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1.
组织蛋白酶对成年绵羊卵母细胞体外发育能力的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律,探明卵丘细胞中组织蛋白酶( CTSS、CTSB) mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性.采用Real-time PCR方法检测绵羊在体外成熟0、8、16和24 h的卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSB、CTSS)的mRNA表达水平,以及在成熟液中添加组织蛋白酶抑制剂(E-64)后卵丘细胞中CTSB和CTSS的mRNA表达量在体外成熟前及体外成熟后的表达水平,并测定在成熟液中添加1、5、10 μmol·L-1 E-64对卵母细胞成熟率、受精率及囊胚发育率的影响.结果,卵丘细胞中的CTSS和CTSB mRNA表达均随着体外成熟时间的增加(IVM 0 h、IVM 8 h和IVM 16 h)呈下降的趋势(P＜0.01).添加5和10 μmol· L-1 E-64组的卵丘细胞中CTSS和CTSB mRNA表达水平较对照组和1 μmol· L-1组均显著性降低(P＜0.01),而5和10μmol·L-1组间的CTSS和CTSB mRNA表达水平无显著差异(P＞0.05).成熟液中添加5和10 μmol·L-1的E-64组的囊胚发育率(26.82％和30.95％)显著高于1 μmol· L-1组和对照组(18.23％和15.63％,P＜0.05),但5和10 μmol·L-1组对卵母细胞的成熟率及卵裂率与1 μmol· L-1组和对照组间无显著性差异(P＞0.05).结果表明,绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势,其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关;组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平,并提高卵母细胞随后的体外发育能力. 相似文献
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在家蚕品种C1(H)中发现了一种新的卵色突变体。该突变体卵色为淡红色,成虫复眼为红色,遗传分析表明该突变性状由1个隐性基因控制,可能与红卵突变基因re互为等位基因,命名为淡红卵突变体(pale red egg,re~p-1)。红卵突变体(re)被认为是MFS(major facilitator superfamily)基因的序列发生了改变,故对re~p-1突变体MFS基因的结构及表达进行分析。与C1(H)卵色正常型品系的MFS基因比较,re~p-1突变体的MFS基因在第6外显子中的一段长59 bp片段被长14 bp的片段所替换,但编码蛋白质的跨膜结构未发生根本改变,而re突变体中MFS基因的结构变化对表达产物的功能有显著影响。此外,利用qRT-PCR检测MFS基因在C1(H)的卵色正常型品系、re~p-1突变体和re突变体3个家蚕品系5龄幼虫各个组织中均有表达,但表达水平存在差异:相较于C1(H)卵色正常型品系和re~p-1突变体,re突变体所有组织中MFS基因的表达量普遍偏低;相较于C1(H)卵色正常型品系,re~p-1突变体的后部丝腺和精巢中MFS基因具有较高的表达量,在其他组织中的表达量无明显差异。上述结果将有助于对re~p-1突变基因定位分析和卵色突变形成机制的研究。 相似文献
3.
冷藏期家蚕滞育卵和即时浸酸卵的H2O2含量及过氧化氢酶基因表达的变化 总被引：4，自引：3，他引：1
将产下后48h的家蚕滞育卵和即时浸酸卵进行低温(5℃)冷藏处理30d以上,滞育卵孵化率显著上升,而即时浸酸卵孵化率显著下降。为了探讨低温处理对滞育卵和即时浸酸卵的孵化产生不同影响的分子机制,测定了冷藏期间2种卵中的H2O2含量、过氧化氢酶(CAT)基因mRNA转录水平和CAT活性变化。结果表明:2种卵在冷藏期间随着卵中的H2O2含量显著增加,CAT基因mRNA转录水平也上调;虽然冷藏后的10～70d,2种卵中的H2O2含量、CAT基因mRNA转录水平及CAT活性都显著上升,但滞育卵的H2O2含量仍显著高于即时浸酸卵,而CAT基因mRNA转录水平和CAT活性则显著低于即时浸酸卵。即时浸酸卵在冷藏过程中H2O2含量显著增加,可能造成了对胚胎的氧化伤害,从而降低其孵化率。然而,滞育卵在冷藏过程中的CAT基因mRNA转录水平及CAT活性相对较低,H2O2相对较高,胚胎却未受到氧化伤害,推测低温处理可能诱导了滞育卵中其它抗氧化反应。 相似文献
4.
