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相似文献
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1.
通过预培养时间、菌液稀释倍数、浸染时间、共培养时间、抗生素质量浓度5因素4水平的正交实验,得出优化组合,认为组培苗叶片外植体预培养5 d,菌液稀释45倍,浸染4 min,共培养3 d,然后转入含500 mg/L羧苄青霉素的1/2M S培养基上培养,金银花的发根诱导率最高,达54.3%.随机抽取离体培养的发根经PCR检测,证实为转化发状根.  相似文献   

2.
为建立三叶青毛状根的诱导和液体培养体系,采用发根农杆菌株系C58C1和ATCC15834进行毛状根的诱导,通过无菌三叶青叶片预培养、浸染、共培养、筛选、形态和PCR鉴定等过程获得三叶青毛状根根系,并对三叶青毛状根和两年生块根总黄酮进行比较分析。试验结果表明,发根农杆菌C58C1能从三叶青叶片诱导出毛状根,三叶青毛状根在不添加生长素的1/2MS液体培养基中生长状态良好,其总黄酮含量约是2年生三叶青块根的1/5。  相似文献   

3.
泡桐转TCS基因初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
运用花粉管导入和农杆菌介导两种方法,对泡桐转TCS基因受体表现性状进行研究,结果表明:泡桐花导入TCS基因后导致泡桐坐果率和畸形率升高;农杆菌介导TCS基因于泡桐组培苗的愈伤组织、茎段、茎尖后,致使其死亡率、分化率、分化数、苗高和颜色发生显著变化,极差分析表明,最佳转基因方式是以茎尖为受体,预培养3d,浸染时间15min,共培养条件为半黑暗。  相似文献   

4.
尾赤桉DH201-2遗传转化体系建立的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以建立的尾赤桉(Eucalyptus urophylla × E. camaldulensis)DH201-2无性系高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法研究了根癌农杆菌菌株、农杆菌预培养时间、浸染时间和共培养时间等因素对尾赤桉茎段和叶片外植体遗传转化的影响,探讨了适宜尾赤桉转化的卡那霉素和抑菌抗生素头孢塞污钠的使用浓度.结果表明,较优的转化条件是:采用农杆菌菌株GV3101,以茎段为受体材料,经过预培养6 d,在光密度OD600=0.5的菌液中浸泡30 min,然后转移到共培养培养基中共培养4 d,再转移到含90 mg/L卡那霉素和300 mg/L头孢噻肟钠的筛选培养基上,进行转化植株的再生,同时在共培养培养基和菌液中添加100 μM的乙酰丁香酮能够提高茎段外植体的转化效率.  相似文献   

5.
为优化南林95杨叶片遗传转化体系,以南林95杨叶片为外植体,采用均匀设计U12(12×63),利用组织化学染色定位法,根据GUS基因的瞬时表达量,研究了农杆菌浸染时间、农杆菌菌液OD600值、共培养时间、乙酰丁香酮浓度等4个因素对遗传转化的影响。建立相关的线性回归方程,并优化了南林95杨叶片的农杆菌介导遗传转化体系,即农杆菌浸染时间35 min、农杆菌OD600值1.1、共培养时间4 d。  相似文献   

6.
毛状根是产生植物次生代谢产物的重要生物反应器。本文简述了发根农杆菌Ri质粒诱导植物产生毛状根的基本原理与方法及影响因子,对毛状根培养次生代谢物在药用植物上的应用作了概述,并提出其产业化前景、存在的问题。  相似文献   

7.
以南方四季杨叶片作为受体材料,分别设置梯度实验,研究了Kan(卡那霉素)选择压以及遗传转化过程中影响转化效率的5个主要因素(预培养时间、浸染时间、共培养温度、共培养时间和乙酰丁香酮浓度),得出30mgL-1的Kan浓度作为南方四季杨遗传转化过程中的选择压。高效遗传转化体系为:叶片预培养3 d;OD600=0.4的菌液浸染10 min~15 min;浸染前菌液中加入AS(乙酰丁香酮)300 umol·L-1;22℃~25℃条件下暗处共培养3d。  相似文献   

8.
发根农杆菌Ri质粒与诱根有关的rol基因在植物中的表达不仅能导致大量毛根形成 ,而且还表现出一系列能稳定遗传的表型变异 ,在植物遗传改良中有着广阔的应用前景 .2 0世纪 80年代以来 ,国内外学者对发根农杆菌 ,尤其是农杆碱型发根农杆菌Ri质粒及其rol基因进行了广泛深入的研究 .该文重点综述了农杆碱型发根农杆菌Ri质粒的结构与功能、rol基因的位点与特征、Ri质粒的转化及rol基因的表达对植物生长发育的影响及在林木遗传改良上的应用等方面的研究现状 ,并对Ri质粒rol基因在林木遗传改良应用上存在的问题与应用前景进行了分析 .  相似文献   

