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《中国兽医学报》2019,(2):193-197
由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。 相似文献
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为了解齐齐哈尔地区引起规模化猪场猪呼吸道疾病综合征病毒性病原的感染状况,笔者应用PCR或RT-PCR方法对2015年-2017年齐齐哈尔地区规模化猪场147份病料进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)4种主要病毒性病原检测。结果显示,CSFV阳性率为4.72%,PRRSV阳性率为5.44%,PRV阳性率为1.36%,PCV2阳性率为9.52%。PRRSV和PCV2的混合感染呈上升趋势,CSFV和PRV趋于稳定。研究结果表明,控制猪呼吸道疾病综合征的关键是控制好PRRSV和PCV2的传播,根本是开展主要病原的净化工作。 相似文献
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《养猪》2015,(5)
为了解我国部分地区猪群中猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的流行与分布情况,研究采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法分别对2013—2014年采自河北、河南、山东、江苏等部分地区规模化养殖场和散养户的882份发病猪血清样品进行CSFV、PRV、PRRSV、PCV2抗体检测。结果显示,两年CSFV平均抗体阳性率为72.8%,PRV平均抗体阳性率为72.6%,PRRSV平均抗体阳性率为78.5%,PCV2平均抗体阳性率为61.5%。CSFV、PRV、PRRSV抗体阳性率2014年较2013年有下降的趋势,PCV2抗体阳性率2014年较2013年有略微上升的趋势,CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的2种、3种及4种病原混合感染抗体阳性率2014年较2013年有上升的趋势,表明我国猪群中CSFV、PRV、PRRSV、PCV2的混合感染现象日益突出,应引起对这4种猪病的重视,加强这4种猪病疫苗的免疫接种,有效控制猪病的发生和流行。 相似文献
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《中国兽医学报》2016,(3):378-383
参照GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因以及猪圆环病毒2型(PCV2)中ORF2特异性序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件,建立了同时检测PRV野毒株和猪圆环病毒(PCV2)的双重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果表明,该方法检测PRV和PCV2灵敏度分别可达2.23×101、4.5×102拷贝/μL,均比常规PCR检测方法高100倍;同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、均为阴性,无交叉反应;对30份疑似病料进行检测并与普通PCR进行比较,结果显示,二者检测PRV的总符合率为96.67%,检测PCV2的总符合率为93.33%。本试验建立的TaqMan-MGB双重荧光定量PCR检测方法可同时对PRV野毒株和PCV2进行早期快速诊断,可应用于病原学监测,流行病学调查等。 相似文献
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为了解云南省部分地区规模化猪场种公猪精液繁殖障碍病毒性病原的感染状况,应用PCR对2014年—2016年间云南省部分地区规模化猪场212份种公猪精液进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)5种与猪繁殖障碍有关的病原检测。结果表明,PPRSV阳性率为7.08%,CSFV阳性率为3.77%,PCV2阳性率为6.60%,PRV阳性率为3.30%,没有检测出PPV,PRRSV和PCV2的感染率呈上升趋势,其他疫病保持相对平稳态势。所有的混合感染样品中,均检测出了PRRSV,其中PRRSV和PCV2的混合感染最为常见。结果提示,控制猪场疫病发生的关键是控制PRRSV和PCV2的流行,有必要加强对种猪群的疫病病毒检测,推行种猪场主要疫病的控制与净化工作。 相似文献
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本研究旨在建立多重Real-time PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV).根据GenBank数据库中PRRSV、PCV2、PRV、和PPV的核苷酸序列设计特异性引物和探针,通过优化反应条件,检测系列稀释的纯化阳性质粒,建立检测PRRSV、PCV2、PRV和PPV的单项和多重Real-time PCR方法.灵敏度和特异性试验结果表明,无论是单项和多重Real-time PCR检测,该方法都具有高度特异性,与其它病原检测无明显交叉反应;对4种病毒的最低检测量为＜101拷贝或1 TCID50,检测灵敏度比常规PCR高100倍.对40份临床样本进行检测,多重Real-time PCR检测结果和单项Real-time PCR检测结果完全一致.建立的同时检测PRRSV、PCV2、PRV和PPV的多重Real-time PCR方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能对样品进行定量检测等优点. 相似文献
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规模猪场4大疫病的血清学检测及免疫抑制病因分析 总被引：4，自引：0，他引：4
