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1.
将编码猪水泡病病毒（ＳＶＤＶ）主要抗原蛋白的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０的ＰｒＰ１串联启动子的下游,分别构建了重组质粒ｐＢＶ２２０－ＶＰ３（０．６ｋｂ）及ｐＢＶ２２０－ＶＰ３－ＶＰ１（约１．６ｋｂ）,表达的蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测,结果表明,表达的ＶＰ３蛋白只与猪水泡病病毒ＶＰ３特异性亚单位抗血清反应,而ＶＰ３－ＶＰ１蛋白未能成功表达。该实验为ＳＶＤＶ疫苗研究奠定了基础。 相似文献
2.
用活的和灭活的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）接种鸡，以ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔ ｅｒｎ印迹（ＷＢ）试验测由单一结构蛋白Ｓ１、Ｓ２、Ｍ和Ｎ所引起的抗体反应。无论用活的或灭活的ＩＢＶ接种，４种结构蛋白均在鸡体内激发抗体反应。用活的ＩＢＶ接种后，Ｓ１、Ｓ２和Ｎ蛋白诱导相似效价的抗体，而Ｍ糖蛋白诱导的抗体滴度明显较低，Ｓ１、Ｓ２和Ｎ蛋白的ＥＬＩＳＡ抗体出现时间和形成过程相似。均在接种后２周首次检到，且和病毒中和 相似文献
3.
谢占玲 《青海畜牧兽医杂志》1999,29(2):41-44
牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）可引起临床感染和某些疾病，包括繁殖障碍、呼吸综合症、先天性缺陷、肠炎、持续感染（ＰＩ）和粘膜病（ＭＤ）〔１，２〕。本文阐述ＢＶＤＶ的生物学特征、基因组、编码蛋白及ＭＤ致病的分子机制。１ＢＶＤＶ生物学特征１．１ＢＶＤＶ分类位... 相似文献
4.
鸡传染性法氏囊病病毒野毒株VP2基因高可变区酶切位点分析 总被引：5，自引：1，他引：4
参照澳大利亚鸡传染性法氏囊病病毒（ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ）００２７３ 毒株基因组序列设计的 １ 对引物,位于 Ｖ Ｐ２ 高可变区两端,通过 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ,扩增了 ５ 个 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 山东分离株 Ｖ Ｐ２ 基因的 ６０７～１ ０８０ 位核苷酸片段（ａａ２０３～３０６）。 Ｐ Ｃ Ｒ 产物经纯化后,分别用 Ｄｒａ Ⅰ、 Ｓａｃ Ⅰ、 Ｓｓｐ Ⅰ、 Ｐｓｔ Ⅰ和 Ｓａｕ３ Ａ Ｉ共 ５ 种限制性内切酶（ Ｒ Ｅ）进行消化处理,结果 ５ 个分离株均为 Ｄｒａ Ⅰ（－ ）、 Ｓａｃ Ⅰ（－ ）和 Ｓａｕ ３ Ａ Ｉ（＋ ）, Ｌ Ｃ２ 和 Ｔ Ａ 株为 Ｓｓｐ Ⅰ（＋ ）, Ｌ Ｃ１ 和 Ｊ Ｎ 株为 Ｓｓｐ Ⅰ（－ ）, Ｌ Ｃ１ 和 Ｌ Ｃ２ 株为 Ｐｓｔ Ⅰ（＋ ）, Ｊ Ｎ、 Ｌ Ｌ 和 Ｔ Ａ 株为 Ｐｓｔ Ⅰ（－ ）;５ 个分离株的酶切图谱与美国变异株迥异,而 Ｔ Ａ 株与日本超强毒株 ９０１１ 相类似。５ 个分离株与现用疫苗株对比,至少在 Ｖ Ｐ２ 可变区内存在着一定的差异,这可能是 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ 接种免疫鸡群仍然暴发 Ｉ Ｂ Ｄ 的原因之一。 相似文献
5.
