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“三三法”快速检测沙门氏菌的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
将ＤＨＬ平板上产Ｈ２Ｓ和不产Ｈ２Ｓ的菌落分别用ＴＳＩ，ＬＭＡ，甘露醇或ＴＳＩ，ＬＭＡ，ＯＮＰＧ三管判定，辅以肠杆菌科诊断噬菌体０－１，Ｃ多价，Ｅ多价三滴法快速检测沙门氏菌的方法简称“三三法”。近两年来我们用此法检测了１２５批，３４１份样品中２３６株可凝菌株，检出沙门菌２７株，１１个血清型，经系统生化验证符合率１００％。表明该法具有快速，简便，准确，实用的优点。 相似文献
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重庆地区奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验 总被引：6，自引：1，他引：5
对重庆地区６个奶牛场的７６头黑白花奶牛２９４份奶样，采用ＬＭ方法检测隐性乳房炎，按常规方法分离鉴定病原菌，用纸片法对春病原菌进行药敏试验。结果表明，ＬＭＴ阳性奶牛检出率为７８．９４％，阳性服区的检出率为５０．４３％；阳性乳区的细菌检出率为７８７．８３％；分离鉴定的病原菌以葡萄球菌和链球菌为主，占检出细菌总数的９４．６０％。 相似文献
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本文采用过甲酸氧化水解法处理饲料及饲料原料样品、通过日立L-8900氨基酸自动分析仪检测样品中的含硫氨基酸含量,结果显示：每份试样平行测试结果相对偏差小于4％．蛋氨酸和胱氨酸峰面积回收率在93．02％～102．06％．该方法测定含硫氨基酸的重复性和准确性良好．氧化水解法比常规盐酸水解法处理样品检测含硫氨基酸．检测结果更为准确。 相似文献
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采用Ｍｏｎｔｅ Ｃａｒｌｏ模拟方法，研究了家系数目，家系大小，性状遗传力大小等３个因素在不同组合下，ＭＬ法和ＲＥＭＬ法方差组分估计的准确性。结果表明，在不考虑除均值之外其它固定效应的情况下，ＭＬ法的效率高于ＲＥＭＬ法。 相似文献
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应用反转录—聚合酶链反应检测动物组织中的口蹄疫病毒 总被引：4，自引：0，他引：4
应用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测了猪和牛的扁桃体、淋巴结、脊髓、肌肉和蹄冠皮肤中的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）。与接种乳鼠测毒法比较，该方法的灵敏度达０．１６ＬＤ５０￣０．３２ＬＤ５０病毒量。检测人工感染后７￣３５ｄ的猪组织样品７７份，２５份为阳性；接种乳鼠并盲传３代，乳鼠－间接血凝试验（ＩＨＡ）鉴定６份为阳性。检测人工感染后４￣７ｄ的牛组织样品５２份，２０份为阳性；接种乳鼠－ＩＨＡ鉴定 相似文献
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建立了一种检测犬腺病毒-1型(CAV-1)特异性抗体IgG的间接ELISA法.用于检测狐脑炎抗体IgG;并辅助临床症状对狐脑炎进行诊断;还可用于狐脑炎免疫苗免疫后抗体检测.此法比中和试验敏感4～32倍.与间接免疫荧光法相比.符合率为97.5％.敏感性为99％.特异性为97％,应用该法对278份样品进行检测.检出阳性91份,检出率为32.9％.而间接免疫荧光法检出阳性86份。检出率为30.9％.本法具有简便、快速、敏感等特点。 相似文献
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快速,特异检测李斯特菌单抗—夹心ELISA方法的建立及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究以高度特异的，针对单核细胞增生李斯特氏菌，无害李斯特氏菌，格氏李斯特氏菌共同表位的单抗ＬＪ１０Ａ为捕捉抗原抗体和酶标抗体，建立了快速检测该菌的单抗夹心法ＥＬＩＳＡ方法，该方法对单核细胞增生李斯特菌的最小检出量为５×１０＾５个菌／ｍｌ，人工模拟样品至少可检出５个菌／１０ｇ样品，并在４８小时内报告结果，在实际应用中，我们以该法检测了２４０份肉样和８５０份奶样，并平行以改良ＭｃＢｒｉｄｅ琼脂分离国 相似文献
