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为进一步筛选苦马豆的主要毒性成分和生物碱类活性物质,对苦马豆生物碱成分进行初步分析。采用生物碱预试、薄层色谱和气相色谱质谱联用等方法对宁夏采集的苦马豆生物碱成分进行定性分析。经薄层色谱分析,苦马豆生物碱出现了Rf值与苦参碱相近的斑点;气相色谱质谱联用分析确定苦马豆生物碱出现了与苦参碱色谱保留时间相近的峰,且该峰对应的离子碎片质谱图与苦参碱离子碎片质谱图一致。但通过薄层色谱和气相色谱质谱联用分析均未从苦马豆中检出吲哚里西啶生物碱——苦马豆素。结果表明,宁夏采集的苦马豆中含有苦参碱,不含苦马豆素或所含苦马豆素低于检测限。 相似文献
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小花棘豆产苦马豆素内生真菌的筛选与鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
通过对小花棘豆内生真菌的分离纯化,筛选产苦马豆素内生真菌,探讨小花棘豆内生真菌与其毒性成分苦马豆素的相互关系。本研究对采自内蒙古西部草地的6份小花棘豆样品进行内生真菌分离纯化,采用薄层色谱和气相色谱技术对内生真菌发酵液进行苦马豆素定性、定量检测,筛选产苦马豆素内生真菌;结合形态学和分子生物学方法进行内生真菌种属鉴定。从小花棘豆样品中分离得到6株内生真菌。经筛选,其中有2株产苦马豆素,编号为XJ-J-I和XJ-H-1,其发酵液中苦马豆素产量分别为4.209 2mg.L-1和16.733 8mg.L-1。鉴定结果表明,这2株内生真菌虽然形态学存在差异,但基因型相同,同属镰刀属内生真菌—层出镰刀菌(Fusarium prolifera-tum)。小花棘豆中存在产苦马豆素内生真菌。 相似文献
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为探讨SD大鼠苦马豆素亚急性中毒模型的复制时间及苦马豆素对大鼠血液生化指标的影响,进一步揭示苦马豆素毒性作用机理及其中毒早期诊断和防治提供试验模型,64只SD大鼠随机分为4组,即对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组。将甘肃棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15%（含苦马豆素0.03‰）、Ⅱ组添加30%（含苦马豆素0.06‰）、Ⅲ组添加45%（含苦马豆素0.09‰）的比例制作混合饲料,饲喂至典型临床症状出现为止。攻毒后14,35,56,77d每次每组随机采集4只SD大鼠血液,用半自动生化分析仪测定苦马豆素对BUN、CR、ALB、TP、GLU、TG、TC含量及AST、ALT活性的影响。结果显示,GLU、BUN、CR、ALB含量及AST活性呈持续性升高（P〈0.05或P〈0.01）;TG、TP含量分别在攻毒后35,56d降低后又升高（P〈0.05或P〈0.01）,TC含量和ALT活性无明显变化（P〉0.05）。结果表明,中毒剂量与国外报道基本一致,但中毒时间存在较大差异;不同浓度苦马豆素对SD大鼠血液生化指标有显著影响,且具有一定的时间效应和剂量效应关系,长期低剂量摄入苦马豆素可引起动物机体不同程度的肝、肾损伤。 相似文献
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产苦马豆素真菌的筛选与鉴定 总被引：7，自引：2，他引：5
为探明青海及内蒙古多种疯草类植物及其根际土壤中是否存在产生苦马豆素的真菌,并对其种属进行鉴定,同时测定其苦马豆素产率。本试验拟对采自内蒙古和青海的疯草样品中的内生真菌及根际土壤真菌进行分离;应用薄层色谱和气相色谱法分别检测菌丝及发酵液中苦马豆素含量,筛选可产生苦马豆素的真菌;运用形态学和分子生物学方法对其属种进行鉴定。从青海采集的疯草样品中分离并筛选出2株可产苦马豆素真菌,一株为土壤真菌,一株为内生真菌,分别命名为FS-5和EFG-7;菌丝中苦马豆素含量分别为0.773和0.11 mg.g-1,结合形态学和分子生物学试验结果,确定这2株真菌分别为裂褶菌属真菌和镰孢菌(霉)属三线镰刀菌。结果显示,我国青海疯草及根际土壤中存在可产生苦马豆素的真菌。 相似文献
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苦马豆素的性质,分离与检测 总被引：7，自引：1，他引：6
苦马豆素的发现引起了植物学，病理学、病理学、化学、生物化学、免疫学和医学界的极大兴趣，从而促进了苦马豆素及其相关化合物的研究。本文着重介绍苦马豆素的理化性质，化学名称、来源、提取分离与检测。 相似文献
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对宁夏黄花棘豆中产苦马豆素内生真菌进行分离和鉴定,为进一步研究疯草内生真菌合成苦马豆素的分子调控机理提供菌种和奠定基础。分离并纯化黄花棘豆植物组织中的真菌,采用气相色谱质谱联用法对各菌株菌丝中的苦马豆素进行分析,筛选能产生苦马豆素的内生真菌;紫外线照射和黑暗交替培养诱导内生真菌产孢;提取真菌DNA,扩增和测定真菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GPD）、内部转录间隔区（internal transcribed space,ITS）和线粒体核糖体小亚基（mitochondrial small subunit,mt SSU）基因序列,进行同源性比对和遗传进化分析,对其进行种属分类和命名。本研究从宁夏黄花棘豆中共分离到5株真菌,其中菌株NX-FEL001菌丝中含有苦马豆素,经诱导培养,该菌株能产生分生孢子及分生孢子梗等结构;序列同源性和系统发育分析结果表明,该菌株与Undifilum真菌的亲缘关系最近,根据形态结构和分子进化分析结果将菌株NX-FEL001鉴定为Undifilum oxytropis。 相似文献
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产苦马豆素菌株Aspergillus ustus发酵工艺研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对产苦马豆素菌株Aspergillus ustus发酵条件进行优化,采用正交试验方法对发酵过程中的营养因子(碳源、氮源)和环境因子(基础培养时间、温度、装样量、pH等因素)进行筛选,运用气相色谱仪对菌株Aspergillus ustus 不同培养条件下的苦马豆素产量进行检测.结果显示,产苦马豆素菌株Aspergillus ustus的最适发酵条件是豆粕培养基,硝酸钾4 mg,麦芽糖20 mg,装样量250mL,pH 6.0,温度35℃,发酵时间4周.本试验为苦马豆素来源提供了新途径,为苦马豆素工业化生产奠定了基础. 相似文献