鸡新城疫病毒Ｖ４株口服免疫效果夏平安侯安祖＊李宏基＊＊（郑州牧业工程高等专科学校微生物学教研室，郑州４５００４５）对鸡新城疫病毒Ｖ４（ＮＤＶ４）株的安全性及饮水、滴鼻免疫研究发现［１］，该株是良好疫苗株，故有必要对其口服免疫效果做进一步研究。１材料与... 相似文献
6.
恩诺沙星及其活性代谢物在鸡体内的药物动力学 总被引：29，自引：4，他引：25
为全面了解恩诺沙星在鸡体内的动力学过程与药效的关系进行了本研究。用反向高效液相色谱法测定鸡血浆中的药物质量浓度,所得恩诺沙星ｃｉ－ｔｉ数据用ＭＣＰＫＰ计算机程序处理,代谢物环丙沙星的ｃｉ－ｔｉ数据用代谢物动力学方法处理。静注恩诺沙星后的ｃｉ－ｔｉ数据符合二室开放模型,主要动力学参数：ｔ１／２α（０．２５±０．０４）ｈ,ｔ１／２β（５．２６±０．８１）ｈ,Ｖｄ（４．５３±１．０７）Ｌ／ｋｇ,ＣＬＢ（０．６１±０．１１）Ｌ／（ｋｇ·ｈ）,ＡＵＣ（１７．３９±３．９２）ｍｇ／（Ｌ·ｈ）。内服恩诺沙星的ｃｉ－ｔｉ数据,符合有吸收因素二室模型,主要动力学参数ｔ１／２ｋａ（０．４４±０．１１）ｈ,ｔ１／２α（１．１５±０．３８）ｈ,ｔ１／２β（９．１４±１．４５）ｈ,ＡＵＣ（１２．４８±２．３６）ｍｇ／（Ｌ·ｈ）,ｔｍａｘ（１．７７±０．２１）ｈ,Ｃｍａｘ（１．４４±０．３１）ｍｇ／Ｌ,Ｆ７２．１８％。试验结果表明,鸡静注与内服恩诺沙星后,代谢物环丙沙星的生成及消除缓慢、分布广泛,是影响恩诺沙星疗效的重要因素。 相似文献
7.
新城疫病毒F48E9株HN基因的克隆与酶切分析 总被引：9，自引：0，他引：9
为深入探讨新城疫病毒（ＮＤＶ）的结构与功能的关系，扩增和克隆了Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ的ＨＮ基因。首先以提取的Ｆ４８Ｅ９株ＮＤＶ基因组ＲＮＡ为模板逆转录合成第一链ｃＤＮＡ，然后用ＨＮ基因特异性引物作ＰＣＲ扩增ＨＮｃＤＮＡ，结果得到１条分子量约１．８ｋｂ的ＤＮＡ带，与ＮＤＶＨＮ基因的大小一致。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交进一步证实其为ＨＮ特异性ｃＤＮＡ。随后采用平端连接法将其克隆到ｐＳＶ·Ｓｐｏｒｔｌ质粒中，应用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ、ＳｃａⅠ、ＭｌｕⅠ、ＡｐａⅠ、ＰｓｔⅠ、和ＳｍａⅠ对ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮｃＤＮＡ重组质粒作单酶或双酶切，结果表明，ＮＤＶＦ４８Ｅ９株ＨＮ基因较ＨｉｔｃｈｎｅｒＢ１株的ＨＮ基因缺少１个ＭｌｕⅠ位点（７０５ｂｐ左右），多１个ＰｓｔⅠ位点（８０２ｂｐ左右）。 相似文献
8.
鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的表达 总被引：13，自引：2，他引：11
将含有传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１的Ｓ１基因ｃＤＮＡ（从ＡＴＧ到Ｓ前体蛋白裂解位点）的片段克隆到具有多角体启动子（ＰＸＩＶ）和人工合成启动子（Ｐｓｙｎ）的杆状病毒转移载体质粒ｐＳＸ－ＩＶＶＩ＋Ｘ３中，构建了重组转基因载体质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＋Ｘ３－Ｓ１．Ｄ４１。用该重组转移质粒与无包涵体的粉纹夜蛾核型多角体病毒ＴｎＮＰＶ－ＳＶＩ－ＧＤＮＡ（ｏｃｃ－，ｇａｌ＋）共转染草地夜蛾（Ｓｆ９）细胞，筛选并纯化出既能表达Ｓ１基因又能形成多角体的重组病毒ＴｎＮＰＶ－ＩＢＶＳ１－ｏｃｃ＋（ｏｃｃ＋，ｇａｌ－）。通过间接ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ等方法在感染了重组病毒的Ｓｆ９细胞中成功地检测到分子量约６２０００的Ｓ１基因表达产物。虽然该重组Ｓ１糖蛋白可能由于Ｎ－糖基化不完全而分子量小于天然蛋白，但它可以像正常病毒粒子一样，被鸡抗ＩＢＶＤ４１株血清特异识别。 相似文献
9.