卵泡FSH受体mRNA的表达及其对卵母细胞体外培养成熟率的影响 总被引：1，自引：3，他引：1
本研究采用RT-PCR技术检测了猪大、中、小卵泡颗粒细胞中FSH受体(FSHR)mRNA的表达差异,比较和分析了受体表达差异及其对卵母细胞体外成熟培养的影响。结果表明大、中、小卵泡中颗粒细胞都有FSHR mRNA表达,大卵泡的颗粒细胞与小、中卵泡的颗粒细胞FSHR mRNA相对表达量有显著差异(P<0.05),中、小卵泡的颗粒细胞FSHR mRNA相对表达量之间无显著差异(P>0.05)。不同大小卵泡卵母细胞体外成熟培养结果表明,小卵泡与大、中卵泡比较,卵丘细胞扩展率和第一极体排出率差异显著(P<0.05)。这表明猪不同大小卵泡颗粒细胞FSHR mRNA的表达量与其卵母细胞体外培养成熟率呈相关性,进一步证实FSHR在猪卵泡及卵母细胞发育中起着重要作用。 相似文献
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为了初步了解组织型纤溶酶原激活剂(tissue-plasminogen activator,tPA)在牛卵丘－卵母复合体体外成熟进程中的潜在作用,试验运用实时定量RT-PCR技术分别检测体外成熟过程中不同时间段(0、8、16、24 h)以及添加不同浓度FSH成熟培养16 h后的牛卵丘细胞和卵母细胞中tPA基因相对表达变化,观察添加不同浓度FSH成熟培养16 h后卵丘细胞膨胀程度差异,并统计卵母细胞第一极体排出情况。结果显示,卵丘－卵母复合体在体外成熟初期,tPA mRNA相对表达水平在体外成熟16和24 h的卵丘细胞和卵母细胞中显著高于0和8 h组;在添加不同浓度FSH (0、0.01、0.1和1 IU/mL)体外成熟16 h的各处理组,卵丘细胞中tPA mRNA相对表达量随FSH添加浓度的升高而升高,卵丘细胞的扩散程度亦随之增加;同时tPA mRNA相对表达量在0.01 IU/mL FSH添加组卵母细胞中显著高于其他各FSH添加组。综合以上研究结果,本研究认为,牛卵丘细胞中tPA基因的表达受FSH正向调节;tPA可能促进了卵丘细胞在体外成熟过程中的扩散;同时,tPA在卵母细胞中的表达是否与其第一极体排出有关,需进一步试验验证。 相似文献
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本研究旨在筛选出决定或影响公牛睾丸周长(SC)的基因片段,并研究其功能和表达特征,为今后种公牛的选育提供理论基础。用mRNA差异显示技术从睾丸周长极显著差异(P0.01)的睾丸组织中筛选差异表达的基因片段,并用反Northern杂交及荧光定量的方法鉴定筛选的结果,研究筛选出基因的组织表达谱。结果,筛选出1条差异表达片段A71,经测序和BLAST分析发现该片段与牛Septin10基因高度同源(99%),且该基因在肝脏等9个组织中都有表达,在2组睾丸组织中相对表达量差异显著(P0.05)。分析结果表明,Septin10基因是牛睾丸差异表达基因,可作为一个研究牛繁殖性状的候选基因。 相似文献
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山羊GDF9基因在卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究采用实时荧光定量PCR技术,从mRNA水平探讨了山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟(IVM)过程中(0、6、12、18、24和27h)GDF9基因的相对表达变化,分析其与卵丘细胞扩散之间的关系。结果表明,GDF9 mRNA在山羊卵丘卵母细胞复合体体外成熟过程中均有表达,且在成熟培养初期表达量较低,其表达峰值出现在IVM12h,与卵丘细胞开始扩散的时间一致,之后又有所下降。由此推测,GDF9基因在山羊卵丘扩散和卵母细胞体外成熟过程中起着重要的作用。 相似文献
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滞育激素(DH)是导致家蚕滞育生理现象出现的关键因素。研究卵期不同温度和光照节律引起家蚕滞育激素基因Dh表达的变化,探讨温度和光照对家蚕滞育调控的机制。催青期25℃持续光照(25LL)条件下,蚕卵中Dh基因mRNA高水平稳定转录;而在15℃持续黑暗(15DD)条件下,蚕卵中只有痕迹量Dh基因mRNA存在;25LL或者20℃、光照与黑暗12h交替(20LD)条件下,胚胎发育至单眼着色后(有效积温2160℃.h以后)Dh基因mRNA转录水平显著上调,与此时期胚胎对诱导滞育的温度和光照节律更加敏感一致。从催青期开始整个世代的保护温度和光照节律,呈现高温25℃显著上调整个胚后时期Dh基因mRNA转录水平,光照上调蛹期与蛾期Dh基因mRNA转录水平,且高温的作用强于光照。5龄第3天幼虫的基因芯片表达谱显示,Dh基因mRNA转录水平存在显著的性别与组织差异,雌蚕多个组织中的Dh基因mRNA转录水平都显著低于雄蚕,卵巢中的Dh基因mRNA只有痕迹量。亲代卵的催青温度与光照节律决定子代卵的滞育性,也影响到Dh基因mRNA的转录水平;但子代卵内Dh基因mRNA转录水平高低不是蚕卵滞育与否的关键。推测家蚕Dh基因表达的性别差异及在早期蚕卵中表达特征与滞育性不一致的现象,可能与Dh基因的前体多肽翻译产物剪切有关。 相似文献
