共查询到20条相似文献，搜索用时 15 毫秒
1.
为探究重组枯草芽孢杆菌SE1制剂对肉鸡生长、免疫及抗氧化功能的影响,本研究将120羽1日龄肉鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10羽:A组饲喂基础日粮,B组饲喂日粮中含枯草芽孢杆菌168制剂1.0×10~6 cfu/g,C组饲喂日粮中含重组枯草芽孢杆菌SE1制剂1.0×10~6 cfu/g。于饲喂实验28 d和42 d时分别测定肉鸡生长性能、免疫功能、肝脏和血清抗氧化能力。结果显示,重组芽孢杆菌SE1制剂与枯草芽孢杆菌168制剂对肉鸡生长、料重比、免疫器官指数没有影响(p0.05),但均可显著促进28 d时的外周血T淋巴细胞的增殖(p0.05),与A组相比,C组SE1制剂能够提高42 d时肉鸡肝脏过氧化氢酶和血清超氧化物歧化酶活力(p0.05),降低28 d时肉鸡肝脏和血清丙二醛含量(p0.01或p0.05);C组血清抗鸡白痢沙门氏菌OmpC IgG水平极显著高于A组和B组(p0.01),肠黏膜IgA水平也显著高于其它两组(p0.05)。结果表明重组枯草芽孢杆菌SE1制剂可提高肉鸡的免疫功能和抗氧化性能,诱导产生特异性抗鸡白痢沙门氏菌Omp C蛋白的血清IgG抗体和回肠粘膜IgA抗体。 相似文献
2.
《畜牧与兽医》2017,(8):84-87
为了研究携带鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白OmpC基因的重组枯草芽孢杆菌活菌制剂在肉鸡上的免疫原性,以具有益生菌属性的枯草芽孢杆菌作为基因疫苗表达宿主,构建表达鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白的枯草芽孢杆菌重组菌(pHT43/WB800n-OmpC)。将重组菌饮水饲喂12日龄艾维茵肉鸡,同时设空白、空转菌及非诱导菌对照组,分别于免疫后27和42日龄测定特异性抗体效价,同时45日龄后采用沙门菌C79-13株腹腔注射攻毒。结果:SDS-PAGE分析显示该重组蛋白大小为37 ku;Western blot分析显示表达蛋白具有很好的反应原性;肉鸡饲喂结果显示,42日龄时血清中检测到特异性抗体,且抗体效价为1∶32;攻毒试验显示重组菌诱导组免疫保护率为76.92%,而对照组、空转菌组、非诱导组保护率分别为23.08%、38.46%和30.77%。结果表明:此重组菌对鸡沙门菌具有免疫保护作用,为沙门菌的免疫机制研究奠定了基础,同时实现了饲用疫苗的双重作用。 相似文献
3.
抗肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌鸡卵黄抗体(IgY)的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过ELISA试验发现鸡抗肠炎沙门氏菌或抗鼠伤寒沙门氏菌卵黄抗体(IgY)具有很高的特异活性。用冻干的卵黄水溶性组分制成的肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌特异性IgY粉末分别含有15．5％和10％的特异性IgY。抗肠炎沙门氏菌IgY与鼠伤寒沙门氏菌有53.3％的交叉反应，抗鼠伤寒沙门氏菌IgY与肠炎沙门氏菌有42.4％的交叉反应。曾有报道证明沙门氏菌特异性IgY可以抑制沙门氏菌在液体培养基中的生长。肠炎沙门氏菌在含有鼠伤寒沙门氏菌特异性IgY的培养基中培养4—6小时的生长速率比对照组少4倍。通过细菌计数发现鼠伤寒沙门氏菌在含有特异性IgY培养基中培养6个小时后的数量比对照组少l.6cfu／ml。用免疫荧光技术和免疫电镜技术对IgY的特异结合活性作进一步的研究，发现沙门氏菌特异性IgY能够结合沙门氏菌表面的抗原上，并导致细菌表面结构改变。 相似文献
4.