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对重庆地区６个奶牛场的７６头黑白花奶牛２９４份奶样，采用ＬＭＴ方法检测隐性乳房炎，按常规方法分离鉴定病原菌，用纸片法对其病原菌进行药敏试验。结果表明，ＬＭＴ阳性奶牛检出率为７８．９４％、阳性乳区的检出率为５０．４３％；阳性乳区的细菌检出率为８７．８３％；分离鉴定的病原菌以葡萄球菌和链球菌为主，占检出细菌总数的９４．６０％；而这些病原菌对庆大霉素、氯霉素和红霉素的敏感性最高。目前在临床上可首选此类药物治疗奶牛隐性乳房炎 相似文献
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本研究利用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法对绵羊的８种组织器官ＬＤＨ同工酶的分布及相对活性进行了分析测定。比较ＬＤＨ同工酶的酶谱特征。结果表明，绵羊的ＬＤＨ同工酶分布特征不同于其它动物，其相对活性有显著差异。骨骼肌中ＬＤＨ５活性比ＬＤＨ１强，Ｍ亚基比例大于Ｈ亚基；肝脏和心脏中ＬＤＨ１的活性最强。 相似文献
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巴氏奶的酸度值是产品的重要指标。本文比对了GB 5009.239-2016中两种方法检测结果的差异，跟踪检测了10批次浓缩巴氏奶生产过程中和样品在不同贮存条件下的酸度变化情况。结果表明，采用GB5009.239-2016中的第三法比第一法更适用于巴氏奶的酸度检测；原料奶贮存过程中的酸度增长与其本身的菌落总数和贮存时间显著相关；用RO膜浓缩的样品，其酸度浓缩比与蛋白质含量浓缩比相近；采用温度65～70℃、压力-0.7～-0.8bar的条件脱气可使牛奶酸度下降0.4±0.11 T；通过2～6℃冷藏配合冷热冲击条件，样品在14d内酸度增长0.26±0.05 T;10～14℃贮存时，样品在14d内酸度增长0.63±0.12 T。本研究结果显示，浓缩或脱气会显著影响样品的酸度值；贮存条件与贮存期内样品的酸度变化显著相关。本研究针对乳制品生产企业在浓缩巴氏奶生产管理的各主要环节提供了酸度控制的技术参考。 相似文献
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应用改良琼指扩散试验检测鸡传染性法氏囊病病毒的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
应用加３％ＰＥＧ的改良ＡＧＤＴ检测鸡ＩＢＤＶ，检出率最高，对临诊疑似ＩＢＤ的１６个病例检测结果证明，有改良ＡＧＤＴ检出率为６２．５％，而用常规ＡＧＤＴ法检测的阳性率为４３．７％，前者比后者检出率提高１８．８％，同时，在检出的阳性病例中，用改良ＡＧＤＴ法检出ＩＢＤＶ抗源的滴度比常规法高出１～２个倍比滴度。 相似文献
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本研究针对牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus，IBRV）高度保守的gC基因设计单标记并具有自身荧光淬灭功能的LUX^TM引物，建立L刚新型实时荧光PCR方法用于快速检测IBRV。该方法对四株IBRV细胞培养物的检测均呈典型阳性反应，而对其它动物疱疹病毒以及健康牛组织DNA和细胞对照的检测结果为阴性，检测时间包括核酸提取仅需1h～2h。试验表明，LUX^TM荧光PCR法对IBRV细胞增殖病毒液的检测敏感性可达0．04TCID50，比病毒分离敏感性至少提高10倍；对10倍系列稀释的纯化IBRV核酸样品，L刚荧光PCR的检测敏感性比常规PCR可提高10^3倍。将病毒液添加到健康牛精液和血液样品中，该荧光PCR可检测到牛冻存精液中40TCID50牛抗凝全血、血清和临床精液中0．04TCID50的病毒，说明对临床样品的检测有效。本研究所建立的LUXTM荧光PCR方法快速敏感，适合应用于活牛及其遗传物质的进出口检疫、养牛业疾病防控等领域对IBRV的快速检测。 相似文献
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应用酶标ＳＰＡ抑制染色法（ＰＰＡＩ）对ＲＰＶ及相关各种样品进行了检测，并与ＨＡ／ＨＩ进行了比较。本法检测已知阳性粪便样品的效价比ＨＡ高３倍，检测ＲＰＶ细胞培养物的效价比ＨＡ高５倍，能检出少至８０．８ｎｇ／ｍｌ的病毒抗原。应用ＰＰＡＩ、ＨＡ／ＨＩ对来自不同地区２５１份可疑粪样的检测结果表明：ＰＰＡＩ平均检出率为６９．７％，ＨＡ／ＨＩ平均检出率为４６．６％。ＰＰＡＩ比ＨＡ／ＨＩ高２３．１％，与ＨＡ／Ｈ 相似文献
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本站实验室成功地应用RT-PCR技术检测了428份动物及其屠宰后采集的组织(肌肉、脊髓、淋巴结等)样品，同时以常规法接种乳鼠盲传(3代)增毒，然后作IHA检测。两种方法检测结果比较表明，该RT-PCR法与乳鼠-IHA法同样准确(特异性和灵敏性)可靠，前者最显著的特点是快速简便，省时省力，检测时间可从1～10天缩短为10～30小时，为检疫和防疫工作赢得了极其宝贵的时间。 相似文献
