单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

杨建民  秦卓明  苏敬良  赵继勋  郝永新 《动物医学进展》2002,23(1):72-75

本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ　方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１　∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８　μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１　００，　兔抗鸡酶标抗体工作浓度为１∶５００。经阻断试验、交叉试验、重复试验，以及与进口试剂　盒　进行平行检测４０份血清，总符合率为９２．５％，表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高，　是一种有应用前景的方法。  相似文献   

禽副粘病毒-2型标准毒株与不同分离株HN基因的序列测定及分析     

杨爱梅  赵继勋  赵西星  张国中  卜春亚 《畜牧兽医学报》2004,35(4):424-427

提取实验室保存禽副粘病毒-2标准毒株Yucaipa株和3株分离毒株F4、F6、F8株的RNA，经RT—PCR，获得4株毒株的HN基因，同时测得F基因与HN基因之间的序列。序列分析结果表明，HN基因的ORF全长为1743 nt，编码一个由580个氨基酸组成的蛋白。运用DNAMAN软件分析，4株毒株与GenBank上已发表毒株的HN基因的核苷酸和氨基酸之间的同源性相比，同源率分别为99．89％和99．69％。分析F基因与HN基因间序列发现两基因间序列与副粘病毒科其他病毒的基因间序列相似，含有基因起始信号和终止信号，但不含3个碱基的连接序列。通过序列分析，在分子水平上进一步证实分离于同一批进口七彩文鸟的F4、F6株是抗原性存在差异的两个毒株。毒株间的血清学关系与分子水平的核苷酸序列、氨基酸序列的比较关系一致。  相似文献   

近期有关鸡病应关注的一些问题     

赵继勋 《北方牧业》2013,(8):14-15

<正>1禽流感1.1禽流感首免时间实际上防疫疫苗就比不防疫要强。要想管好生产,做到不影响生产成绩,必须免疫自家苗加Re-6。凡是禽流感疫苗,都是有效的。唯一的差别是第一次免疫的时间,实际上要根据抗体的高低来决定,我建议H5N1在10日龄左右免疫最为合适,最早不能超过7日龄。因为每次进鸡时都会消毒,做隔离防控,很注意外界的影响。所以说1日龄防疫,是错误的。通常我们的想法是尽早的建立有效抗体水平。但是对H5N1来说,晚点建立问题不大。  相似文献   

禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备和鉴定     

贾强  张立怀  秦卓明  赵继勋  苏敬良  王建新  张国中 《中国兽医杂志》2006,42(9):3-5

以常规方法纯化H9亚型禽流感病毒，制备了两株分泌抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞11A5和1182，其上清ELISA效价均为1：10^4，腹水效价为1：10^7和1：10^6，HI效价上清分别为8、7log2，腹水效价均为15log2。采用HI方法证明其对禽流感病毒H9亚型的特异性，通过Western blot方法证明两株单抗都针对H9亚型禽流感病毒HA1蛋白。  相似文献   

禽流感H9亚型病毒WD株毒种的纯化研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜北宇  赵继勋  张国中  景小冬  黄凤军  章振华 《中国兽药杂志》2006,40(8):1-4

采用鸡胚终点稀释法并结合ND抗血清中和法对禽流感H9亚型病毒WD株毒种进行了纯化。将纯化的WD株毒种在SPF鸡胚连续传12代，对各代次毒种进行了毒价测定，选择一定代次的毒种进行了免疫原性试验及外源病毒检验。结果表明，WD株在鸡胚中连续传12代，其HA价稳定在1：512—1：1024，毒价在10^7.0-10^8.3 EID50／0．1mL；不同代次毒种不含外源病毒，免疫原性均符合要求。由此可见，毒种的纯化方法是有效的，将WD株毒种限制在12代内是可行的，并建立了该毒种的种子批。  相似文献   

间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体     

秦卓明  赵继勋  王培强  姚永秀  张世栋  高峰  刘红 《中国预防兽医学报》1998,(1)

ＡＥＶＶａｎＲｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚神经胶质细胞（ＣＥＢ）传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ、ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１∶１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释度１∶１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ、ＭＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＩＶ、Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特异性强,且简单、方便、经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。  相似文献   

传染性支气管炎病毒的分离提纯及蛋白电泳分析     

秦卓明  王晓佳  赵继勋  贾强  孙树清  金维江  高峰  张世栋  刘红 《水禽世界》1999,(5)

通过ＳＰＦ鸡胚接种分别对传染性支气管炎病毒的２ 个标准毒株Ｍ４１、ＩＢＶ－ Ｔ 株，４ 株山东分离株及１ 株北京分离株进行扩增繁殖；利用差速离心法、蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯；用ＳＤＳ－ 聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行蛋白分析。结果表明：各毒株都含有四种结构蛋白，且各毒株结构蛋白分子量基本相似，其中仅Ｍ 和Ｓ蛋白略有区别  相似文献   

禽副粘病毒2型(PMV-2)致病性的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

王宏卫  赵继勋  赵德明 《畜牧兽医学报》2002,33(2):169-173

7日龄SPF鸡经滴鼻、点眼感染PMV-2，可引起轻微的呼吸道症状，病理组织学观察可见气管粘液分泌亢进和少量的淋巴细胞浸润。PMV-2与传染性支气管炎（IBV）或鸡毒支原体（MG）协同感染比单纯感染这三种病原的任何一种均呈现更严重的呼吸道症状，病理组织变化呈气管纤毛部分或全部脱落，气管粘膜上皮细胞不同程度的变性、脱落。固有层和粘膜下层严重水肿，有大量淋巴细胞、巨噬细胞和异嗜细胞浸润。SPF雏鸡感染PMV-2后的不同时间检查病毒在鸡体内的分布规律，结果表明，PMV-2在法氏囊中大量分布；气管、肺、胸腺中有较多病毒；大脑、脾和肾脏只有少量病毒存在。上述实验结果揭示PMV-2感染SPF雏鸡致病性较弱，PMV-2在鸡呼吸道综合征中起一定作用。  相似文献   

山东省传染性支气管炎病毒分离株的电镜观察     

秦卓明  王传强  何叶峰  贾强  张世栋  金维江  孙树清  赵继勋 《畜牧兽医杂志》2002,21(2):7-8

从山东省分离到4株病毒株，经病理剖检、鸡胚传代，血凝检测、动物回归、电镜和免疫电镜观察确证为传染性支气管炎病毒。将分离毒分别接种SPF鸡胚，制备各自的阳性血情，经磷钨酸负染，电镜和免疫电镜观察。可见到典型的冠状病毒粒子，病毒的直径界于60－200mm之间，呈多形性，有囊膜，个别有纤突。病毒大量聚集，各株病毒在形态上无差异。  相似文献   

人工雌性激素己烯雌酚单克隆抗体的制备及表征   总被引：1，自引：0，他引：1  

王文珺  许艇  高宏斌  赵继勋  张国中  李季 《核农学报》2007,21(1):79-82

合成了己烯雌酚的半抗原CP-DES,并将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联制备免疫原和包被原。将免疫好的Balb/c小鼠脾脏细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出了1株能稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D87C412C7。分析该杂交瘤细胞的染色体,并以间接酶联免疫吸附分析法(iELISA)检测了单克隆抗体免疫球蛋白的类型。获得的杂交瘤细胞的平均染色体数目为45-50对左右,它分泌IgG1亚类的单克隆抗体。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定,细胞上清效价大于640,诱导腹水效价大于108,该单克隆抗体的检测限IC20=2.3ng/ml,与己烯雌酚结构类似物存在一定的交叉反应,与两种载体蛋白(BSA,OVA)无交叉反应。本研究为己烯雌酚ELISA检测方法的建立提供了条件。  相似文献