本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株.PCR克隆除去信号肽序列的PRRSV ORF5基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-ORF5.将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(缺失Asd、Cya、Crp基因),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-ORF5).鉴定重组菌GP5蛋白的表达;测定重组菌定居特性及安全性;检测免疫小鼠血清抗体;流式细胞仪检测重组菌对小鼠T淋巴细胞CD4+和CD8+亚群的影响;最后进行免疫猪血清抗体检测.结果表明,酶切鉴定证实重组质粒构建成功;Western blot证实重组菌表达的GP5蛋白能与PRRSV阳性血清特异性结合;重组菌在体内可较稳定地定居于小鼠的肠系膜淋巴结和脾脏中,并在其中表达出GP5蛋白;小鼠口服试验证实重组菌无毒性作用;重组菌口服免疫小鼠可以产生抗GP5蛋白抗体且抗体具有中和活性;重组菌株能不同程度地使CD4+、CD4+/CD8+升高,而使CD8+下降,表明重组菌对细胞免疫功能具有调节作用;淋巴细胞增殖试验表明,重组菌能诱发小鼠产生较强的细胞免疫应答;重组菌口服免疫猪可以产生抗GP5蛋白抗体.本试验成功构建了能稳定表达PRRSV GP5蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株,为研究PRRSV口服基因工程疫苗奠定基础. 相似文献
5.
携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性 总被引：2，自引：0，他引：2
根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。 相似文献
6.
重组表达猪传染性胸膜肺炎放线杆菌6种主要毒力因子基因:apxⅠ、apxⅡ、apxⅢ、apxⅣ、apfa和omp,以重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢ和rOMP组合免疫小鼠作为试验I组,重组蛋白rApxⅠ、rApxⅡ、rApxⅢr、OMPr、ApxⅣ和rApfa组合免疫小鼠作为试验Ⅱ组,PBS为对照组,分3次免疫小鼠,采用背部皮下多点注射,每次间隔2周,免疫剂量为0.2 mL/只,3免后1周分别以APP1型菌Shope 4074株(5×109cfu)和APP2型菌S1536株(5×1010cfu)进行攻毒试验。通过小鼠保护率与抗体效价的相关性研究、肺部病理变化及肺脏细菌的分布情况等指标进行综合评价。结果显示,试验Ⅰ组4种重组蛋白特异性抗体水平显著高于其他两组(P<0.05),对APP1型菌攻毒的保护率(9/10)明显高于试验Ⅱ组(5/10)和对照组(0/8),小鼠的免疫保护率与抗体效价之间存在显著正相关;且该组对APP2型菌攻毒的保护作用(无肺脏损伤)也明显优于其它两组(典型肺部损伤)。间接免疫荧光试验表明试验Ⅰ组对肺脏细菌的清除效果也明显优于其他两组。本试验揭示试验Ⅰ组对不同血清型APP攻击能够提供很好的交叉保护作用,从而为猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研制提供参考。 相似文献
7.
肠炎沙门氏菌污染饲料对鸡蛋安全的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
本研究选用160只60周龄白来航蛋鸡,随机分为4组,分别一次性采食30g添加了0、4.7×102、4.7×105、4.7×108cfu肠炎沙门氏菌(SE)的饲料,然后用特异性PCR法对试验鸡所产鸡蛋的不同部位进行SE检测,并观察记录生产性能。结果显示,对照组鸡蛋各部位均为阴性,试验组的蛋壳、壳膜、蛋黄、蛋白均能检测到SE,且随染菌量的增大,检出率增高。当摄入108cfu的SE时,会降低产蛋率,但对鸡蛋的表观性状没有显著影响,成为危害人类健康的潜在隐患。 相似文献
8.