鸡传染性支气管炎病毒S1基因在昆虫细胞中的高效表达 总被引：8，自引：1，他引：7
将鸡传染性支气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｓ１ 基因 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆至含有起始密码 Ａ Ｔ Ｇ 的转移载体 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４,构建成重组转移质粒 ｐ Ｓ Ｘ Ｉ Ｖ Ｖ Ｉ＋ Ｘ３／４ Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ,再与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ Ｓ Ｖ Ｉ－ Ｇ Ｄ Ｎ Ａ（ Ｏ Ｃ Ｃ－ , ｇａｌ＋ ）共转染 草地夜蛾（ Ｓｆ９） 细胞, 经空斑纯化得 到已插入 Ｓ１ 基 因并能形成多角体 的重组病毒 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 。以重组毒株感染 Ｔｎ５ Ｂ１ 细胞,在不同时间收取感染了病毒的细胞进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 与 Ｗ ｅｓｔｅｒｎ 印迹检测。 Ｔｎ Ｎ Ｐ Ｖ（ Ｘ３／４） Ｓ１． Ｈｏｌｔｅ Ｏ Ｃ Ｃ＋ 在感染的细胞中高效表达了 Ｓ１ 基因,表达产物为约 １００ ０００ 的融合蛋白,与预计的表达修饰后的产物大小相符,推测此蛋白已糖基化。 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后 ４８、７２、９６ ｈ, Ｓ１ 蛋白分别占细胞内总蛋白量的 ２８７％ 、３５８％ 、３７１％ 。 相似文献
10.
鸡胚接种ＮＤＶ病毒后尿囊液量及血凝效价的研究伍富尧，刘治西（莱阳农学院）王元彬，王洪本（临沂市畜牧局）试验Ｉ为了解不同来源的鸡胚接种ＮＤＶ后的尿囊液量及其血凝（ＨＡ）滴度的差异，进行本试验。１材料和方法１．１毒种新城疫毒种为ＬａＳｏｔａ弱毒株，由中监... 相似文献
11.
传染性法氏囊病病毒抗原性研究进展江青艳，张曼夫（北京农业大学）传染性法氏囊病（ＩＢＤ）是严重危害养鸡业的一大疫病，其病原为ＩＢＤ病毒（ＩＢＤＶ）。ＩＢＤＶ在分类上属于双ＲＮＡ病毒科，病毒基因组共编码出ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３和ＶＰ４四种主要的病毒蛋白，... 相似文献
12.
将编码人１型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）蛋白Ｕ的ｖｐｕ基因片段，克隆到原核表达载体ｐＥＴ－１７ｂ２（ｐＥＴ－１７ｂ去掉了一含起始密码子ＡＴＧ的６０ｂｐ小片段）的Ｔ７噬菌体启动子下游，构建成重组表达质粒ｐＥＴ－１７ｂ２，并使ｖｐｕ基因片段在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中高效表达，产物为１６０００的Ｖｐｕ重组蛋白，表达量占菌体总蛋白的１１．２％。蛋白质印迹试验表明，重组Ｖｐｕ蛋白与抗Ｖｐｕ抗体发生特异性反应 相似文献
13.
