Résumé La sécrétion d'arginine vasotocine (AVT) hypophysaire est sensible aux modifications de la pression osmotique observées lors du transfert d'eau douce en eau de mer de téléostéens euryhalins. Les contenus hypophysaires en AVT chez des flets adaptés à l'eau douce sont largement supérieurs à ceux des poissons adaptés à l'eau de mer. Les concentrations plasmatiques en AVT se situent entre 10−12 et 10−11 M. Chez les espèces euryhalines comme l'anguille, le flet et la truite, iln'y a pas de différences marquées dans les concentrations plasmatiques d'AVT en eau douce et en eau de mer. Chez des poissons adaptés à l'eau de mer, les niveaux plasmatiques d'AVT et de sodium sont corrélés ce qui n'est pas le cas chez les poissons adaptés à l'eau douce. Pendant la période initiale d'aclimatation à l'eau de mer, une augmentation transitoire des niveaux plasmatiques d'AVT est observée chez l'anguille, associée à une augmentation de l'angiotensine II plasmatique. Compte tenues des concentrations plasmatiques d'AVT mesurées chez des poissons adaptés à l'eau douce ou à l'eau de mer, il est evident que parmi les effets dose-dépendants de l'AVT sur la production d'urine décrits dans la littérature, seules les réponses antidiurétiques ont vraissemblablement une signification physiologique. En plus de la présence de récepteurs vasculaires pour l'AVT de type V1, le nephron possède aussi des récepteurs de type V2 couplés à l'adénylate cyclase. Dans les branchies, les récepteurs à l'AVT sont aussi présents, mais dans ce tissu, l'occupation des récepteurs conduit à une inhibition de la production d'AMPc contrairement à la stimulation observée dans le tissu rénal. La signification fonctionnelle du récepteur branchial à l'AVT reste à établir.相似文献
Résumé Cet article est une revue des effets osmorégulateurs de l'hormone de croissance et de son mode d'action. Nous présentons des résultats qui suggèrent que le facteur de croissance de type insuline (IGF-I) est un médiateur de certaines des actions de la GH sur l'adaptation à l'eau de mer. Les concentrations plasmatiques et le renouvellement de la GH augmentent après transfert en eau de mer. La GH exogène stimule (in vivo) l'activité Na+,K+-ATPase et le nombre de cellules à chlorure branchialeset inhibe les augmentations de l'osmolarité et des concentrations ioniques du plasma observées après transfert en eau de mer. Une seule classe de récepteurs à haute affinité pour la GH est présent dans le foie, les branchies, l'intestin et le rein. Les niveaux d'ARNm d'IGF dans le foie, les branchies et le rein augmentent après injection de la GH. Après transfert en eau de mer, les ARNm de l'IGF augmentent dans les branchies et dans le rein en suivant l'augmentation de GH plasmatique, bien qu'aucune modification ne soit observée au niveau du foie. L'injection d'IGF augmente la capacité du poisson à maintenir ses niveaux de sodium plasmatique après transfert en eau de mer. Le traitement à la GH augmente la sensibilité à l'adrenocorticotropine (ACTH) et stimule donc les niveaux de cortisol. A la fois le cortisol et l'IGF-I semblent impliqués comme médiateurs des effets de la GH dans l'adaptation à l'eau de mer, bien que les études sur les effets de la GH sur la physiologie de l'osmorégulation chez les espèces non-salmonidés restent encore limitées. Un modèle intégré des actions de la GH sur l'osmorégulation est présenté et les domaines de recherche à développer sont soulignés.相似文献