表达绿色荧光蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌感染动力学 总被引：1，自引：0，他引：1
用表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550(pYAGFP)给BALB／c小鼠尾静脉注射和口服，时小鼠脏器进行细菌计数，并用间接ELISA法测定血清中抗细菌的抗体。结果表明，静脉注射重组菌的小鼠在肝脏、脾脏中重组菌数量有2个峰值，总的趋势是越来越少，而血清中抗体效价越来越高，可以初步推断，肝脏、脾脏中的细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性；口服重组菌的小鼠，在各脏器中重组菌的数量呈现正态分布的变化趋势，其中派伊尔结(Peyer’s patches，PPs)中细菌数量与血清中的抗体水平呈一定的相关性，而脾脏、肝脏及肠系膜淋巴结中细菌数量与血清中的抗体滴度无关。 相似文献
9.
将制备的狂犬病rSRV9减毒口服冻干脂质体活疫苗配合以自制的复合佐剂,免疫小鼠、犬、猫,根据ELISA抗体定量检测方法,对免疫后小鼠血清IgG、小鼠粪便IgA、犬和猫血清IgG、犬和猫唾液IgA的ELISA抗体水平进行检测,其检测结果与注射狂犬病疫苗免疫效果进行对比。结果显示,复合佐剂+rSRV9病毒口服免疫后70d,小鼠血清抗狂犬病特异性IgG抗体水平为4 214.00U/mL,小鼠粪便中SIgA抗体水平为137.00U/mL;复合佐剂+rSRV9病毒口服免疫犬120d抗体水平最高,犬抗狂犬病特异性IgG抗体水平为1 420.00U/mL,唾液中SIgA抗体水平为1 199.00U/mL;猫抗狂犬病特异性IgG抗体水平为2 088.00U/mL,唾液中SIgA抗体水平为1 896.00U/mL。狂犬病疫苗口服组与注射组特异性抗体水平差异均不显著。结果表明,狂犬病rSRV9减毒口服冻干脂质体活疫苗的抗体产生水平已接近注射狂犬病疫苗的免疫效果,能够达到对动物的免疫效果。 相似文献
10.
将SPF级Balb/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组小鼠以pLA-F41/L.casei重组干酪乳杆菌滴鼻免疫,对照组用pLA/L.casei干酪乳杆菌滴鼻免疫,应用间接ELISA测定血清中特异性IgG抗体水平和鼻咽部冲洗液、肠道冲洗液、阴道冲洗液及粪便中ETEC F41特异性SIgA抗体水平.分离并计数NALT、NC及PP、IEL淋巴细胞数目,利用免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平,观察重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠诱导的鼻相关淋巴组织(NALT)和肠相关淋巴组织(GALT)黏膜部位的免疫应答.结果表明重组干酪乳杆菌滴鼻免疫小鼠可有效诱导NALT和GALT黏膜部位免疫应答. 相似文献
11.
本研究旨在探讨单株或双株益生菌补充剂对断奶仔兔饲料效率、生长性能和微生物数量的影响。试验选择64只28 d断奶(公母各半)新西兰白兔,随机分为4组,每组4个重复,每个重复4只。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加1×10^6 cfu/g枯草芽孢杆菌(BS组)、1×10^7 cfu/g乳酸菌(LA组)及0.5×106枯草芽孢杆菌+0.5×10^7 cfu/g乳酸菌(BL组)。结果显示:LA组在42 d时体重显著增加(P<0.05),BL组较对照组显著提高日增重和饲料转化率(P<0.05)。LA组和BL组的干物质、有机质、粗蛋白质、中性洗涤纤维、总能量消化率均显著高于对照组(P<0.05)。公兔回肠内芽孢杆菌和大肠杆菌数量均显著高于雌兔(P<0.05)。与对照组相比,BS组家兔肠道各节段的芽孢杆菌数量均高于对照组(P<0.05),而LA和BL组仔兔肠道乳酸杆菌数量显著高于对照组(P<0.05)。结论:日粮单独添加1×107 cfu/g乳杆菌或0.5×10^6 cfu/g枯草杆菌+0.5×10^7 cfu/g乳杆菌可以提高肠道有益菌群数量、营养物质消化率、盲肠发酵、饲料效率和生长性能。此外,仅添加乳杆菌的家兔肠道大肠菌群和粪便评分均有所下降。 相似文献
12.