9.
近年来,已发展出遗传转化高等植物的一些新技术,其中有些技术如脂质体融合,微注射技术和电击导入都是基于动物细胞培养方面的工作,而另一些技术是来自于植物界独特的天然转化系统,其中包括已知能遗传转化高等植物的农杆菌(Agrobacterium)的二个种,即致瘤农杆菌(A.tumefaciens)和发根农杆菌(A.rhizogenes),这二个种都能够将其致病质粒Ti或Ri所携带的DNA序列(T-DNA)插入到双子叶植物细胞核基因组中。pTi诱发寄主产生根基肿瘤,pRi诱发寄主产生毛状根。二者的差别可能是毛状根可以从毛状根培养物获得具有完整的T-DNA序列的有生育能力的再生植株,而从致病农杆菌(A.tumefaciens)菌株所诱发的肿瘤很难获得再生植株。因此,利用发根农杆菌(A.rhizogenes)pRi作为遗传转化高等植物的基因克隆载体的研究和应用日益受到重视。  相似文献   

10.
以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS 0.8 mg.L-16-BA 0.05mg.L-1NAA,生根培养基为1/2MS 0.02 mg.L-1IBA 0.02 mg.L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3~5 min后,共培养2~3 d,然后转化到含Km75 mg.L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg.L-1、100 mg.L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中.  相似文献   

11.
以灰毡毛忍冬优良变异植株为试验研究材料,经过品种比较试验,从中选育出金银花新品种‘花瑶晚熟’。对‘花瑶晚熟’的植物学特性、经济性状、物候期及抗逆性进行研究,结果表明:经多年田间试验观测,‘花瑶晚熟’的花蕾较其他品种晚成熟10d左右,且花期长,适合采摘加工。‘花瑶晚熟’的花蕾整齐、花冠一直不开裂、产量高,定植第五年干花产量达378kg/666.7m^2,是‘普通灰毡毛忍冬’的3.5倍;‘花瑶晚熟’花质优,干花中绿原酸含量高达8.86%,是‘普通灰毡毛忍冬’的1.92倍。在干旱、低温和水淹胁迫下,‘花瑶晚熟’抗旱、抗寒能力最强,‘金翠蕾’次之,‘普通灰毡毛忍冬’最弱;‘金翠蕾’抗涝能力略强于‘花瑶晚熟’,显著强于‘普通灰毡毛忍冬’。  相似文献   

12.
不同培养条件对金铁锁毛状根生长的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用发根农杆菌ATCC15834诱导金铁锁获得毛状根,研究金铁锁毛状根的最优培养条件。结果表明,在5种培养基中,以在1/2MS培养基中皂苷的总产量最大;添加3%蔗糖、水解乳蛋白(LH)及IBA利于毛状根的生长及总皂苷的积累;而添加IAA、NAA、6-BA及蛋白胨抑制其生长。  相似文献   

13.
Leaves of fine Populus tomentosa genotype TC152 were used as explants to establish cell suspension lines. The effects of plant growth regulators on callus induction and establishment of cell suspension lines were studied. The callus induction rate was the highest on a MS solid medium supplemented with 1.0 mg·L-1 2,4-D. A cell suspension line could be obtained by inoculating calli which were not subcultured into a MS liquid medium supplemented with 1.5 mg·L-1 2,4-D. The best subculture medium was MS + 0.8 mg...  相似文献   

14.
Two‐ to three‐week‐old seedlings of Picea abies, Pinus sylvestris and Pinus contorta were inoculated with the supervirulent strain Agrobacterium rhizogenes R1600 2cm above the base of the hypocotyl; other treatments included inoculation with Agrobacterium tumefaciens strain A281 (pTVK291) or mock inoculation. Hairy or highly branched roots formed on 2–3% of seedlings of all 3 species that were infected by R1600 but on none of the other seedlings. Normal adventitious roots were also induced on 5–10% of Agrobacterium‐treated seedlings but none appeared on the other seedlings. Opine assays and growth rates of hairy and normal roots indicated that only roots with the hairy morphology were transformed.  相似文献   

15.
灰毡毛忍冬新品种组培苗生根的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
以灰毡毛忍冬新品种‘金翠蕾’的组培无菌苗为试材,研究了不同生长素、活性炭、培养温度对组培苗生根的影响。研究结果表明,不同生长素、活性炭浓度、培养温度对组培苗生根的影响显著。生根培养的适宜生长素为IBA,适当低温有利于灰毡毛忍冬组培苗生根,组培苗生根培养的适宜温度为20℃。适宜的生根培养基是1/2MS+IBA3.0mg.L-1+活性炭210mg.L-1。  相似文献   

16.
本试验以金银花优良无性系苍源1#为外植体,采用离体快繁技术建立其组培快繁体系,以期能在短期内进行大量扩繁。研究结果表明:茎段是较适合的外植体材料,在MS+BA 0.5 mg/L(单位下同)+IBA 0.5培养基上能较好地诱导生芽,建立无菌系;在MS+BA 0.1~0.5+NAA 0.1~0.3的培养基上能有效增殖,增殖系数可达6.5;生根培养基以MS+IBA2.0为宜,生根率可达93%。  相似文献   

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