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以转基因处理的家蝇卵为对象，采用银染差异显示技术（DDPCR）．对携带绿色荧光蛋白（GFP）和抗菌肽（ABP）融合基因的真核表达质粒以电转移的方式进入家蝇受精卵后，卵内基因的表达情况做了初步研究。结果表明，转基因处理的蝇卵与未经转基因处理的蝇卵在分化开始之前基因的表达存在差异；以T11MA为锚定引物，在转基因处理组发现6条差异表达的片段，成功地克隆得到其中3夸。序列分析证实其中2条为新基因片段，另1条为家蝇细胞色素C的编码片段；斑点杂交证实了新基因片段仅在转基因处理组得到表达，而细胞色素C在2组中都有表达。获得的新基因片段登录于GenBank，登录号分别为AY030235和AY030236。本试验结果为解释外源基因在宿主细胞内的去向．发现宿主内部对目的基因整合和分解的相关因素提供了可能，并为系统地开展发育相关研究打下了基础。 相似文献
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为了阐明绵羊卵泡颗粒细胞功能调控机制，试验选取不同条件培养的绵羊卵泡壁层颗粒细胞(MGCs)和卵丘颗粒细胞(CCs),分别设置对照组、FSH组和GDF9+FSH组，利用qPCR、Western blot和免疫荧光法分别检测MGCs和CCs中NPPC和NPR2的mRNA和蛋白表达量。结果表明：对于壁层颗粒细胞，FSH组NPPC 12 h mRNA及12,24 h蛋白水平显著高于对照组(P<0.05),极显著低于GDF9+FSH组(P<0.01);体外培养16 h后，与对照组相比，FSH组NPR2 mRNA及蛋白表达水平显著提高(P<0.05),但与GDF9+FSH组差异不显著(P>0.05)。对于卵丘颗粒细胞，FSH组NPPC mRNA及蛋白水平极显著高于对照组和GDF9+FSH组(P<0.01);FSH组NPR2 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组和GDF9+FSH组(P<0.05)。说明FSH可以显著提高体外培养的绵羊卵泡颗粒细胞中NPPC、NPR2的表达；GDF9可以促进FSH诱导的壁层颗粒细胞中NPPC的表达，但抑制了FSH诱导的卵丘细胞颗粒... 相似文献
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为了调查种蛋中禽骨髓细胞瘤病毒的母源抗体 ,从北京、山东、内蒙古地区共 4个种鸡场购买种蛋抽取蛋清共 55份 ,其中肉鸡种蛋清3 8份 ,蛋鸡种蛋清 1 7份 ,在 AL V-Jgp85抗原包被的 96孔板中进行微量滴定 ,两个肉鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 .3 3 % (1 /3 0 ) ,2 5% (2 / 8) ,两个蛋鸡场种蛋中 AL V-J母源抗体阳性率分别为 3 3 .3 % (3 / 9) ,3 7.5% (3 / 8)。 相似文献
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The transfer of maternal antibodies to offspring can effectively protect against avian influenza virus (AIV) infection during early life in chickens and can prevent AIV spread by decreasing the overall percentage of the avian population susceptible to this pathogen. Herein, we evaluated maternal antibody transfer dynamics in whooper swans (Cygnus cygnus), which represent an important AIV host species. In total, 57 eggs from 19 nests were collected to study the relationship between egg yolk AIV-specific antibody concentrations and factors including egg size, laying order, maternal serum AIV antibody titer, and maternal body condition. Overall, we found that AIV-specific antibodies were present in the serum of 63.2 % of surveyed female swans and were transferred to 50.8 % of analyzed eggs. We found maternal AIV-specific antibody concentration and body weight to be positively correlated with egg yolk AIV antibody concentration, whereas egg laying order was negatively correlated with yolk antibody titer. Overall, these findings maternal transfer of AIV-specific antibodies may function as a key mechanism governing the dynamics of AIV infection in swan populations. 相似文献
