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免疫荧光技术快速检测鸡轮状病毒的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用分离的轮状病毒与福氏完全佐剂和福氏不完全佐剂免疫家兔制备高免血清，分离球蛋白，用荧光素标记，建立荧光抗体快速诊断鸡轮状病毒技术。阴性试验、阳性试验、类症试验表明，建立的荧光抗体诊断技术特异性强、敏感性高，与新城疫病毒、禽流感病毒、传染性法氏囊病病毒、大肠杆菌不发生交叉反应。人工感染试验结果表明，20日龄SPF鸡感染轮状病毒后12h，肠粘膜深层涂片可出现较强荧光。自然感染检测结果表明，荧光抗体诊断结果与病毒的分离鉴定结果一致，符合率达100％。 相似文献
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荧光定量PCR技术及其在动物传染病定量检测中的应用 总被引：11，自引：0，他引：11
荧光定量PCR是近年发展起来的一 种新的实时定量检测特定核酸技术,它是核 酸探针技术、荧光共振能量传递技术和PCR 技术的有机结合,而荧光探针是荧光定量 PCR的核心。目前报道的荧光探针主要有 TaqMan、Amplisensor、分子信标、Lightcycler 以及在这4种探针基础上发展起来的其他荧 光探针。各种荧光探针在定量PCR中的作 用是识别和报告特定核酸。这些荧光探针与 相应的靶分子杂交时经历一个自发荧光形成 或消失的构象变化,只有与完全互补的靶核 酸杂交时才会出现这种变化,当靶核酸存在 碱基错配或缺失时,荧光探针就不会与之杂 交,也不会出现荧光的变化。在检测时根据 这种荧光变化来确定检测中特定核酸的存在 和量的多少。荧光探针用于定量PCR不但 提高了PCR的检测灵敏度,还能在同一封闭 管中对模板进行准确定量检测,特别适合特 定核酸扩增的实时监测。荧光定量PCR用 于动物传染病的诊断,不但能定量检测病原 体感染的强弱和在机体内的分布,还具有灵 敏、快速、省力的特点。 相似文献
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应用荧光抗体技术确诊猪瘟效果报告卢洪芬，任裕其，梁红梅，张泽纪（广东省兽医防疫检疫站，广州５１０２３０）近８年间，作者应用荧光抗体技术，对广东省２０个市５８个大中型和个体专业户可疑猪瘟（ＨＣ）流行猪场进行确诊，以观察其大面积实用效果。现将结果报告如下... 相似文献
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2000年4、5月间，闽西有两个猪场发生猪病，通过调查发病情况，观察临床病理变化和猪瘟荧光抗体染铎。细菌分离培养、染色镜检及细菌生化鉴定等实验室诊断，确诊为猪瘟继发绿脓杆菌病。 相似文献
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不同感染时间的猪瘟免疫荧光检查 总被引：1，自引：0，他引：1
荧光抗体试验是一种简便、快速可靠的诊断方法 ,在许多猪瘟扑灭措施中 ,它已成为一种认可的诊断方法。当前养猪生产上由于猪瘟呈散发性 ,其临床症状和病理解剖越来越不典型 ,因此用肉眼来确诊猪瘟已成为临床兽医师们的一个难题。本文用猪瘟强毒攻击未经猪瘟弱毒免疫过的健康猪后 ,每隔一天扑杀 1头 ,分别对脾、淋巴、扁桃腺、肾等采样后用荧光抗体检查 ,得到了在潜伏期内不同脏器出现荧光阳性反应的时间 ,可为大中型猪场借鉴并推广使用。1 材料与方法1 .1 病毒 :系上海市食品卫生监督所病畜化制站专业人员根据典型病理标本采集的脾脏。经… 相似文献
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长期以来,国内确诊鸡新城疫一直采用分离病毒中和试验,血凝和血凝抑制试验,以及流行病学、临床检查和剖检变化等方法,这些方法费时费力,做出及时诊断也是困难的。 相似文献
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实时荧光定量检测技术及应用 总被引：2，自引：0，他引：2
随着现代医学和分子生物学的飞速发展，近年来在病原体的鉴别诊断方面，不断研究和开发了一些先进的检验新技术，TaqMan荧光探针脱颖而出。这项新技术日臻成熟并开始大量应用于临床实践中。它实时、准确、定量和高度重现性的特点优于其它核酸扩增技术，在医学检验领域中颇受关注，在兽医诊断应用中也开始被采用。文章就这一新的检测技术的原理、特点、应用和研究进展进行综述并与常规PCR检测技术进行对比。 相似文献
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新城疫荧光RT-PCR快速诊断方法在出口检疫中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
