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传染性法氏囊病病毒抗体检测诊断试剂盒的研制与应用 总被引：4，自引：0，他引：4
本文用提纯的ＩＢＤＶ细胞毒为抗原,抗鸡Ｉｇ单抗１Ｂ７－ＨＲＰ酶结合物为第二抗体建立了检测ＩＢＤＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ,在此基础研制出ＩＢＤＶ抗体检测诊断剂盒,经过１２００份血清进行检测,结果表明,本试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性好,快速稳定,易于操作,为雏鸡ＩＢＤＶ母原抗体和疫苗注射后特异性本检测提供了可靠的诊断工具。 相似文献
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用对流免疫电泳试验检测鸡传染性法氏囊病血清抗体 总被引：2，自引：0，他引：2
利用自制传染性法氏囊病抗原,采用对流免疫电泳试验检测鸡ＩＢＤＶ抗体。结果表明,该方法能在３０－６０ｍｉｎ内使阳性血清和抗原之间出现明显的沉淀反应,且能被特异性抗原阻断;用ＮＤＶ,ＩＢＶ和ＥＤＳ７６Ｖ等血清代替ＩＢＤＶ血清无交叉反应,对同一批样品进行两次检测,结果具有良好的重复性,同琼脂免疫扩散方法比较,ＣＩＥ法需时短,敏感性高。 相似文献
3.
用市售的腆类化合物、氯制剂、双季铵盐类化合物、酚类制剂和醛类制剂与鸡传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）相混合，在４℃和３０℃作用２４ｈ，用１０００ＩＤ５０的剂量作用后的病毒液感染２３日龄健康ＡＡ鸡。感染后７２ｈ扑杀试验鸡，取期腔上囊，用ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ快速诊断盒检测ＩＢＤＶ抗原，仍呈阳性反应；用３ｍＬ／Ｌ的甲醛溶液与ＩＢＤＶ病毒液混合，在３７℃作用２４、３６和４８ｈ后，按以上剂量感染鸡，感染后７２ｈ扑杀，取其腔上囊，用ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ快速诊断盒 检测ＩＢＤＶ抗原，全部呈阴性。 相似文献
4.
用制备的抗鸡ＩｇＧＭｃＡｂ－ＨＲＰ作为免疫试剂，以ＩＢＤＶ的高免阳性鸡血清作为抗体，用间接ＥＬＩＳＡ法检测经ＩＢＤＶ强毒攻击的各脏器含毒情况，同时与ＡＧＰ法进行比较。结果表明两种方法具有良好的平行关系，间接ＥＬＩＳＡ法比ＡＧＰ法更为敏感；攻毒鸡的法氏囊带毒最多，而在脾、胸腺、肾中均未检出病毒抗原。 相似文献
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ＥＬＩＳＡ检测鸡传染性囊病抗体方法的研究及应用Ｉ．ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ检测抗体方法的建立张晨生，郑海发（北京市兽医实验诊断所１００１０１）本试验目的在于建立ＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ方法与计算机联用作到快速、敏感、准确、特异，适用大量检测样品。作者在抗原包被、... 相似文献
6.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立 总被引：6，自引：1，他引：5
将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均 相似文献
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本文用提纯的ＩＢＤＶ细胞毒为抗原,抗鸡Ｉｇ单抗１Ｂ７ＨＲＰ酶结合物为第二抗体建立了检测ＩＢＤＶ抗体的间接ＥＬＩＳＡ。在此基础上研制出ＩＢＤＶ抗体检测诊断试剂盒。经对１２００份血清进行检测,结果表明：本试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性好,快速稳定,易于操作,为雏鸡ＩＢＤＶ母原抗体和疫苗注射后特异性抗体检测提供了可靠的诊断工具。 相似文献
8.
