基因序列设计引物,对分离的11个毒株测序,并与其他血清型参考毒株进行比较分析。结果表明:分离的11株FAd V同源性高达99.7%以上,与FAd V-4参考毒株的核苷酸序列的同源性在98.3%~99.7%之间,与FAd V-10血清型序列同源性较近,为97.2%,而与FAd V-5、FAd V-8血清型同源性较低,仅在66.4%~87.2%之间。研究结果为FAd V的防控和新疫苗研发提供了可靠的理论依据。  相似文献   

6.
《中国兽医学报》2019,(9):1697-1702
利用NDV LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,将禽腺病毒4型(FAdV-4)中国流行株的全长Fiber2基因插入到NDV基因组的P和M基因之间,构建并拯救出重组病毒rLaSota-Fiber2。利用RT-PCR和序列测定,以及Western blot对重组病毒进行了鉴定。结果显示,Fiber2基因插入位置和方向正确,Fiber2蛋白得到正确表达,表达形式为可溶的游离形式而非嵌入到NDV颗粒中。第10代重组病毒的鸡胚致病性试验和在鸡胚中的生长特性研究结果显示,重组病毒的半数鸡胚感染量(EID_(50))最高可达10~(8.5)/100μL,鸡胚平均致死时间(MDT)为120 h, 1日龄雏鸡脑内接种指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)均为0,重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株的低致病特性和对鸡胚良好的高滴度生长适应性。重组病毒与亲本LaSota株生长滴度在相近时间达到峰值,生长动力学特性与亲本株无明显差异。本试验构建的表达FAdV-4中国流行株Fiber2基因的重组病毒rLaSota-Fiber2有望为同时防控NDV和FAdV-4的感染提供安全、廉价和高效的辅助工具。  相似文献   

7.
通过监测鸡群中禽腺病毒的感染情况,为临床养殖提供信息资料。采集河北某鸡场表观健康鸡群泄殖腔拭子45份,在病毒分离的基础上,通过分离株序列比对与遗传进化分析血清型。结果共分离到6株禽腺病毒,其中RPVA0923株和RPVA0924株核苷酸序列与FAd V-8b相似性大于98.68%,与FAd V-8b型K08株、764株有较近的亲缘关系;RPVA0925、RPVA0926、R PVA0927、R PVA09282株核苷酸序列与FAd V-8a型禽腺病毒相似性大于98.81%,与FAd V-8b型TR59株亲缘性最近。本研究分离到4株FAd V-8a和2株FAd V-8b。结果表明临床表现健康鸡群存在携带多血清型禽腺病毒,养殖企业需重视这种现象。  相似文献   

8.
为探索Ⅰ群4型禽腺病毒DC株在LMH细胞的生长特性和增殖规律,通过研究病毒接种量、收毒时间、接毒时间、温度和维持液血清浓度等病毒增殖条件,筛选、优化了病毒增殖工艺。结果表明病毒最佳的增殖条件为:在37℃条件下培养,最佳接种量为1%,接种时间为细胞传代后生长72 h,维持液血清浓度为2%,维持液中不添加0.25%胰蛋白酶,收获时间为病毒接种后72 h。LMH细胞是Ⅰ群4型禽腺病毒DC株较适合的病毒培养系统,为研制Ⅰ群4型禽腺病毒疫苗提供了有利工具。  相似文献   

9.
利用光学显微镜观察、间接免疫荧光(IFA)、Real-time PCR和病毒感染滴度(TCID50)等测定方法,分别从病毒抗原分布、病毒基因组复制水平以及病毒感染滴度变化等方面对猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV-67N)在猪肾上皮传代细胞系(PK-15细胞)上的增殖特性进行了研究。使用HEV-67N株感染24孔细胞培养板内的PK-15细胞,接种剂量为400个TCID50(104.37)/孔,间接免疫荧光检测结果显示,在感染后8h即可检测到被荧光抗体标记的感染细胞,且随着感染时间的延长,出现荧光的细胞数量逐渐增多,至感染后32h,几乎所有的细胞均出现有荧光。Real-time PCR检测结果显示,病毒基因组RNA的复制在感染后32~48h呈快速上升趋势,其基因组拷贝数在感染后48h达到最高值,之后增殖速度减慢,至感染后56h细胞出现CPE。TCID50的测定结果显示,HEV感染滴度的变化趋势与基因组RNA含量的变化相一致,在感染后32~48h增殖速度最快,之后逐渐减缓,至72h病毒感染滴度达到最高。  相似文献   

10.
分别采用SPF鸡胚、293a细胞、鸡胚原代肝细胞、鸡肝癌细胞(LMH)增殖禽腺病毒,采用PCR鉴定,并测定病毒EID_(50)、TCID_(50)。结果显示:LMH细胞能稳定传代,可以出现明显病变,并且病毒滴度有明显提高。推荐采用鸡肝癌细胞来增殖禽腺病毒。  相似文献   

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