新城疫(Newcastle disease)，又称亚洲鸡瘟，是由副粘病毒科副粘病毒属的禽副粘病毒Ⅰ型引起的一种主要侵害鸡和火鸡的急性、败血性、高度接触性传染病。禽副粘病毒是一种单股RNA病毒，共分为九个血清型，分别命名为PMV1—PMV9。新城疫病毒是PMV1，临床上表现为呼吸困难、下痢、神经症状、粘膜和浆膜出血。由于该病传染性强、危害大，被世界动物卫生组织列为A类传染病，是肉鸡进出口贸易中重点检疫的对象。 相似文献
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犬瘟热荧光抗体技术的应用研究 总被引：16，自引：1，他引：15
用硫酸铵盐析法和蔗糖梯度离心法，从犬瘟热病毒人工感染犬的肝，脾中浓度提纯犬瘟热病毒，以其免疫家兔，制备兔抗犬瘟热病毒免疫血清，再经硫酸铵沉淀与ＱＡＥ－葡聚糖凝胶Ａ５０层析提取ＩｇＧ，于４℃低速搅拌标记异硫氰酸荧光素，制成兔抗犬瘟热病毒抗原荧光抗体。用上述荧光抗体检测２１只犬瘟热病毒人工感染犬和３５只自然感染犬的１１６份白细胞，抗原阳性１０９份，而健康犬，传染性肝炎犬，犬细小病毒肠炎犬的３７份血液白 相似文献
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家兔大肠杆菌病有腹泻或败血性感染等类型。败血性感染一般无特征性症状和病变,而腹泻病例易与其它某些致腹泻病原感染相混淆或混合感染,如魏氏梭菌性下痢、沙门氏菌感染、泰泽氏病、肠球虫感染等。因此,确诊本病有赖于病原的分离与鉴定。鉴于败血症病死兔实质脏器中能检出大肠杆菌,而腹泻型病例肠内容物(尤其是小肠段)大肠杆菌异常增殖,部分腹泻兔尚能在实质脏器中检出大肠杆菌。笔者用常规间接荧光抗体技术对本病进行快速诊断,结果较为满意。报道如下: 相似文献
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荧光抗体染色法检测猪瘟的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
利用荧光抗体技术检测病猪内脏器官可能存在的猪瘟病毒，对猪瘟的早期诊断具有十分重要意义，猪瘟的常规诊断需要4～5天，而该项技术可在半天之内作出判断，既快速又客观、准确，在规模化猪场临床上可得到很多广泛应用。 相似文献
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荧光抗体技术诊断犬瘟热的研究 总被引：8，自引：1，他引：7
本研究建立了用于检测犬瘟热病毒的间接荧光抗体染色法。试验确定了1:80稀释的抗犬瘟热单克隆抗体和1:32倍稀释的荧光素标记羊抗鼠IgG为适宜的工作浓度。采用该方法检测21只犬瘟热自然感染犬的血液样品，CDV检出率为76％。对3只犬细小病毒自然感染犬，6只健康犬进行检测，各有一例为CDV抗原阳性。此外，用该方法检测了此21只犬瘟热病犬的眼分泌物、鼻汁、粪便和血涂片，其检出率分别为21％、14％、15％和76％。该方法与临床诊断的符合率为77％。另外，对稀释荧光素标记抗体冷冻保存，测定其保存期至少为7个月，染色后荧光稳定性为2周。该方法是一种简便、快速、特异的检测犬瘟热的方法，适于推广使用。 相似文献
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由犬细小病毒(CPV)引起的犬细小病毒病是我国出入境口岸宠物检疫的重要疫病。为了提高检疫效率,本研究拟建立检测CPV的实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA)方法并进行评价。本研究根据CPV衣壳蛋白基因序列设计RPA引物,以GB/T 27533-2011中的PCR方法作为参照,通过检测其他4种犬病毒和3种其他种属的细小病毒来分析实时荧光RPA的特异性、检测不同浓度的模板分析实时荧光RPA的灵敏度、检测CPV阳性或阴性犬的不同组织、血液、尿、粪便等样本以及7株CPV野毒株来分析实时荧光RPA的稳定性。结果显示,本研究建立的实时荧光RPA特异性好、灵敏度高,检测临床组织、体液、粪便样本以及野毒株时都具有良好的稳定性。结果表明,本研究建立的实时荧光RPA可满足CPV快速检测要求。 相似文献
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实时荧光PCR技术在动物疫病诊断中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
近年来，实时荧光PCR技术在动物疲病诊断中的应用得到了进一步的发展，在诊断动物的病毒性、细菌性和寄生虫性疫病中得到了广泛的应用。实时荧光PCR不仅实现了常规PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，实时荧光PCR技术由于多使用了一条可与模板互补配对的荧光探针，提高了特异性，并且由自动化仪器收集荧光信号，避免了肉眼判断的主观性，又可进一步提高灵敏度；实时荧光PCR技术全封闭反应，无须PCR后处理，避免污染，保证了结果的可靠性和重复性。随着实时荧光PCR试剂盒的进一步开发，实时荧光PCR技术将会在动物疫病诊断中得到更加广泛的应用。 相似文献