本研究检测了口服福尔马林灭活的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）对雏鸡的免疫效果。灭活ＩＢＤＶ悬浮于含碳酸钠的ＰＢＳ中，当口灌服后，这种抗原可使雏鸡产生一种抗ＩＢＤＶ血清抗体，这些雏鸡可以抵抗病毒的攻击，当用ＥＬＩＳＡ检测时，证实血清中ＩＢＤＶ特异抗体的免疫球蛋白属于ＩｇＧ，曾报道霍乱毒素对哺乳动物有很地的粘膜辅助特性，但不能增强血清抗体应答，雏鸡经口接种，随后经非肠道途径接种抗原可使抗体应答增强。 相似文献
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用ELISA和PCR对猪,牛血清中HBV抗原,抗体及DNA的检测 总被引：4，自引：0，他引：4
用三个家生产的乙型肝炎（ＨＢ）ＥＬＩＳＡ试剂盒及聚合酶反应（ＰＣＲ）对牛、猪和羊血清分别进行了乙型肝炎病毒抗原（ＨＢＶ－Ａｇ）、抗体（Ａｎｔｉ－ＨＢＶ－Ａｂ）及ＤＮＡ的检测。ＥＬＩＳＡ共检出阳性牛血清１３份（１３／１３６），其中ＨＢ４Ａｇ阳性８份，ＨＢｅＡｇ阳性５份；阳性猪血清４份（４／３６），其中有ＨＢｅＡｇ阳性３份，ＨＢｅＡｇ阳性１份。全部阳性血清和部分阴性血清共１２０份经用ＰＣＲ检测ＨＢＶＤ 相似文献
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彩鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病毒（ＩＢＤＶ－２５１２）研制了检测ＩＢＤＶ抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒。抗原最佳包被浓度为５．１２μｇ／ｍｌ，被检血清最佳稀释度为１：２００，酶标结合物最佳工作浓度１：１０００。本试剂盒与美国ＫＰＩＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，结果敏感性、特异性、重复性均达到美国同类产品水平，且易于操作，在４℃可稳定保存６个月。对北京地区４个非免疫鸡群的１０３只鸡测得其阳性率为５４％，对４ 相似文献
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用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。 相似文献
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异源抗原在建立ELISA检测传染性法氏囊病毒抗体中的应用 总被引：4，自引：0，他引：4
本文报告采用ｖｅｒｏ细胞增殖的ＩＢＤＶ抗原建立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），用于定量检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗体。该法快速、敏感性高、特异性强、重复性好。同时，通过３０份血清样品ＥＬＩＳＡ效价（ＥＴ）的对数值（ｌｏｇＥＴ）与血清Ｐ／Ｎ值（待检血清ＯＤ值与阴性血清ＯＤ值之比）的线性回归分析，得直线方程ｙ＝３．０５８９＋０．０７３９ｘ（ｒ＝０．９１７４），从而血清样品的ＥＴ可通过血清单一稀释度的Ｐ／Ｎ值来计算。用不同来源抗原作ＥＬＩＳＡ表明，从ｖｅｒｏ细胞增殖的抗原比从鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞增殖的抗原可提高检测血清ＯＤ值近２０％，表现出异源抗原具有更高的特异性 相似文献
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PCR检测鸡减蛋综合征病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤儿病毒（ＣＥＬＯＶ）、鸡病毒性关节炎病毒（ＶＡＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）和鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的扩增结果均为阴性。可检测ＥＤＳ－７６病毒ＤＮＡ为０．３×１０－４ｐｇ。结果表明该方法特异且敏感。此外，将常规的三温式ＰＣＲ的操作规程改为双温式，反应体积由常规５０～１００μＬ改为２０μＬ，使其更加快速、简便、经济 相似文献
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采用鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）病毒（ＩＢＤＶ－２５１２）研制了检测ＩＢＯＶ抗体的ＥＬＩＳＡ试剂盒。抗原最佳包被浓度为５．１２μｇ／ｍｌ，被检血清最佳稀释度为１：２００，酶标结合物最佳工作浓度１：１０００．本试剂盒与美国ＫＰＩＩＢＤ－ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，结果敏感性、特异性、重复性均达到美国同类产品水平，且易于操作．在４℃可稳定保存６个月、对北京地区４个非免疫鸡群的１０３只鸡测得其阳性率为５４％，对４５只ＳＰＦ鸡的阳性率为０％。 相似文献