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金龟子绿僵菌发酵液中苦马豆素含量及催化酶基因mRNA表达分析 总被引：2，自引：2，他引：0
旨在探明金龟子绿僵菌发酵液中苦马豆素含量及与苦马豆素生物合成有关的催化酶基因mRNA表达的关系,将金龟子绿僵菌接种于察氏培养基进行发酵培养,运用Q Exactive高分辨质谱仪检测培养第1、3、5、7天发酵液中苦马豆素的含量,采用qRT-PCR法检测培养第1、3、5、7天发酵液中苦马豆素生物合成通路上的催化酶基因SwnA、SwnH1、SwnH2、SwnK、SwnN、SwnR和SwnT的mRNA转录水平。结果显示,根据苦马豆素质量浓度和峰面积的变化测算出回归方程为y=31 302.5x-45 910.5（R2=0.996 7）,在培养第3天发酵液中苦马豆素含量最高为174.014 μg·mg-1;SwnA、SwnH1、SwnH2、SwnK、SwnN、SwnR和SwnT基因在不同发酵时期mRNA表达差异较大,其中SwnR基因mRNA表达与发酵液中苦马豆素含量变化相一致,而SwnH2基因mRNA表达与发酵液中苦马豆素含量变化相反。结果表明,金龟子绿僵菌SwnR基因mRNA表达与苦马豆素合成关系密切,可为后续开展苦马豆素微生物发酵工艺及其生物合成通路研究提供重要参考。 相似文献
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Thirteen strains of mycobacteria isolated from deer and various species of wild birds were analysed by gas chromatography (GG) for cellular fatty acids and by thin-layer chromatography (TLG) for polar lipids. These strains were compared to reference strains of Mycobacterium avium, M. para tuberculosis and M. mal-moense. All the examined strains exhibited a generally similar fatty acid pattern characterized by relatively large amounts of hexadenca-noate (16:0), octadecenoate (18:1), octadecanoate (18:0) and 10-me-thyl-octadecanoate (tuberculostearic acid, 10-Me-18:0). Several additional acids were also generally present but in smaller amounts. By means of small but distinct differences in fatty acid composition, the wild animal isolates could be distinguished from both M. paratuber-culosis and M. malmoense but not from M. avium.The TLG polar lipid patterns on the other hand separated the wild animal isolates into 2 distinct groups of complex and simple polar lipid composition which corresponded to the morphologically smooth and rough types, respectively. The complex patterns of the smooth strains were comparable to those of the M. avium serovars whereas both the rough wild animal isolates and all the M. paratuber-culosis strains showed a simple pattern of polar lipids.Both fatty acid profiles and TLG polar lipid patterns support allocation of the wild animal isolates to the MAIS complex. Moreover, the 2 chemical techniques, particularly the GC procedure, are very useful for a more rapid and precise identification of the slow-growing wild animal mycobacterial isolates which have hitherto been characterized on basis of vague criteria. 相似文献
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建立控制赤黄止痢颗粒中赤芍的分析方法。采用薄层色谱法(TLC)对赤黄止痢颗粒中赤芍进行定性分析,采用高效液相色谱法(HPLC)对制剂中芍药苷进行含量测定。薄层色谱结果表明,赤黄止痢颗粒中的赤芍在与对照品色谱相应的位置上,显相同的蓝紫色斑点,而阴性样品无相同特征斑点。HPLC结果表明,芍药苷在0.25~2.0 mg范围峰面积线性关系良好(R2=0.9996);芍药苷的平均回收率为99.74%,RSD为1.95%(n=9)。结果表明,研究建立的赤黄止痢颗粒中赤芍的薄层色谱鉴别方法和含量测定分析方法可操作性强,结果准确可靠,重复性好,为赤黄止痢颗粒质量标准的制定提供了方法学依据。 相似文献