选取杭州、绍兴、嘉兴和湖州4个地区的规模猪场为试验猪场,用正向间接血凝试验(IHA)检测猪瘟病毒(CSFV)和口蹄疫病毒(FMDV)抗体合格率;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)抗体阳性率,分析免疫抑制状况。同时,采取临床可疑病料,用RT-PCR技术检测PRRSV、PCV2、CSFV和伪狂犬病毒(PRV)的感染率。结果显示:不同年龄猪群中,PCV2抗体阳性率都在96.0%以上,而CSFV、FMDV抗体合格率及PRRSV抗体阳性率呈现一致的变化趋势,即母猪最高,哺乳仔猪其次,培育猪和肥育猪最低;在病原检测中,PRRSV和PCV2检出率最高,分别为44.3%和60.7%。另外,双重感染和多重感染明显,特别是PRRSV+PCV2+CSFV三重感染,阳性率达7.6%。本试验结果为制定有效的免疫程序等防治措施提供科学依据。 相似文献
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为了评估怀化市屠宰场健康猪群病原的隐性感染情况,使用荧光PCR检测技术对市内2个屠宰场共360份健康猪扁桃体进行了口蹄疫病毒(FMDV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)等主要猪病原进行核酸检测。结果显示,屠宰场内外观健康猪群中的病原阳性率分别为PCV2 82.78%、PRRSV 13.61%、HP-PRRSV 3.89%、PRV 3.89%、FMDV 3.06%、CSFV 0。表明健康猪群中携带PCV2比较普遍,其他病原也有一定的携带率。 相似文献
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为了解广西贺州市猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病毒（PRV）以及猪圆环病毒（PCV）等病毒性传染病的流行情况,2018—2019年在该市无害化处理场进行采样监测,采用实时荧光定量PCR方法进行病毒核酸检测,分别对猪圆环病毒1型、2型、3型进行检测。结果表明,在检测的病毒核酸中,猪圆环病毒核酸阳性率最高,为58.52%。其中,又以猪圆环病毒2型病毒核酸阳性率最高,达53.98%。此外,样品中同时检出猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒混合感染的阳性率最高达14.20%。猪圆环病毒不同基因型的混合感染中,2型、3型混合感染的感染率最高,为4.26%。说明该市存在CSFV、PRRSV、PRV、PCV 4种病毒的散发性流行及混合感染,应加以重视。 相似文献
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PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV复合PCR检测方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
根据GenBank上猪圆环病毒2型（PCV2）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRSV）和猪瘟病毒（CSFV）的已发表序列,分别设计并合成了5对特异性扩增引物,建立PCV2、PPV、PRV、PRRSV和CSFV单项PCR检测方法,分别扩增出预期的466bp、759bp、349bp、202bp和706bp片段。在优化单项PCR反应条件基础上,建立了PCV2．PPV-PRV-PRRSV-CSFV复合PCR检测方法,为预防和控制上述几种病毒性传染病提供了一种快速、敏感、特异的检测方法。 相似文献
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《动物医学进展》2021,42(2)
为了解猪口腔液应用于猪场病原监测的效果及主要疫病病毒的感染分布情况,分4个季度在武汉市6个生猪养殖集中的行政区(县)的不同类型猪场,以栏舍为单位采集猪口腔液样品,通过荧光定量PCR和常规PCR检测猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪圆环病毒1型(PCV1)和2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)。检测结果显示,猪口腔液样品可检出CSFV、FMDV、PRRSV、HP-PRRSV、PCV1和PCV2,阳性率分别为0.31%、3.69%、7.38%、0.92%、13.85%和25.54%,PRV未检出;FMDV、PRRSV、PCV1、PCV2在全年4个季度均有检出;商品代养殖场、种猪场检出的病毒种类比养殖小区、散养户多;采样的6个区均能检出PCV1和PCV2,尤其是具有致病性的PCV2的检出率更高。结果表明,猪口腔液可用于检测CSFV、FMDV、PRRSV和PCV,采集猪场存在普遍的PCV感染,以栏舍为单位采集猪口腔液用于猪场病原监测具备可行性。 相似文献
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研究旨在了解河池市屠宰猪群主要疫病感染情况,于2019—2022年采集屠宰猪群组织混合样品,应用实时荧光定量RT-PCR检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、口蹄疫病毒（FMDV）、猪塞内卡病毒（SVA）,应用荧光PCR检测圆环病毒2型（PCV2）、圆环病毒3型（PCV3）、伪狂犬病毒（PRV）。结果显示,检测的1 745份样品中,除FMDV和PRV没有检出外,其余5种病原均有检出,样品总体阳性率由高到低依次为42.87%(PCV2)、11.63%(PCV3)、8.48%(PRRSV)、0.80%(CSFV)、0.80%(SVA);县区检出率依次为100.00%(PCV2)、100.00%(PRRSV)、90.91%(PCV3)、54.55%(CSFV)、27.27%(SVA);5种病原存在不同程度的混合感染。研究表明,圆环病毒病、猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟在河池市及其周边地区猪群中流行普遍,需进一步加强监测和做好防控措施。 相似文献
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马林风 《养殖与饲料．饲料世界》2019,(6):76-77
采集无害化处理厂不同季节病死猪样品,并进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、副猪嗜血杆菌(HPS)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪塞尼卡谷以及猪弓形虫(TP)的病原学检测。检测结果显示,除FMDV、TP和SVV未检出外,CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、HPS和PEDV等6种病原均有检出;从时间分布上看,春秋季节发病较高,冬季相对较低,4、5、8、9月明显高于其他月份。 相似文献