本试验旨在研究凝结芽孢杆菌对感染沙门氏菌前后蛋鸡生产性能、蛋品质的影响,并探究其对感染沙门氏菌蛋鸡血浆生化指标的影响。将400只沙门氏菌阴性、体况健康的京红商品代蛋鸡根据产蛋率无显著差异(P0.05)原则随机分成4组(A组、B组、C组和D组),每组5个重复,每个重复20只鸡。对照组(A组和C组)饲喂基础饲粮,凝结芽孢杆菌组(B组和D组)在基础饲粮中添加2.5×1010CFU/kg凝结芽孢杆菌;饲喂1周后,C组和D组连续2 d定量口服肠炎沙门氏菌悬浮液(1×108CFU/mL),A组和B组口服等量无菌磷酸盐缓冲液(PBS),继续饲养3周。结果表明:1)感染沙门氏菌前,凝结芽孢杆菌对蛋鸡生产性能无显著影响(P0.05)。感染沙门氏菌后,沙门氏菌显著降低了蛋鸡平均日采食量(P0.05);凝结芽孢杆菌极显著降低了蛋鸡料蛋比(P0.01),显著降低了平均日采食量(P0.05)。2)感染沙门氏菌前,凝结芽孢杆菌极显著增加了蛋鸡蛋壳重/蛋重(P0.01)。感染沙门氏菌后,沙门氏菌和凝结芽孢杆菌对蛋鸡蛋品质指标均无显著影响(P0.05)。3)感染沙门氏菌后,凝结芽孢杆菌显著降低了血浆总胆固醇和甘油三酯含量(P0.05);沙门氏菌显著降低了血浆总胆固醇、甘油三酯和钙含量,显著提高了血浆谷草转氨酶活性(P0.05),极显著提高了血浆碱性磷酸酶活性(P0.01);凝结芽孢杆菌与沙门氏菌对血浆总蛋白含量、钙/磷及谷草转氨酶活性有显著交互作用(P0.05)。综上,凝结芽孢杆菌可改善蛋鸡生产性能和蛋品质,在蛋白质代谢、脂质代谢、肝功能和钙磷吸收上都具有一定程度的改善作用。 相似文献
13.
为了研究凝结芽孢杆菌对蛋鸡源肠炎沙门氏菌致病性的影响,本试验选取80只7日龄雏鸡随机分为4组,每组20只。A组(对照组)和C组饲喂基础饲粮,试验组(B组和D组)在基础饲粮中添加2×108 cfu/kg凝结芽孢杆菌。连续饲喂7 d后,第8天进行肠炎沙门氏菌攻毒,分别给C组和D组雏鸡灌服0.5mL6.25×107cfu/只的肠炎沙门氏菌,而A组和B组灌服0.5mL无菌PBS,感染后观察一周。试验开始后记录雏鸡不同时间点的体重变化,同时在各时间点采集盲肠内容物,进行菌落计数。结果显示,攻毒后C组和D组雏鸡的体重均出现下降情况,但D组雏鸡体重下降幅度较小,但同一时间点,四组雏鸡之间体重无显著差异(P>0.05)。在不同时间点,A组和B组雏鸡盲肠内容物中均未分离到肠炎沙门氏菌,而C组和D组雏鸡在感染后第1天开始即可分离出肠炎沙门氏菌,随着感染天数增加菌落数呈减少趋势,且D组的载菌量均显著低于C组的载菌量(P<0.05)。综上所述,凝结芽孢杆菌能够缓解肠炎沙门氏菌感染引起的雏鸡体重下降,并有效减少盲肠中肠炎沙门氏菌的载菌量。 相似文献
14.
15.