泌乳曲线可用一般方程Ｙ＝Ａ１（ｔ）２（ｔ）来进行数学表述，方程中Ａ为一个正纯数，（ｔ）是单调增函数，１＝１为其渐近线，２是一个单调减函数，它具有单位起始值，２＝０为其渐近线。可供１．选择的函数有：１—ｂ。ｅ－ｂ１ｔ（Ｍｉｔｓｃｈｅｒｌｉｃｈ）、１／［１＋ｂ。／（ｂ１＋ｔ）］（Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｒ）、１／［１＋ｂ０／（ｂ１＋ｔｂ２）］（一般动态饱和）、１／（１＋ｂ。ｅ－ｂｔ）（罗辑斯谛）、ｂ。ｅｘｐ［（—Ｉｎｂ。）（１—ｅ－ｂ１ｔ）］（Ｇｏｍｐｅｒｔｚ）和［１＋ｔａｎｈ（ｂ。＋ｂ１ｔ］／２（双曲正切）；可供２选用的函数有：ｅ－ｅｔ（指数）和１／（１＋ｃｔ）（倒直线）。于是可得到１２种模型，且Ｙ＝Ａｔｂｅ－ｅｔ（Ｗｏｏｄ模型）适合于２３头试验牛整个泌乳期内的数据。Ｍｉｔｓｃｈｅｒｌｉｃｈ×数式、Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅｎ×指数式、罗辑斯谛×指数式、罗辑斯谛×倒直线式及Ｗｏｏｄ模型都很适配。有了这些模型，达到产奶高峰的时间、最大产奶量、整个泌乳期的总产奶量以及在衰减期中点的相对衰减等的表达式都得到了。Ｍｉｔｓｃｈｅｒｌｉｃｈ×指数式模型一般比Ｗｏｏｄ模型适配得更好，与Ｗｏｏｄ模型不同的是，它对所? 相似文献
14.
减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析 总被引：9，自引：1，他引：8
克隆了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株基因组ＨｉｎｄⅢ－Ｅ片段，并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央５８．７～６８．９物理图谱单位（ｍｕ），片段全长共３１９４ｂｐ。其中含有１个完整的和２个不完整的开放性读码框架（ＯＲＦ），分别编码ｐＶⅢ蛋白、１００Ｋ蛋白基因Ｃ端和纤维蛋白Ｎ末端部分。ｐＶⅢ蛋白基因由７５３个碱基（ｎｔ）组成，编码２５０个氨基酸（ａａ），编码产物的分子量为２８５００。氨基酸水平的同源性比较表明，ＥＤＳＶ的ｐＶⅢ蛋白与禽腺病毒１型（ＦＡＶ１）及人和其他动物腺病毒ｐＶⅢ蛋白的同源性为２８％～３６％，而与羊腺病毒（ＯＡＶ）的同源性高达５２％，提示ＥＤＳＶ与ＯＡＶ间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征，在ｐＶⅢ和纤维蛋白基因之间，应为Ｅ３区，但该序列只有２４５个ｎｔ组成，序列中保留了ＴＡＴＡＢｏｘ和ｐｏｌｙＡ信号。但除了２个仅编码４９ａａ和３２ａａ多肽的ＯＲＦｓ外，不编码任何产物，且核苷酸序列与其他腺病毒的Ｅ３区无同源性，证实此区无明显Ｅ３区样结构。 相似文献
15.
将新城疫病毒（ＮＤＶ）的融合蛋白（Ｆ）基因或血凝素－神经氨酸酶（ＨＮ）基因插入到火鸡疱疹病毒（ＦＶＴ）的一个非必需基因中，构建了重组ＨＶＴ株。ＮＤＶ抗原的表达受来自劳斯肉瘤病毒的一种强启动子的调控。１日龄腹腔内（ＩＡ）接种表达ＮＤＶ融合蛋白的重组ＨＶＴ的鸡不仅产生免疫学反应，而且在２８日龄可抵抗嗜神经ＮＤＶ强毒株Ｔｅｘａｓ ＧＢ的致死性肌肉攻毒（保护率＞９０％）。表达ＮＤＶ ＨＮ的重组ＨＶＴ仅能提 相似文献
16.