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为了建立乌梅颗粒的质量标准,采用薄层色谱法(TLC)对乌梅、黄连进行鉴别;用高效液相色谱法测定乌梅颗粒中枸橼酸的含量。色谱条件为Silgreen C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢铵溶液(3∶97)(用磷酸调节p H值至3.0);检测波长为210 nm;流速为0.6 m L/min;柱温为室温。研究建立了乌梅、黄连的薄层色谱定性鉴别的方法;建立了HPLC测定乌梅颗粒中枸橼酸含量的方法。建立的乌梅颗粒鉴别及枸橼酸含量测定方法简单、易于操作、准确度高、重现性好,可用于乌梅颗粒的质量控制。 相似文献
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建立了饲料添加剂L-赖氨酸硫酸盐的HPLC测定方法。采用氨基酸分析用色谱柱,以流动相A和流动相B进行梯度洗脱,流速为0.45 ml/min;采用紫外检测器,检测波长在0~16 min为338 nm、在16~25 min为262 nm。结果显示,L-赖氨酸硫酸盐在0~0.25 mg/ml范围内,其含量与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 6,平均回收率99.0%,RSD为0.8%。本方法准确度高、重现性好,结果准确可靠,可有效地控制和检测饲料中饲料添加剂L-赖氨酸硫酸盐的含量。 相似文献
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采用高效阴离子交换分离-脉冲安培检测法建立婴幼儿配方乳粉中葡萄糖、蔗糖、乳糖、低聚半乳糖三糖、蔗果三糖、低聚半乳糖五糖、蔗果四糖及蔗果五糖的分析方法,对4 种品牌乳粉中的糖类进行定性和定量分析。结果表明：离子色谱法测定结果的相对标准偏差小于4%（n=5）,加标回收率为78.0%～96.8%,检出限为3.0～12.0 mg/100 g;采用国标中高效液相色谱法与离子色谱法进行比较,2 种方法对乳粉中蔗糖、乳糖、蔗果三糖的检出结果基本相同,但其他5 种糖高效液相色谱法均未检出,而离子色谱法均检出相应含量,离子色谱法比高效液相色谱法灵敏度高,可同时检测婴幼儿配方乳粉中多种糖类。 相似文献
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文中建立了凝胶渗透色谱净化-气相色谱法同时测定饲料中敌敌畏、乐果等30种有机磷农药残留的方法。饲料样品用乙腈体系提取,采用凝胶色谱柱净化,毛细管色谱柱分离(DB-50+,30 m×0.25 mm×0.25μm),火焰光度检测器(FPD)检测,外标法定量。其方法检测限为5.6~54μg/kg,三水平添加回收率为71.3%~114.1%,RSD为0.3%~14.8%。方法简便、准确,并能满足饲料中多种有机磷农残测定的需要。 相似文献
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Benjamin Kimble Kong Ming Li Merran Govendir 《Journal of veterinary science (Suw?n-si, Korea)》2013,14(1):7-14
An improved method to determine meloxicam (MEL) concentrations in koala plasma using reversed phase high performance liquid chromatography equipped with a photo diode array detector was developed and validated. A plasma sample clean-up step was carried out with hydrophilic-lipophilic copolymer solid phase extraction cartridges. MEL was separated from an endogenous interference using an isocratic mobile phase [acetonitrile and 50 mM potassium phosphate buffer (pH 2.15), 45:55 (v:v)] on a Nova-Pak C18 4-µm (300 × 3.9 mm) column. Retention times for MEL and piroxicam were 8.03 and 5.56 min, respectively. Peak area ratios of MEL to the internal standard (IS) were used for regression analysis of the calibration curve, which was linear from 10 to 1,000 ng/mL (r2 > 0.9998). Average absolute recovery rates were 91% and 96% for MEL and the IS, respectively. This method had sufficient sensitivity (lower quantitation limit of 10 ng/mL), precision, accuracy, and selectivity for routine analysis of MEL in koala plasma using 250-µL sample volumes. Our technique clearly resolved the MEL peak from the complex koala plasma matrix and accurately measured MEL concentrations in small plasma volumes. 相似文献
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免疫亲和层析是一种有效的残留检测净化技术,在农药和兽药中得到了广泛应用。作者对免疫亲和层析的原理、关键技术作了详细的阐述,并且介绍了其在兽药及饲料药物添加剂残留中的应用与进展。 相似文献