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用绵羊肺炎支原体（ＭＯ）抗原免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取血清抗体阳性免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在聚乙二醇作用下进行融合，产生杂交瘤细胞、用间接ＥＬＩＳＡ法对杂交瘤细胞生长孔上清液进行检测，筛选阳性杂交瘤细胞株．以有限稀释法克隆１～２次，得到６株分泌抗绵羊肺炎支原体抗原的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞株．选择抗体分泌较高的１４Ａ６、７Ａ２７、Ｂ３８进行了较详细的研究，结果表明，其核内染色体数为９４～９６．抗体属性是：１株为ＩｇＧ２ａ、２株为ＩｇＧ１．用间接ＥＬＩＳＡ法对３株ＭｃＡｂ作符异性分析、该ＭｃＡｂ只特异地与绵羊肺炎支原体抗原发生反应，而不与猪肺炎支原体、山羊无乳症支原体抗原发生反应．将杂交瘤细胞注射ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠诱生腹水．其抗体效价提高１００倍．杂交瘤细胞在液氮中保存１～２年后复苏仍能稳定地分泌抗绵羊肺炎支原体ＭｃＡｂ。 相似文献
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通过预增菌、增菌和分离培养，挑取可疑菌落分别接种于ＴＳＩ、ＬＤ、ＭＡＮ、ＯＮＰＧ四种微量生化管进行沙门氏菌检验。共检测来自５批次２９０份鱼粉样品中的３９株可疑菌株，其中属沙门氏菌的４株，分属２个血清型（３株奥雷宁堡沙门氏菌、１株山夫登堡沙门氏菌）。与农业部“试行法”比较，符合率达１００％，“四管法”具有更快速，简便，准确，实用等优点。 相似文献
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复方硫氰酸红霉素中的三甲氧苄氨嘧淀（ＴＭＰ）干扰常规的抗生素微生物效价测定法,以致无法检测硫氰酸红霉素的含量。本实验采用在培养基中加入对氨基苯甲酸（ＰＡＢＡ）选择性地拮抗ＴＭＰ的抑菌作用,以枯草芽孢杆菌６３５０１作检定菌,顺利地应用了抗生素微生物检定法来测定硫氰酸红霉素的效价,测定浓度为５～２０Ｕ／ｍｌ,本法对数剂量反应关系线性良好,实验结果可靠性成立,平均生物效价的可信限率可达≤７％,平均回收率为９９．０％,ＣＶ％为０．５３％。 相似文献
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本试验用抗 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 单克隆抗体（ Ｓ Ｄ Ｏ Ｗ １７）建立了检测猪体内 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 抗原的免疫组化染色法,主要步骤：组织块在１００ ｍ Ｌ／ Ｌ中性缓冲液福尔马林中固定２４～４８ ｈ→常规脱水、石蜡包埋、切片４～５μｍ →二甲苯脱蜡→１００％ 酒精→１０ ｍ Ｌ／ Ｌ盐酸酒精 ３０ ｍ ｉｎ（消除内源性过氧化物酶）→９５％ 酒精→８５％ 酒精→７５％ 酒精→蒸馏水→０．０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ→１０％ 马血清３７ ℃３０ ｍ ｉｎ 后转４ ℃过夜→０．０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ３×５ ｍ ｉｎ→生物素化马抗鼠 Ｉｇ Ｇ（１∶２００） ３７ ℃ ６０ ｍ ｉｎ→０．０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ３× ５ ｍ ｉｎ→辣根酶标记链亲和素（１∶２００）３７℃ ６０ ｍ ｉｎ→０．０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ３×５ ｍ ｉｎ→新鲜配制的 Ｄ Ａ Ｂ室温下显色 ５～１５ ｍ ｉｎ→０．０１ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ洗→常规脱水、透明、封片。经对８ 例试验感染 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 仔猪各种组织内 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 抗原的检测,本法具有简单、快速、特异性强,结果清晰、稳定及重复性好等特点,是检测组织内 Ｐ Ｒ Ｒ Ｓ Ｖ 抗原的一种好方法。 相似文献