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为了解鄂西山区猪群中猪圆环病毒2型的感染情况,应用ELISA方法对鄂西山区2013-2015年间的1260份不同年龄段的猪血清进行PCV2抗体检测,同时检测了PRRSV、PRV g E及CSFV抗体,结果表明PCV2抗体检测平均阳性率为56.75%(715/1260),不同猪群的检测结果表明,公猪的PCV2抗体阳性率最低为20%(4/20),保育猪PCV2抗体阳性率最高为66.67%(204/306);全部未免疫PRRSV疫苗猪的PRRSV抗体平均阳性率为48.45%(344/710),PRV g E抗体平均阳性率为23.73%(299/1260),而CSFV免疫抗体平均阳性率仅为71.35%。同时发现PCV2抗体感染率高的猪场PRRSV、PRV的感染率也相对较高,而CSFV的免疫抗体阳性率则相对较低。本研究结果表明PCV2感染在鄂西山区猪群中普遍存在,且与PRRSV、PRV的感染具有一定的相关性。 相似文献
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为了解湖南省临床健康猪群主要疫病流行情况,2017年从长沙市某屠宰场采集猪组织样品390份,应用实时荧光定量PCR方法,检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)和口蹄疫病毒(FMDV)。结果显示,这6种病毒的感染率分别为5.13%、23.85%、8.46%、77.95%、24.10%和0.51%。对猪群的混合感染情况进行分析发现:PCV2与其他病原的混合感染率最高;二重感染最高的是"PRV+PCV2",达到7.43%,其次是"PRRSV+PCV2",为2.31%;三重感染率最高的是"HPPRRSV+PRRSV+PCV2",达到11.54%,其次是"CSFV+HPPRRSV+PRRSV",为0.77%;四重感染最高的是"CSFV+HPPRRSV+PRRSV+PCV2",达到3.85%,其次是"HPPRRSV+PRRSV+PRV+PCV2",为0.77%。结果表明:临床健康猪群中的PCV2感染率最高,且常与PRRSV和PRV发生混合感染;加强养殖环节PCV2、PRRSV、HPPRRSV和PRV的监控,对于控制常见猪群疫病具有重要意义。 相似文献
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《中国兽医杂志》2019,(6)
本试验针对当前对养猪业危害严重的猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV),分别建立了检测CSFV和PRRSV的双重RT-PCR方法和检测PCV2、PRV及PPV的多重PCR方法。所建立的方法对CSFV、PRRSV、PCV2、PRV和PPV核酸的检出量分别为7.5 pg/μL、14.2 pg/μL、6.9 pg/μL、9.2 pg/μL和8.6 pg/μL。应用建立的方法分别对陕西省的陕南、陕北、关中等地区部分猪场采集的118份血清进行病毒检测。5种病毒的检出率分别是,CSFV为4.23%(5/118),PRRSV为22.01%(26/118),PCV2为15.25%(18/118),PRV为22.88%(27/118),从血清样品中未检测到PPV。本研究建立的检测RNA病毒双重RT-PCR和DNA病毒的多重PCR方法,为猪主要病毒其快速检测提供了可选择方法。 相似文献
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为探明2014年广西猪群主要疫病的感染情况,本研究从发病猪场和屠宰场采集猪组织样品共325份,应用RT-PCR方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV),并应用PCR方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)。结果发现,发病猪场中,这5种病毒感染率分别为12.00%、28.57%、19.43%、53.71%和9.71%,而屠宰场的感染率分别为5.33%、2.67%、5.33%、59.33%和11.33%。对猪群混合感染情况分析发现,PCV2和其他病原的混合感染率最高。其中,发病猪场二重感染最高的为PRRSV+PCV2,达到11.43%,其次为PEDV+PCV2、CSFV+PCV2和PCV2+PRV,阳性率分别为5.71%、4.00%和4.00%;三重感染率最高的为PRRSV+PEDV+PCV2以及PRRSV+PCV2+PRV,阳性率均为2.29%。屠宰场二重感染最高的是PCV2+PRV,达到3.33%;三重感染最高的是CSFV+PCV2+PRV,阳性率为0.67%。结果表明,在发病猪场和屠宰场中,PCV2的感染率最高,且常与其他病原发生混合感染,PRV感染率呈上升趋势,加强对这2种病毒的监控对控制广西地区猪群发病具有重要意义。 相似文献
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根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的参考基因序列,设计3对引物分别用于扩增PCV2的ORF2基因、PRV的gE基因、PRRSV的N基因的目的片段,通过优化反应中各个影响因素,建立了PRV、PCV2、PRRSV的多重PCR（mPCR）检测方法。敏感性和特异性的结果表明,该方法对这3种病毒的最低核酸检出量分别为32.5（PRV）、25.2（PCV2）、35.9pg（PRRSV）。该方法对猪流感病毒（SIV）、猪圆环病毒1型（PCV1）、大肠杆菌、猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（TGE）等病毒的检测结果均为阴性。200份临床样品的多重PCR结果表明,PCV2感染率为80%（160/200）,PRV感染率为21%（42/200）,PRRSV的感染率为78%（156/200）。200份临床样品主要为PCV2和PRRSV混合感染,阳性率达56.0%（112/200）。该方法的建立对这3种病毒病的早期快速检测和指导临床实践具有十分重要的意义。 相似文献