《中国饲料》2017,(4)
本试验旨在研究复合益生菌对肉鸡生产性能、屠体性能及养分表观利用率的影响。试验选取300只1日龄的AA肉鸡商品代雏鸡,采用单因子随机分组试验设计将其分为5个处理组,每个处理组3个重复,每个重复20只鸡。其中,Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮,正常饮水;Ⅱ组为抗生素组,饲喂基础饲粮,在饮水中添加恩诺沙星和硫酸黏菌素;Ⅲ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加5×105 cfu/m L海洋红酵母BSH、1×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和1×106 cfu/g乳酸菌;Ⅳ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加1×106 cfu/m L海洋红酵母BSH、2×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和2×106 cfu/g乳酸菌;Ⅴ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加1.5×106 cfu/m L海洋红酵母BSH、3×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和3×106 cfu/g乳酸菌。试验期为42 d。结果表明:与Ⅰ组相比,添加不同浓度的复合益生菌,肉鸡1~21 d和22~42 d的日增重和日采食量均显著增加(P0.05),与Ⅱ组基本保持一致;与Ⅰ组和Ⅱ组相比,42 d的屠宰率、胸肌率、腿肌率有一定程度改善(P0.05),腹脂率显著降低(P0.05);与Ⅰ组相比,21 d和42 d能量、干物质、粗蛋白质和粗脂肪的养分表观利用率显著提高(P0.05),与Ⅱ组基本保持一致(P0.05)。结果提示,添加不同浓度的复合益生菌能够提高肉鸡的生产性能、屠体性能和养分表观利用率,在规模化肉鸡饲养中用复合益生菌部分替代饲用抗生素是可行的,其中以浓度为1.5×106cfu/m L海洋红酵母BSH、3×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和3×106 cfu/g乳酸菌的复合益生菌的效果最好。 相似文献
16.
文章旨在研究谷氨酰胺对肉鸡生长性能和盲肠沙门氏菌水平的影响。试验1选择1日龄AA肉仔鸡234只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复26只鸡,对照组饲喂玉米-豆粕型日粮,处理1组饲喂基础日粮(在3日龄感染3.6×10^6cfu沙门氏菌),处理2组饲喂基础日粮+10g/kg谷氨酰胺(在3日龄感染3.6×10^6cfu沙门氏菌)。试验2选择1日龄AA肉仔鸡312只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复26只鸡,对照组和处理1组同试验1,处理3组同试验1的处理2组,但肉鸡感染7.5×10^6cfu沙门氏菌试验2处理2组饲喂基础日粮+10g/kg谷氨酰胺(不感染沙门氏菌)。两个试验均开展14d。试验1:日粮添加谷氨酰胺对肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05)。试验2:处理2组较其他组显著提高了1~7d肉鸡的体重和日增重(P<0.05)。肉鸡感染沙门氏菌4或10d后,日粮添加谷氨酰胺对盲肠沙门氏菌含量无显著影响(P>0.05)。结论:日粮添加1%谷氨酰胺可以提高肉鸡生长性能,但并没有降低盲肠沙门氏菌水平,这说明日粮中添加1%谷氨酰胺不足以达到降低盲肠沙门氏菌的最佳水平。 相似文献
17.
18.
《中国预防兽医学报》2020,(4)
为构建表面展示副结核分枝杆菌抗原MAP3007的大肠杆菌活载体疫苗株,本研究将冰核蛋白(INP)作为展示平台,将目的基因克隆于构建的pET-INP表面展示载体中,转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对目的蛋白的表达与定位进行检测。将110只雌性BALB/c小鼠随机分为PBS组(30只),INP-28a对照组(30只),INP-MAP3007重组菌免疫组(30只),空白未攻毒组(20只),其中对照组INP-28a与重组菌INP-MAP3007免疫组以5×10~5cfu/200μL/只剂量分别免疫INP-28a空菌与INP-MAP3007重组疫苗,PBS组注射等体积PBS,3免后以5×10~8cfu/只进行副结核分支杆菌K-10株攻毒试验,空白未攻毒组不做处理,通过检测各组小鼠抗体水平、细胞因子、CD4~+和CD8~+T细胞亚群、增重率以及肠、肝脏和脾脏的病理损伤综合评价疫苗的免疫效果。结果显示,目的蛋白MAP3007正确表达且定位于细菌表面;经3次免疫后疫苗组与其他对照组相比能产生较高的抗体水平(p0.001);攻毒后与其他对照组相比,疫苗组小鼠细胞因子IFN-γ和IL-4极显著升高(p0.001),同时抗炎性细胞因子IL-10降低;疫苗组CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞数量极显著增加(p0.001),且疫苗组小鼠体重增长速度与未攻毒组基本一致;病理组织学结果发现疫苗组各器官病变情况相对较轻或无显著病变。上述结果表明表面展示活载体疫苗能够诱导小鼠产生细胞免疫和体液免疫进而提供较好的免疫保护,且可以降低其病理损伤程度,减缓病程。本研究为新型副结核杆菌疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
19.