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麻雀自然感染鸡传染性法氏病病毒的调查 总被引：2，自引：0，他引：2
从鸡传染性法氏囊病流行的鸡场捕杀麻雀５４只，用鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体夹心阻断ＥＬＩＳＡ检测抗体，阳性检出率为７．４％；以逆转录－聚合酶链反应检测病毒核酸，阳性检出率为１１．１％；ＲＴ－ＰＣＲ阳性样本病毒分离亦为阳性。结果表明；ＩＢＤ流行的鸡场里的麻雀能够发生ＩＢＤＶ自然感染，麻雀可能是ＩＢＤＶ的贮存宿主或二次传染源之一。 相似文献
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应用ELISA双抗体夹心法检测传染性法氏囊病免疫器官病毒抗原… 总被引：2，自引：0，他引：2
利用ＩＢＤＶ高免血清ＩｇＧ作为包被抗体，成功地建立了双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ，对人工感染雏鸡免疫器官抗原动态分布进行了检测。结果表明，不同毒株感染雏鸡免疫器官病毒抗原含量不一致，持续时间也有差异。采用本方法共检测ＩＢＤ阳性样品２７５份，检出率为１００％，检测对照阴性样品２５份，结果均为阴性，比ＡＧＰ法检测率高４０％左右，灵敏度高１００￣２００倍。试验证明双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ可用于组织抗原分布的检测 相似文献
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鸡传染性法氏囊病快速诊断方法的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
本文报道了一种既可以检测ＩＢＤ囊毒抗原，又可以检测ＩＢＤ抗体的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）双抗体夹心法。用本方法检测ＩＢＤ阳性法氏囊样品１２２份，结果检出阳性１２０份，符合率为９８．４％。检测阴性法氏羹样品８８份，均为阴性。本方法与琼脂扩散试验方法比较，共检测人工感染发病的病死鸡法氏囊９７份，结果琼脂扩散检出阳性法氏囊４９份（５０．５１％），阴性４８份（４９．４８％），而用本方法检测结果，全为阳性，检出阳性率为１００％，比ＡＧＰ法检出率高４９．４８％。检测高免蛋黄液的抗体。１６个样品（以２倍递增进行稀释），结果本方法比琼脂扩散试验高１～２个滴度。试验证明该方法特异、敏感，并且快速简便，试验在室温条件下进行，不需要任何仪器设备，用肉眼观察颜色的变化就可判断试验结果，试验反应时间仅需１０分钟左右。 相似文献
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作者建立了两种抗原捕捉酶联免疫吸附试验方法（多抗和单抗ＡＣ－ＥＬＩＳＡ），用于滴定用不同宿主系统增殖的传染性氏囊毒病，这些宿主系统包括ＢＧＭ－７０传代细胞系。鸡胚成纤维细胞和鸡法氏囊，两种检测方法都有较高的特异性，但是多克隆ＡＣ－ＥＬＩＳＡ比单克ＡＣ－ＥＬＩＳＡ更加敏感（Ｐ〈０．０５），结果还表明，滴定ＩＢＤＶ抗原的常规方法（细胞培养物和鸡胚）比多抗ＡＣ－ＥＬＩＳＡ更敏感。 相似文献
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一般均用血清中和（ＳＮ）试验和间接免疫荧光（１１Ｆ）试验检测牛血清中的抗牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）抗体，本文用ＳＮ和１１Ｆ敏感性相当的ＥＬＩＳＡ检测ＢＶＤＶ抗体，共测定４７２份牛血清，有７９．２％为阳性。ＥＳＩＳＡ与ＳＮ呈正相关，表明ＥＬＩＳＡ可用于ＢＶＤＶ的常规诊断。 相似文献
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应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测传染性法氏囊病病毒 总被引：1，自引：0，他引：1
对传染性法氏囊病(ＩＢＤ)的实验室诊断,过去多用琼扩试验、中和试验等方法,但这些方法或不敏感、或受条件限制不易推广。为此,作者利用酶标单克隆抗体建立了快速检测ＩＢＤＶ的Ｄｏｔ-ＥＬＩＳＡ方法,对人工感染样品和现场发病或感染鸡群的检测获得满意结果。1 材料和方法1.1 材料1.1.1 病毒:ＩＢＤＶ强毒Ｊ1Ｃ7Ｅ6购自中国兽医药品监察所,新城疫病毒(ＮＤＶ)、传染性支气管炎病毒(ＩＢＶ)、传染性喉气管炎病毒(ＩＬＴＶ)由扬州大学农学院微生物组提供。1.1.2 ＩＢＤＶ标准阳性血清和ＳＰＦ鸡血清:扬州大学农学院微生物组提供。ＩＢＤ… 相似文献