Résumé L'entrée de calcium au niveau des branchies est sous le controle inhibiteur de la stanniocalcine (STC) qui est synthétisée au niveau des corpuscules de Stannius (CS). L'ablation des CS chez l'anguille d'Amérique du Nord, Anguilla rostrata LeSueur, induit une augmentation rapide des niveaux de calcium dans le sang. Le flux entrant branchial de calcium consécutif à l'ablation des CS (stanniectomie, STX) augmente pendant les 4 premiers jours et reste élevé au-delà (en accord avec des études antérieures). Le potentiel transépithélial (TEP) à travers les branchies ne change pas après STX, ceci indiquant que le gradient électrochimique du Ca2+ est moins favorable pour le flux entrant passif du Ca2+ chez l'anguille STX. En conséquence, le flux entrant de Ca2+ chez l'anguille STX est un flux transcellulaire, avec le Ca2+ traversant la barrière membranaire apicale et basolatérale. La cinétique du transport de Ca2+ conduit par l'ATP à travers les membranes plasmatiques basolatérales de branches d'anguille n'est pas modifiée après STX. Ainsi, l'augmentation du flux entrant de Ca2+ après STX n'est pas corrlée avec des modifications de l'excrétion de Ca2+ conduit par l'ATP à travers la membrane basolatérale, suggérant donc une régulation au niveau de la membrane apicale. De plus, la STC ne modifie pas le transport de Ca2+ conduit par l'ATP dans des membranes basolatérales isolées (in vitro). La STC (0.1 nM) réduit les niveaux d'AMPc dans des cellules dispersées de branchies d'anguille. Cette hormone n'a pas d'effet significatif sur les niveaux d'IP3 dans ces cellules. Nous suggérons que la STC régule la perméabilité au Ca2+ des membranes apicales des cellules branchiales transporteuses de Ca2+ en controlant un second messager agissant sur les canaux calciques de la membrane apicale.相似文献
Résumé La MCH (melanin-concentrating hormone) est un peptide neuroendocrinien impliqué dans la régulation de la pigmentation de la peau chez les Téléostéen. Nous avons isolé et séquencé un ADNC hypothalamique de 543 pairs de bases codant pour la préprohormone de la MCH de tilapia (Oreochromis mossambicus). Ce travail a débuté par des expériences de PCR (Polymerase Chain Reaction) qui ont été réalisées sur des ARNm hypothalamiques avec comme amorces un oligonucléotide synthétique correspondant à une région conservée du peptide MCH de saumon et de mammifère et un oligo dT. Un fragment de 0.2 kb a ainsi été obtenu par PCR et l'analyse de sa séquence nucléotidique montre une similitude faible mais significative avec les extrémités 3′ des ARNms de MCH connus. Ensuite ce fragment a été utilisé pour cribler des banques de cDNA construites dans λZAP à partir d'ARN poly (A+) d'hypothalamus de tilapia. L'ADNc de la préprohormone de MCH de tilapia code pour une proteine de 133 acides aminés dont 17 constituent le peptide signal. Le peptide de la MCH est localisé dans l'extrémité carboxy de la préprohormone et se trouve précédé par une pair de résidus arginine qui servent de site de coupure protéolitique. De plus, 3 résidus basiques consécutifs sont présents à 23–25 acides aminés en amont de la structure de la prohormone. La coupure à ce site permettrait d'obtenir un peptide associé au gène de la MCH (Mgrp) de 22 acides aminés, ce qui est beaucoup plus grand (de 12 à 13 acides aminés) que les Mgrp de saumon ou de mammifères. Une analyse structurale comparée entre la preproMCH de tilapia et la preproMCH de saumon et de mammifères montre que la séquence du peptide MCH est très conservée (100% d'identité avec le saumon et 75% d'identité avec la MCH humaine ou de rat). Par contre, les autres parties de la structure de la preproMCH ont divergé considérablement. L'analyse par “Northern Blot” met en évidence la présence d'ARNm de preproMCH dans l'hypothalamus de tilapia mais pas dans les autres régions du cerveau ni dans plusieurs tissus périphériques.相似文献