为评价牛源空肠弯曲杆菌(C.jejuni)及其HSP43重组蛋白(rHSP43)的免疫原性,本研究采用常规方法分别制备白油、铝胶佐剂和不加佐剂的全菌体免疫原和rHSP43免疫原,分别以不同剂量经皮下接种途径免疫6周龄小鼠,应用间接ELISA方法检测两种免疫原免疫小鼠后抗体消长情况,并通过攻毒实验评价其保护效果。结果显示,其产生的抗体水平白油佐剂组要高于铝胶佐剂组,两者明显高于未加佐剂组(p0.05)。在全菌体免疫原组中,5×109cfu/mL组免疫保护率高于5×107cfu/mL组,前者与5×105cfu/mL组相比较差异极显著(p0.01)。在小鼠免疫后21d以1×1010剂量的C.jejuni攻菌,全菌体免疫原能够提供完全保护,而以白油佐剂乳化的rHSP43仅能提供75%的保护。本研究结果为C.jejuni的疫苗研制提供了实验依据。 相似文献
20.
《中国预防兽医学报》2021,(8)
为评价金黄色葡萄球菌(S. aureus)Csa1A、Hlɑ和EsxA-B蛋白的免疫保护作用,本研究构建了重组质粒p GEX-4T-2-Csa1A、pET-22b-Hlα、pGEX-4T-2-EsxA-B并分别转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导并利用相应层析柱纯化后,采用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。结果显示,获得了纯度较高的重组蛋白Csa1A(rCsa1A)、Hlɑ(r Hlɑ)和EsxA-B(r EsxA-B),纯度分别为89%、95%、85%,大小分别为54 ku、33 ku和39 ku。以纯化的r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B 60μg/只分别免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔14 d,采用间接ELISA法检测各组小鼠免疫后14 d的抗体效价。结果显示,3种重组蛋白免疫后均能刺激小鼠产生较高效价的抗体,三免后抗体效价分别为1:14 700(rCsa1A)、1:16 890(rHlɑ)、1:15 760(rEsxA-B)。利用5型NM2株(2×107cfu/只)、8型LZ145株(2×10~7cfu/只)、336型XJ44株(2×10~7cfu/只)3种血清型S. aureus分别经尾静脉注射攻菌,观察并统计各组小鼠的发病和死亡率,评价各重组蛋白的免疫保护率。结果显示,分别经原核表达了rCsa1A、rHlɑ和rEsxAB。攻菌后对照组小鼠全部死亡;3组重组蛋白免疫组96 h内死亡的小鼠在攻菌48 h后出现精神沉郁,食欲不振等症状,而存活小鼠未出现临床症状。r Csa1A、rHlɑ和rEsxA-B免疫组小鼠提供的抵抗NM2、LZ145、XJ44菌株攻击的保护率分别为60%、60%、50%;80%、70%、70%;50%、60%、60%,其中rHlα的免疫保护效果最佳,其对3种攻毒菌株提供的平均保护率为73.3%,是较为理想的亚单位疫苗候选抗原。以上结果表明,S. aureus rHlα能够刺激免疫小鼠产生抗体,对小鼠提供不同程度的保护力。本研究为奶牛乳腺炎S. aureus亚单位疫苗的研制和应用提供参考依据。 相似文献