犬瘟热病毒野毒株融合蛋白主要功能区基因的变异研究 总被引：12，自引：2，他引：10
根据犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白（Ｆ）基因的核苷酸序列，设计合成了１０条引物。用１对引物从延吉犬病料中扩增出了含Ｆ２区基因的３１４ｂｐ的片段。除两端引物序列外为２６５ｂｐ，编码８８个氨基酸。它与日本弱毒株（ＣＤＶ－Ｄ，Ｏｏｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株（ＣＤＶ－ＯＮ）、海豹瘟热病毒２型（ＰＤＶ２）、１型（ＰＤＶ１）在核苷酸和氨基酸水平上的同源性，分别为９８．１％和９５．５％、９６．２％和９３．２％和 相似文献
17.
我国部分地区NDV的分子流行病学研究 总被引：12，自引：0，他引：12
新城疫（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ,ＮＤ）是由新城疫病毒（ＮＤＶ）引起的禽类的一种以呼吸道、消化道粘膜出血为典型症状的急性传染病,其病原——ＮＤＶ是副粘病毒科、副粘病毒亚科、腮腺炎病毒属的成员,为有囊膜的负链ＲＮＡ病毒。ＮＤＶ基因组为单股不分节ＲＮＡ,编码六种病毒结构蛋白,其中融合蛋白（Ｆ）和血凝素－神经氨酸酶蛋白（ＨＮ）构成囊膜外表面的纤突,是ＮＤＶ的功能性糖蛋白,在致病和免疫应答过程中起重要作用［１］。由于ＮＤＶ只有一种血清型,对ＮＤＶ不同毒株的差异性分析只能采用毒力、蚀斑形成能力测定等功能性试验来进行,但分型要么太细,无规律可循;要么过于粗放,无流行病学意义,使得ＮＤＶ流行病学研究一直难以突破。 近年来,随着分子生物学技术的广泛应用,使得人们在分子水平上对病毒遗传变异机制的研究取得了长足进展,发现病毒的遗传变异与疾病的流行有着密不可分的联系,并形成了病毒分子流行病学这样一门崭新学科,也为ＮＤ的流行病学研究提供了一种先进技术。已有研究表明,ＮＤＶＦ基因的遗传变异与ＮＤＶ的变异和流行密切相关,是ＮＤＶ分子流行病学研究的首选基因。 本研究根据新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ基因编码区１－３７４位核苷酸序列计算其遗 相似文献
18.
１国内外柑桔产销现状分析 目前,世界上生产柑桔的国家有１３５个。以１９９８年为例,全世界柑桔面积和产量分别达到７１４．８８万 ｈｍ２和 １０ ２８２．１万 ｔ,均居百果之首。产量占世界水果总产量的 １／４,远远多于香蕉（５ ９００万ｔ）、葡萄（５ ７００万 ｔ）和苹果（５ ６００万 ｔ）。柑桔产量居首位的是巴西,年产量 ２ ４２５万 ｔ;美国居第二位,１６３３．５万ｔ;中国居第三位,１１０９．８万ｔ（国内公布的为８５９．４万ｔ）。年产量３００万ｔ以上的还有墨西哥（５４．７万ｔ）、西班牙（４８３万ｔ）、伊朗（３… 相似文献
19.
利用反转录套式聚合酶链反应技术从北京地区３株鸡性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分离株中扩增出１０５４ｂｐＳ１基因高变区。利用限制性内切酶ＳｉｎＩ和ＰｓｔⅠ的酶切位点分析图谱进一步证实了ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ的特异性。将３段Ｓ１基因分别克隆到ＰＵＣ１９质粒中,获得重组质粒ＰＵＣＩＢＶＳ１－ＢＪ１,ＰＵＣＩＢＶＳ１－ＢＪ２和ＰＵＣＩＢＶＳ１－ＢＪ３。 相似文献
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以重组痘苗病毒作载体，探讨了关于Ｖｐｕ ＯＲＦ对人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）Ｅｎｖ蛋白合成和免疫原性的影响。结果表明，如果存在Ｖｐ ＯＲＦ，Ｅｎｖ蛋白的合成降低，并且降低其产生抗Ｅｎｖ抗体的水平。去掉Ｖｐｕ ＯＲＦ，不但提高Ｅｎｖ蛋白的合成，而且提高其产生的抗Ｅｎｖ抗体的水平。 相似文献