Résumé Il a été établi que chez le poisson rouge, les sécrétions de gonadotropine (GtH) et d'hormone de croissance (GH) sont toutes les deux stimulées par la gonadolibérine (GnRH); de plus, la sécrétion de GtH est inhibée par des mécanismes dopaminergiques de type D2. Dans le présent travail, la déplétion de la teneur en protéine kinase C (PKC) dans des cellules hypophysaires de poisson rouge réduit les résponses en GtH et GH au GnRH et à un activateur de la PKC de cellules maintenues en incubation statique. Dans des cellules maintenues en périfusion et soumises à une déplétion en PKC, la GtH libérée en réponse à un analogue du sGnRH est fortement diminuée, cependent les réponses hormonales à la forskoline sont augmentées. La stimulation des récepteurs dopaminergiques D2 réduit, dans le cas d'action d'activateur de la PKC, la réponse en GtH mais pas en GH. Ces résultats indiquent que la PKC est impliquée dans les mécanismes de régulation de GtH et GH par des facteurs neuroendocriniens naturels.相似文献
Résumé Récemment, le domaine de l'endocrinologie s'est considérablement étendu et de nombreux mécanismes de régulation biologique impliquent l'intervention d'hormones et de facteurs apparentés (médiateurs biochimiques) qui se rencontrent dans tous les organismes vivants. L'endocrinologie apporte des outils puissants pour comprendre la régulation de nombreuses fonctions chez les poissons ausens large comme chez les autres animaux. Les modèles variés rencontrés chez les poissons permettent des comparaisons fructueuses avec d'autres groupes de vertébrés et de les replacer dans un contexte evolutif. Les sciences médicales ont bénéficié de recherches conduites chez les poissons et divers concepts développés chez les mammifères et vertebrés supérieurs se sont révélés utiles pour le développement de travaux sur les poissons. L'endocrinologie a largement contribué au développement des connaissances de base sur la biologie des poissons dans des domaines comme la reproduction, l'osmorégulation, la croissance, le stress et l'adaptation ainsi que la pathologie avec des applications à la pisciculture; elle a apporté des outils conceptuels et techniques pour le contr?le de quelques fonctions chez les espèces d'élevage et a efficacement contribué à la domestication de quelques espèces de poisson.相似文献
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L'activation printanière du système Na+---K+-ATPasique des microsomes de la branchie chez trois espèces de salmonidés existant en France (Salmo trutta, Salmo gairdneri, Salvelinus fontinalis) et de l'hybride tigre (Salmo trutta ♀ × Salvelinus fontinalis ♂), les modifications osmotiques après transfert en mer de salinitéélevée (35,5‰) et les performances de survie et croissance ont étéétudiées.La truite fario testée se comporte comme une espèce à smoltification: élévation de l'activité branchiale en eau douce, rapide contrôle du déséquilibre osmotique après transfert en mer, bonnes survie et croissance. La truite arc-en-ciel domestique répond comme une espèce sédentaire, avec des valeurs ATPasiques faibles en eau douce, un déséquilibre ionique relativement important à court terme, et plus long à disparaître. En dépit d'un niveau d'euryhalinitéà certaines époques, les mortalités observées sont élevées en été. L'omble de fontaine présente un très faible niveau d'euryhalinité et n'a pas survécu en mer dans les conditions de l'expérience, l'hybride se comporte de façon intermédiaire par rapport aux deux parents.Le niveau d'ATPase en eau douce ainsi que l'augmentation d'activité après transfert paraissent un bon indicateur des facultés d'adaptation de l'animal à un milieu très hypertonique et révèlent des stratégies différentes de régulation de la balance hydrominérale selon les groupes d'espèces envisagés. Tous ces faits sont discutés. 