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ＨＦ酶制剂中蛋白酶活力的测定山东济宁市化工研究所赵德英，张景宏生物体内的大部分化学反应都是在酶的催化下进行的。要检查酶的存在及其含量，不能像检查化学药品那样直接用重量或体积来表示，而只能用它催化某一特定反应的能力即酶的活力来表示。因此，测定酶活力是研... 相似文献
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以牛副性腺部分纯化的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶为材料,以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明:牛副性腺NAGase的最适pH为5.5,在pH3.0～7.6区域内活力较稳定,而在pH7.6能很快失活;最适温度为55℃。在50℃以下处理30min,酶活力保持稳定,高于50℃酶稳定性较差。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.48mmol/L,最大反应速度Vm为19.73umol/(L·min)。酶催化pNP-NAG水解反应的活化能为69.77kJ/mol。 相似文献
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以番鸭睾丸为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、DEAE-32离子交换柱层析和Sephadex G-100分子筛柱层析纯化,获得比活力为19.18 U/mg、纯化倍数为6.46倍的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶制剂。以对-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明：酶的最适pH为5.6,该酶在pH3.0～7.6区域较稳定,而在pH〉7.6能很快失活;酶的最适温度为55℃。当温度为80℃时,酶完全失活。在40℃以下处理30 min,酶活力保持稳定,高于45℃,酶稳定性较差。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.215 mmol/L,最大反应速度Vm为5.54μmol/L.min。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为69.05kJ/mol。金属离子对酶的效应试验表明：高浓度的Na＋和K＋对酶有抑制作用;Mg^2＋对酶有轻度激活作用,Cu^2＋、Pb^2＋、Zn^2＋、Ca^2＋、Ba^2＋对酶活力有不同程度的抑制作用;Al3＋对酶有抑制作用。 相似文献
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饲用复合酶制剂的主要酶种包括纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。利用高产菌株S6-5、Y7-6和B5-12混合发酵生产复合酶制剂,发现纤维素酶催化反应最适宜的酸碱度在pH=5.0,反应体系温度为60℃时,纤维素酶活力达到14293U/g;蛋白酶酶活在pH=6.0时酶催化能力最强;而脂肪酶和淀粉酶在50℃时催化能力最强,在60℃催化能力下降,但不明显。 相似文献
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通过比较,研究了粗状假丝酵母诱变株产脂肪酶催化水解不同底物的相对活力,包括低级酯、脂肪酸甘油酯和天然油脂。并对粗状假丝酵母产脂肪酶催化水解猪油反应中的pH值、温度、时间、加酶量、乳化剂用量和Ca2+浓度等因素进行了研究,得出pH值为7.5、温度为45℃、水解反应时间为72h、加8ml粗酶液、2%油的乳化剂、Ca2+浓度为75mmol/l时,猪油有最佳水解率。通过对该酶反应动力学进行研究得出其水解反应的米氏常数Km为12.25×10-3mol/l和最大反应速率Vmax为11.14μmol/min。 相似文献
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试验对以莆田黑猪精液为材料分离纯化得到的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)进行了理化特性研究。经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G100分子筛层析获得PAGE电泳纯化的NAGase酶制剂。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-GlcNAc)为底物,研究酶催化水解的相关性质。分离纯化获得的酶制剂比活力为1561.42 U/mg,分子质量为58 ku,只有1个亚基,等电点pI为9.13。酶的最适pH为5.6,最适温度为45 ℃,酶在pH 3.6～7.8之间稳定,当pH>8时迅速失活,在50 ℃以下处理30 min酶活力保存稳定,高于50 ℃时,酶活力迅速降低。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,米氏常数Km为0.82 mmol/L,最大反应速度Vm为39.23 μmol/(L·min)。催化pNP-GlcNAc反应的活化能为27.30 kJ/mol。金属离子中Na+、K+、Mg2+、Ca2+对酶活力无明显影响,Zn2+、Cu2+、Pb2+对酶有抑制作用。 相似文献
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饲用酶是高效绿色环保的饲料添加剂,可提高饲料转化率。研究选取植酸酶和木聚糖酶,按照现行国家标准中有效的饲用酶活力检测的方法,在其他条件不变的情况下,研究等比例缩小反应体系是否会对标准曲线绘制质量和饲用酶活力测定结果的重复性和准确性产生影响。结果表明,与国家标准体系测定结果相比,当国家标准体系缩小至1/2和1/4时对2种酶制剂标准曲线绘制质量、酶活力测定结果的重复性和准确性均无影响。饲用酶活力测定时,在不影响酶活力测定结果准确性的情况下,适当缩小反应体系可节约成本并减少污染物排放。研究为适当缩小反应体系制定饲用酶相关标准和第三方检测机构制定内部作业指导书提供参考。 相似文献
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现在酶制剂已广泛应用于各种畜禽及水产饲料中 ,但目前市场上酶制剂生产厂家及种类繁多 ,标准不一 ,产品良莠不齐 ,给使用者带来了诸多不便。怎样比较不同厂家的酶制剂、怎样选择优良适用的酶制剂 ,成为困惑选购者的问题。本文就影响酶活力的因素、如何评价酶制剂的质量等问题进行讨论 ,供选用者参考。1 酶的特点1 1 高效催化性 以发生反应的分子数表示 ,酶催化反应速度比非催化反应高 1 0 8～ 1 0 2 0 倍 ;比化学催化剂的催化速度高 1 0 7～ 1 0 1 3倍。酶的高效催化性决定了酶能在动物体内新陈代谢中发挥强有力的催化作用 ,如果没有酶… 相似文献
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为研究筛选自高寒草地5株真菌合成不同功能酶系间的互作效应,采用单个菌株发酵粗酶液直接混合和菌株组合发酵的2种方式,分别测定了反应体系中不同功能酶活力的变化情况。结果表明:菌株310b与4个菌株23a,26B,24d及H发酵粗酶液直接混合的情况下,反应体系中漆酶、羧甲基纤维素酶、木聚糖酶的酶活力下降, 且差异显著(P<0.05);而菌株310b与4个菌株组合发酵的情况下,反应体系中漆酶的酶活力下降,且差异显著(P<0.05),在与菌株23a和H的组合中,反应体系羧甲基纤维素酶和木聚糖酶的酶活力下降,且差异显著(P<0.05),与菌株26B和24d 的组合中,反应体系中羧甲基纤维素酶和木聚糖酶的酶活力没有变化。 相似文献