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Recently, we reported a method for discriminating a Japanese brand of chicken, the Hinai-jidori. As an application of this method for discriminating Hinai-jidori eggs, we here report an efficient method for extracting maternal DNA from eggshells. Eggshell powder was completely decalcified with EDTA solution, and then DNA was isolated by conventional phenol-chloroform extraction and ethanol precipitation. The efficiency of DNA recovery from eggshells was 50-fold higher than that of a previously reported method. The recovered DNA could be used for PCR, and 10 markers for identifying the Hinai-jidori chicken were detected. The genotypes of the Hinai-jidori exactly matched those of the Hinai-dori breed. Using this method, Hinai-jidori and Hinai-dori eggs could be distinguished from the eggs of Rhode Island Reds. This is the first report of a technique that can be used to discriminate the eggs of Hinai-jidori from those of other chickens, and it can also be utilized to validate the labeling of Hinai-jidori eggs in the market. 相似文献
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The effects of incubation temperature on virus growth and mortality patterns were studied in antibody-free chicken eggs inoculated with the B1 strain of Newcastle disease virus. Embryo mortality patterns did not differ much between 37, 39, and 41 C of incubation, although virus growth curves were higher at 39 C and 41 C than at 37 C. Below 35 C, embryo mortality was delayed, although from 48 hours after incubation the virus growth curves were similar to those at 37 C. In eggs with and without maternal antibody, virus titers were maximum 48 hours after incubation, although slightly higher in antibody-free eggs than in eggs with antibody whether the eggs were alive or dead. Eggs with maternal antibody had delayed mortality patterns. 相似文献
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Gabriël S Geldhof P Phiri IK Cornillie P Goddeeris BM Vercruysse J 《Veterinary immunology and immunopathology》2005,104(3-4):265-272
Although the epitheliochorial placenta of ruminants does not allow passage of immunoglobulins from dam to foetus specific antibodies have been detected at birth in calves born to Schistosoma mattheei-infected cows. The present study determined the prevalence of calves born with specific antibodies for S. mattheei and the origin of these antibodies. For the determination of the prevalence, 100 calves born to infected mothers in an endemic area (Zambia) were examined, 24 were seropositive. To study the origin of these antibodies placentomes of 40 naturally S. mattheei-infected cows were examined