相似文献Résumé L'hypophyse des salmonidés produit deux gonadotropines (GTHI et GTHII) chimiquement distinctes. Les caractéristiques ultrastructurales des cellules produisant la GTHI et la GTHII ont été étudiées par immunocytochimie en microscopie électronique en utilisant des anticorps dirigés contre les sousunités GTHIβ et GTHIIβ de saumon. Chez les poissons en vitellogenèse, les cellules à GTHI se caractèrisent par un réticulum endoplasmique granulaire (REG) contenant de nombreuses citernes dilatées et un petit nombre de granules positives à la GTHIβ (diamètre 100–300 nm) tandis qu'une immunoréactivité à la GTHII était trouvée sur des granules (diamètre 200–4000 nm) et de grands globules (diamètre 500–4000 nm) dans des cellules apparemment différentes (cellules à GTHII). Des distributions cellulaires distinctes de la GTHI et la GTHII se sont maintenues à des stades plus avancées de la gamétogenèse, bien que les caractéristiques morphologiques des cellules à GTHI et GTHII se recoupent suite à des changements dans le nombre et la taiile des granules, des globules et des citernes du REG. II est à remarquer que les globules prśents dans les cellules à GTHI étaient immunonégatifs à la GTHIβ alors que dans les cellules à GTHII ils étaient toujours marqués par l'anticorps contre la GTHIIβ. Ces résultats confirment que, dans l'hypophyse des salmonidés, les GTHIβ et GTHIIβ sont synthetisées dans des types cellulaires différents et indiquent que des caractéristiques morphologiques ne peuvent être utilisées pour distinguer ces deux types cellulaires.相似文献
Résumé Afin d'étudier les régulations homronales et nutritionnelles de l'expression des ARNm de l'IGF-I (insulin-like growth factor I), un dosage spécifique par hybridation en solution des ARNm d'IGF-I de saumon coho et protégé des RNases, a été développé. Ce dosage, à la fois rapide et sensible, présente un faible coefficient de variation inter- (< 15%) et intra- (< 5%) dosage. L'étude de la distribution tissulaire des ARNm de l'IGF-I et des effets de l'hormone de croissance (GH), de la prolactine (Prl) et de la somatolactine (SI) sur l'expression hépatique des ARNm de l'IGF-I, a été entreprise in vivo chez le saumon coho en utilisant ce dosage. Le foie présente les plus grandes quantités d'ARNm d'IGF-I (16 pg/μg d'ADN). Des quantités significatives d'ARNm d'IGF-I ont été également détectées dans tous les autres tissus étudiés (intestin 4,1; rein 3,8; branchie 2,4; ovaire 2,3; muscle 2,1; rate 1,7 et graisse 1,1 pg/μg d'ADN). L'injection à des saumons coho, de GH à des doses de 0,1 et 1 μg/g de poids vif, augmente significativement et de manière dose dépendante les niveaux hépatiques d'ARNm d'IGF-I. L'injection de SI de saumon coho, un membre récemment découvert de la famille GH/Prl, stimule avec la plus haute dose utilisée, l'expression des ARNm d'IGF-I alors que la Prl n'a aucun effet. La GH augmente de manière dose dépendante (0,01–1 μg/ml) l'expression in vitro des ARNm d'IGF-I par des ARNm d'IGF-I par des hépatocytes de saumon coho en culture. Ces résultats indiquent que, chez le saumon coho, l'expression des ARNm d'IGF-I est présente dans le nombreaux tissus et que, l'expression hépatique est, au moins en partie, régulée par la GH et peut-être par d'autres hormones. Le dosage par séquence spécifique mise au point dans le présent travail, peut-être utilisé pour la quantification précise des ARNm, d'IGF-I de salmonidés et devrait permettre une meilleure connaissance de la physiologie de L'IGF-I chez les salmonidés.相似文献
Résumé Nous avons étudié l'implication de l'acide γ-aminobutirique (GABA) dans le controle de la sécrétion de prolactine (PRL) chez la truite arc-en-ciel en utilisant à la fois des fragments d'hypophyse perifusés et des cellules hypophysaires en culture. Dans notre système de périfusion, le GABA (10−6 à 10−4 M) inhibe la libération de PRL (entre 20 et 40%). L'administration sur les fragments d'hypophyse périfusés de 3APS, un agoniste des récepteurs GABAa, reproduit ces effets inhibiteurs. De plus, la bicuculline, un antagoniste spécifique des récepteurs de type GABAa, abolie complètement les effets du GABA. Lorsqu'il est testé pendant 40h sur des cellules en culture, le GABA (10−5 M) réduit de manière significative la libération de PRL (24.5%). Le Baclofen, un agoniste spécifique des récepteurs GABAb testé à 10−6 et 10−5 M, inhibe aussi la libération de PRL par les cellules en culture. Ces résultats démontrent que le GABA inhibe la libération de PRL en agissant directement sur les cellules hypophysaires et que les 2 types de récepteurs GABA (a et b) sont impliqués dans cette régulation.相似文献
Résumé Cette revue présente les données expérimentales démontrant l'implication de Ca++, de la protéine kinase C et du métabolismes de l'acide arachidonique dans les mécanismes régulant la sécrétion des hormones gonadotrope (GTH) et de croissance (GH). Des modèles de signaux de transduction de l'action de la gonadolibérine (GnRH) et de la dopamine sur la sécrétion de GTH et de GH sont proposés. Les deux GnRHs existant chez le poisson rouge pourraient se lier au même type de récepteur et activer différentes voies de transduction dans deux différents types cellulaires (GTH vs. GH) ou dans un seul type (GTH).相似文献
Résumé Des fragments de peau de truites arc en ciel (Oncorhynchus mykiss, males ou femelles, ont été incubés avec de la testostérone ou de la 11-cétotestostérone, utilisées comme substrats. Chez les poissons immatures, les taux de conversion restent faibles. Chez les males adultes ne donnant pas de sperme, la 11-cétotestostérone est réduite en 5α-androstane-17β-ol-3,11-dione (jusqu'à 5.2%). Chezles poissons en conditions de fraie, le taux de 5α-réduction est seulement de l'ordre de 1 à 2%. Pour ce derniers individus, les incubations de peau en présence de testostérone montrent l'existence d'une forte activité 11β-hydroxylase (23.8-25% pour le male, et 13% pour la femelle). Des différences liées au sexe sont observées de la même manière dans la production de métabolites 5α-réduits (environ 20% avec le tissu male et 13% avect le tissu femelle).相似文献
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Chez l'éperlan, Osmerus mordax, les facteurs abiotiques de nutrition, comme un courant d'eau de 30 à 70 mm s−1 et une intensité lumineuse de 17 000 lux, provoquent une diminution plus rapide du volume des réserves énergétiques, un taux de croissance et une longueur moindre aux cours de l'absorption des réserves énergétiques endogènes. De même, le glucose et l'acétate causent une diminution plus rapide du volume des réserves énergétiques et amènent ainsi une diminution d'énergie disponible pour la croissance (L (la longueur en mm) = 8,085 en glucose, 8,365 en acétate et 8,450 en eau pure). L'effet des matières organiques sur les larves en conditions abiotiques de nutrition n'accroît pas la diminution du volume du vitellus protéique et provoque une diminution accrue du volume de la gouttelette d'huile en acétate et une augmentation en glucose par rapport à l'eau pure. Les efficacités d'utilisation des réserves énergétiques sont supérieures en milieu de matière organique. Ceci suggère un apport énergétique exogène pour les larves; le milieu d'acétate semble plus adéquat. 相似文献
Résumé Afin de développer des vecteurs d'expression de poisson, entièrement homologues, destinés aux microinjections dans des oeufs fertilisés, les constructions suivantes ont été préparées: promoteurs de la metallothionine, a ou b, de truite arc-en-ciel d'une part, et promoteur de l'actine β de carpe d'autre part, associés à l'ADNc de l'hormone de croissance de daurade royale (ptMTa-gsbGH cDNA, ptMTb-gsbGH cDNA, et pcAβ-gsbGH cDNA). Les promoteurs de la metallothionine ont été clonés en utilisant la technique de la RCP. La tMTa comprend 430 pb. tandis que la tMTb en comprend 260 (Hong et al. 1992). Ces deux promoteurs ont été insérés dans pGEM-3Z qui contenait l'ADNc de GH de Sparus aurata, pour former, respectivement, ptMTa-gsbGH et ptMTb-gsbGH. Le gène de l'actine cytoplasmique