for the presence of schistosome eggs and lesions which could explain foetal priming and/or leakage of maternal antibodies and/or antigen into the foetus. Tissue damage and schistosome eggs were observed on the maternal as well as the foetal side of the placentomes. In order to determine the specific nature of the antibody response, antibody profiles against soluble adult worm antigen preparation (SWAP) of S. mattheei were compared by Western blot between dams and their newborn calves (n = 8). The specific recognition profiles were identical for the seropositive calves and their dams on SWAP mattheei. Identical recognition profiles between dams and calves were also observed when sera were analysed on Escherichia coli, a pathogen of which the foetus should be free, and would indicate passive antibody transfer from the dam. In conclusion, the present study shows that S. mattheei could induce placentome lesions and that eggs can cross the placenta. Consequently, foeti can come into contact with S. mattheei antigens in utero, and might also contain maternal antibodies from leakage through placentome lesions. As such, the infection status of the mother could have far reaching effects on the immunological status of her offspring and modify their reaction upon infection. 相似文献
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黑丝羽乌骨鸡的选育进展与冠型效应 总被引：2，自引：0，他引：2
通过对黑丝羽乌骨鸡的复冠父系和单冠母系进行家系选育五个世代，在体重、孵化性能、开产性状及产蛋量方面得到了明显进展，而且可见单冠在这些性状上的正向效应。尤其是产蛋性能上的选育进展非常明显，高峰4个月的总产蛋量增加了1．2倍，母系300d产蛋量达到102枚左右，母系500d产蛋量达到201枚。 相似文献
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为了证明我国马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）驴白细胞弱毒株的长末端重复序列（ＬＴＲ）是否能够启动基因的表达,我们将该ＬＴＲ克隆于含ＣＡＴ基因的载体中,获得重组质粒ｐＣＡＴ－ＬＴＲ,用ｐＣＡＴ－ＬＴＲ分别转染驴胎皮肤细胞（ＦＤＤ）、胶质母细胞瘤（ＴＪ－９０５）细胞、驴白细胞及接种ＥＩＡＶ弱毒的ＦＤＤ及驴白细胞,结果以ＥＩＡＶ弱毒的ＬＴＲ为启动子,ＣＡＴ在这几种细胞中均获得了不同程度的表达,证实了我国ＥＩＡＶ弱毒株的ＬＴＲ在ＦＤＤ、ＴＪ－９０５及驴白细胞中确实具有一定的启动子功能,并能被反式激活表达,为进一步研究ＥＩＡＶ弱毒复制及表达调控奠定了基础。 相似文献
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【目的】 试验旨在研究鸭产生螺纹蛋程度的遗传力及其与蛋品质相关性状的遗传相关性。【方法】 选择A系母鸭600只，收集产蛋期所产种蛋，并根据螺纹在鸭蛋表面的覆盖面积，将螺纹等级划分为0、1、2、3、4级。观察测定产生螺纹蛋的等级和其他蛋品质相关性状，使用限制性最大似然估计法并结合线性混合模型进行遗传力及相关性状遗传参数估计。【结果】 试验期间，600只母鸭中有418只母鸭产蛋，共收集到1 171枚种蛋，其中，0、1、2、3和4级螺纹蛋分别有742、135、161、93和40枚，分别占总数的63%、12%、14%、8%和3%；产生0、1、2、3和4级螺纹蛋母鸭分别为228、55、69、46和20只；螺纹蛋等级、平均蛋重、平均蛋型指数和开产体重的遗传力分别为0.30、0.29、0.52和0.72，属于较高遗传力，产蛋总数的遗传力为0.15，为中等遗传力。螺纹蛋等级与产蛋总数具有较高的遗传正相关（0.34）和较低的表型正相关（0.12）。【结论】 螺纹蛋等级、平均蛋重、平均蛋型指数和开产体重均具有较高的遗传力，对某些产生螺纹蛋等级较高的母鸭进行选择淘汰，可以降低鸭产生螺纹蛋的比例。本研究对鸭产生螺纹蛋的等级进行划分，可以精确的区分螺纹蛋之间的差别，为后续的相关研究提供分类标准，为产蛋性能的遗传改良提供依据和参考。 相似文献