β de carpe été choisi comme source d'isolement de séquences régulatrices fortement constitutives. Une de ces séquences régulatrices a été liguée à l'ADNc de GH de S. aurata dans pUC118, pour réaliser la construction pcAβ-gsbGH cDNA. L'expression des constructions contenant les promoteurs de la metallothionine a été tentée dans des cultures de cellules de poisson, où elle a été effectivement induite par le zinc. La construction ptMTa-gsbGH cDNA a été microinjectée dans des oeufs fertilisés de carpe. Son intégration dans le génome de carpe a pu être détectée dans l'ADN isolé à partir de nageoires d'animaux agés de 2 mois.相似文献
Résumé Un ADN complémentaire (cDNA) de l'hormone de croissance de carpe (cGH), dans lequel l'acide aminé Cys-123 a été muté en Ala, a été préparé, inséré dans un vecteur d'expression, et exprimé dans Escherichia coli. Le mutant a ensuite été purifié jusqu'à homogénéité. La mutation améliore seulement faiblement la production de la fraction monomérique, indiquant que le Cys-123 n'est pas impliqué dans un repliement erroné. Comparé à la cGH, sa forme mutée (cGH-C123A) montre une plus faible affinité de liaison vis à vis de récepteurs hépatiques homologues, et une plus faible activité biologique dans un test réalisé sur des préadipocytes 3T3-F442A; cela en dépit du fait que les deux hormones présentent des réactions croisées presque identiques avec un anticorps anti-cGH polyclonale. Ces résultats, associés à une comparaison à la structure de l'hGH, suggèrent que le Cys-123 est localisé dans la partie hydrophobique de l'hormone, et affecte, le plus vraisemblablement, la conformation du site de liaison. Les formes dimériques de l'hormone et de sa forme mutée sont moins actives que leurs monomères respectifs. Les études de liaison homologue, réalisées avec des fractions microsomales de foie, révèlent une population unique de récepteurs de Kd = 0,77 nM et de Bmax = 241 fmol/mg de proteine microsomale.相似文献
Résumé L'élévation des niveaux de cathécolamines plasmatiques pendant un stress aigu déclenche une série de mécanismes physiologiques et biochimiques de compensation destinés à suprimer les effets destructeurs du stress sur les transport d'oxygène par le sang. L'activation β-adrénergique de l'antipore Na+/H+ associé à la membrane des globules rouges du sang (rbc) est particulièrement importante. Après activation, l'antipore Na+/H+ excrète du globule rouge H+ et l'alcalinisation du milieu intérieur du globule qui en résulte sert à stimuler l'affinité et la capacité de liaison hémoglobine-O2. L'activation de l'échangeur Na+/H+ est dépendante de l'accumulation intracellulaire d'AMP cyclique. La quantité d'AMP cyclique accumulée est déterminée en partie par le nombre et/ou l'affinité des β-adrénorécepteurs situés à la surface des cellules. Des études récentes montrent que le nombre de β-adrénorécepteurs de surface augmente rapidement pendant une hypoxie aigue et que ce phénomène pourrait expliquer la stimulation de la réponse des globules rouges hypoxiques à des cathécolamines exogènes. Dans certains cas, les niveaux plasmatiques de cortisol et de cathécolamine augmentent simultanément. Nous avons récemment montré qu'une augmentation chronique (10 jours) des niveaux de cortisol in vivo ou une élévation de courte durée (24h) in vitro conduisent à une augmentation des β-adrénorécepteurs internalisés. Suite à l'exposition de globules rouges à une hypoxie, ces nouveaux récepteurs sont rapidement recrutés à la surface de la cellule où ils deviennent fonctionnellement couplés à l'adénylate cyclase. En dernier lieu donc, une élévation chronique des niveaux de cortisol augmente la réponse des globules rouges aux cathécolamines circulants. Nous avons récemment identifié une augmentation similaire des β-adrénorécepteurs de surface cellulaire par le cortisol et une réponse physiologique (glycogénolyse) stimulée par les cathécolamines dans les hépatocytes de truite. Ainsi, une élévation chronique des niveaux de cortisol semble être en général adaptative et augmentant la sensibilité du système de transduction du signal β-adrénergique dans au moins 2 types de cellules (les globules rouges et les hépatocytes) impliquées dans l'amélioration du stress aigu quand les niveaux de cathécolamine plasmatique augmentent.相似文献
Résumé Cette étude décrit les effets de l'IL-1 (interleukin 1) et du LPS (bacterial endotoxin lipopolysaccharide) sur la libération de α-MSH (alpha melanocyte stimulating hormone) par le lobe neurointermédiaire (NIL) d'un téléosteen Oreochromis mossambicus (tilapia). Le traitement in vivo du tilapia avec l'IL-1 pendent 8 jours conduit à une inhibition de 49% de la libération basale d'α-MSH mesurée à l'aide d'une technique in vitro de micro-superfusion. Ce traitement ne modifie pas la sensibilité du tissue au TRH. In vitro, la libération de α-MSH est inhibée par le LPS de manière dose-dépendante. En plus de ses effets sur la libération basale de α-MSH, le LPS bloque aussi la réponse à une stimulation par le TRH. Confrontés à des donnés récemment publiés montrant les effets de (neuro-)peptides sur les paramêtres immunitaires et la présence de cytokines chez les poissons, nos résultats établissent le caractère bidirectionnel de la communication entre le système immunitaire et les systèmes (neuro-)endocriniens.相似文献
Résumé Une liaison spécifique de le [3H]17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one (17α,20β-DP), avec des membranes plasmiques d'ovocytes défollicularisés de truite arc-en-ciel (Onchorhynchus mykiss), a été identifiée et caractérisée. Sa cinétique est rapide et atteint son équilibre en 30 minutes. Le 17α,20β-DP inhibe fortement, et de manière compétitive, la liaison de la [3H] 17α,20β-DP. Une étude de Scatchard a mis en évidence deux sites diffŕents de liaison: un site de forte affinité, de Kd 18 nM et de Bmax 0,2 pmoles/mg de protéine; et un site de faible affinité, de Kd 0,5 μM et de Bmax 1 pmoles/mg de protéine. L'activité de liaison a été solubilisée, avec succés, par le n-heptyl-β-D-thioglucoside. Dans la fraction soluble, la liaison de le [3H]17α,20β-DP atteint un équilibre en 1h.; et elle est complétement inhibiée par la 17α,20β-DP et le 17α,20β,21-trihydroxy-4-pregnen-3-one. Cependant, une étude de Scatchard ne permet de déceler qu'un seul site de liaison, de Kd 0,3 μM. La disparition du site de liaison de forte affinité dans la fraction soluble reste inexpliquée. Ces résultats démontrent l'existence d'un site spécifique de liaison du 17α,20β-DP dans les membranes plasmiques des ovocytes de truite arc-en-ciel.相似文献
Reśumé Les taux de catécholamines cérébrales et l'activité in vitro de la tyrosine hydroxylase (TH) ont été déterminés chez la truite arc en ciel femelle. Chez des animaux triploides ou diploides en recrudescence ovarienne, les taux de catécholamines sont corrélés différemment à l'activité TH selon la structure cérébrale considérée. Le télencéphale présente un Km apparent pour la ptérine plus faible que l'hypothalamus. La dopamine (DA) et le 2-hydroxyestradiol (20HE2) inhibent l'activité de la TH selon des mécanismes respectivement compétitifs Les différents K1 pour la DA obtenus au niveau du télencéphale et de l'hypothalamus pourraient expliquer les différentes relations entre taux de catécholamines et activité TH obtenues pour ces deux structures. Le 20HE2 inhibe également l'activité TH in vitro: la présence d'un radical catéchol s'avère nécessaire (l'oestradiol (E2) n'est pas actif par lui-même), mais le mécanisme de l'inhibition reste à déterminer. Les effets rapides du 20HE2 ne peuvent expliquer l'activation de la synthèse catécholaminergique par l'E2 in vivo démontrée antérieurement.相似文献