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兔出血症病毒提纯和多肽的比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
我们采用了甘油－酒石酸钿梯度离心、琼脂糖４Ｂ层析和ＤＥＡＥ３２离子交换层析等三种方法提纯兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）进行比较，其结果发现ＤＥＡＥ３２离子交换层析效果最好，获得的病毒纯度最高，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗ－Ｂｌｏｔ试验表明，ＲＨＤＶ只有一条蛋白多肽分子量为６１ＫＤ，截然不同于以往国内研究报道的ＲＨＤＶ具有３－６条结构多肽等结果，在国内属首次报道。 相似文献
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应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。 相似文献
3.
刘长明 《中国预防兽医学报》1996,(1)
采用弗里昂１１３抽提结合蔗糖梯度密度离心法从人工感染兔出血症（ＲＨＤ）病兔肚脏组织中纯化ＲＨＤ病毒，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＲＨＤＶ由一种结构蛋白构成，分子量为６０ＫＤ，称为ＶＰ６０。应用抗ＲＨＤＶ单克隆抗体进行免疫印迹试验表明，ＶＰ６０可发生蛋白降解，其产物有３８ＫＤ、２８ＫＤ和２６ＫＤ几种多肽成分． 相似文献
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兔出血症病料中病毒核酸成分的分别鉴别 总被引：2，自引：2，他引：0
将兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）感染死亡兔肝反复冻融，分别经氯仿抽提，聚乙二醇（ＰＥＧ）沉淀浓缩，蔗糖垫底超速离心，Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析及蔗糖密度梯度离心，得到纯化的ＲＨＤＶ。电镜观察，ＲＨＤＶ粒子无囊膜，大小为３２～３４ｎｍ，核要酸展层法显示，病毒基因组核酸长度约为７．０ｋｂ。用苯酚抽提法从上述病毒悬液中提取的核酸，在琼脂糖凝胶电泳呈现２条主带，当以λＤＮＡ－ＨｉｎｄⅢ消化物为分子量标准时，它 相似文献
5.
崔尚金 《国外兽医学(畜禽传染病)》1996,16(4):50-54
用杆状病毒系统表达了兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）衣壳蛋白。表达产物的分析表明，用抗ＲＨＤＶ抗体的ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ试验可证实６０ＫＤ重组蛋白的抗原性。细胞培养上清和纯化蛋白的直接电镜表明，在昆虫细胞表达的衣壳蛋白可自我装配形成空病毒样粒子（ＶＬＰ），其大小和形态与天然病毒类似。这些病毒粒子与抗ＲＨＤＶ的多克隆抗体以及四个识别病毒构象表位的单克隆抗体（ＭＡｂ）均有免疫反应性。表明ＶＬＰ 相似文献
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将兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）感染死亡兔肝反复冻融，分别经氯仿抽提，聚乙二醇（ＰＥＧ）沉淀浓缩，蔗糖垫底超速离心，Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析及蔗糖密度梯度离心，得到纯化的ＲＨＤＶ。电镜观察，ＲＨＤＶ粒子无囊膜，大小为３２～３４ｎｍ。核酸展层法显示，病毒基因组核酸长度约为７．０ｋｂ。用苯酚抽提法从上述病毒悬液中提取的核酸，在琼脂糖凝胶电泳呈现２条主带；当以λＤＮＡ－ＨｉｎｄⅢ消化物为分子量标准时，它们分别位于相当于２０ｋｂ（Ａ带）和２．０ｋｂ（Ｂ带）的位置。用ＤＮＡｓｅ、ＲＮＡｓｅ及Ｓ１核酸酶消化试验分析表明，Ａ带是一种双股ＤＮＡ，而日带为单股ＲＮＡ。在Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ中只有Ｂ带可以与德国提供的ＲＨＤＶ－ｃＤＮＡ克隆探针发生杂交反应，而Ａ带不与该探针显示任何反应。此外，用相同方法也可从临床健康兔肝得到在电泳中的表现与Ａ带一致的核酸提取物。本研究表明，在我国流行的ＲＨＤ病料中，出现的约７．０ｋｂ的单股ＲＮＡ是ＲＨＤＶ病原特异的。 相似文献
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禽网状内皮组织增生病病毒与禽生物制品质量控制 总被引：6，自引：0，他引：6
禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）是禽网状内皮组织增生病（ＲＥ）的病原，属反转录病毒种禽网状内皮组织增生病病毒中的一种。该病毒主要侵害火鸡，也能引起鸡、鹅、鹌鹑和鸭等禽类以淋巴－网状细胞增生为特征的肿瘤性的病理综合征。主要表现为急性网状组织细胞增生、... 相似文献
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兔出血症病毒结构蛋白及其降解产物的分析 总被引：2，自引：0，他引：2
采用弗里昂１１３抽提结合庶糖梯度密度离心法从人工感染兔出血症病兔肚脏组织中纯化ＲＨＤ病毒，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＲＨＤＶ由一种结构蛋白构成，分子量为６０ＫＤ，称为ＶＰ６０。应用抗ＲＨＤＶ单克隆抗体进行免疫印迹试验表明，ＶＰ６０可发生蛋白降解，其产物有３８ＫＤ、２８ＫＤ和２６ＫＤ几种多肽成分。 相似文献
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实验性鸡包涵体肝炎病毒侵袭过程中免疫细胞的变化 总被引：1，自引：0，他引：1
用鸡腺病毒内蒙古毒株（ＦＡＶ－ＨＡ）对１日龄ＳＰＦ雏鸡进行人工感染，经ＨＥ染色发现，各淋巴器官的淋巴细胞严重流失，肝脏等器官中单核－巨噬细胞活化增生；经间接免疫荧光法病毒抗原定位，除法氏囊外，均呈不同程度的抗原阳性反应，单核－巨噬细胞阳性明显，用间接免疫荧光法计数，实验组Ｔ、Ｂ淋巴细胞均明显少于对照组。 相似文献
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运用ＢＡ免疫组化技术与ＨＥ染色进行对比研究，探讨了实验性攻击马立克氏病病毒（ＭＤＶ）后鸡体内病毒抗原分布与病变特点之间的关系。结果表明，ＭＤＶ能引起胸腺髓质区、脾动脉周围淋巴鞘、法氏囊生发中心淋巴细胞坏死、网状细胞增生，开逐渐在全身各部位产生多发性淋巴样细胞增生灶。病毒抗原阳性反应与网状细胞增生明显相关。ＭＤＶ抗原阳性细胞主要包括网状细胞，浓缩碎裂的淋巴细胞及浸润的淋巴样细胞，这些细胞浆和胞核均哇 相似文献
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运用ＢＡ免疫组化技术与ＨＥ染色进行对比研究，探讨了实验性攻击马立克氏病病毒（ＭＤＶ）后鸡体内病毒抗原分布与病变特点之间的关系。结果表明，ＭＤＶ能引起胸腺髓质区、脾动脉周围淋巴鞘、法氏囊生发中心淋巴细胞坏死、网状细胞增生，并逐渐在全身各部位产生多发性淋巴样细胞增生灶。病毒抗原阳性反应与网状细胞增生明显相关。ＭＤＶ抗原阳性细胞主要包括网状细胞、浓缩碎裂的淋巴细胞及浸润的淋巴样细胞。这些细胞胞浆和胞核均呈强阳性着染。 相似文献
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雏鸡感染IBDV后法氏囊显微和超微结构的观察 总被引：1，自引：0，他引：1
运用光镜、电镜技术，观察了雏鸡实验感染传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）后，其法氏囊显微和超微结构的动态变化。光镜观察表明，在感染早期，淋巴滤泡髓质部的淋巴细胞发生坏死，间质轻度水肿。感染后４ｄ，淋巴滤泡皮质内的毛细血管呈一典型的出血带环绕髓质，髓质部的淋巴细胞多已坏死、崩解。继之，整个淋巴滤泡呈网络状或囊状空泡。感染６ｄ以后，固有膜内的网状细胞和毛细血管大量增生，新的淋巴滤泡形成。电镜观察证明，在感染早期，淋巴细胞质内的内质网与核膜扩张，线粒体嵴紊乱或空泡化。继之，淋巴细胞核液化，细胞坏死、崩解。巨噬细胞和多核巨细胞大量出现，其胞浆内含有大量吞噬体和吞噬泡。 相似文献
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某商业兔场已４年未发生兔病毒性出血症（ＲＨＤ），在对２３８只兔的ＲＨＤＶ抗体普查中发现兔血清转化现象，且其原因是由一株与ＲＨＤＶ抗原性相关、但无致病性的嵌杯病毒所致。３１日龄断奶仔兔的阳性率为３３．３％，断奶后５～７天、１３～１４天、１９～２０天、３２～３３天的阳性率分别为２７．６％、５６．１％、９０．３％、１００％。种兔血清全为阳性。种兔和刚奶仔兔的ＲＨＤＶ抗体主要是ＩｇＧ。然而，在断奶后１３～１４天却主要是ＩｇＭ和ＩｇＡ。大龄育肥兔ＩｇＭ和ＩｇＡ减少，ＩｇＧ增多。血清转化时未出现ＲＨＤ特异症状。由此可知，肉兔在断奶后不久就感染了这种非致病性病毒。 相似文献
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用单克隆抗体识别出一种与马立克病肿瘤细胞相关的淋巴细胞表面… 总被引：2，自引：0，他引：2
从经马立克病病毒（ＭＤＶ）诱发的种瘤细胞系ＭＳＢ－１细胞免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合中，筛选到一株杂交瘤细胞１４Ｂ３６７。在酶标抗体和荧光抗体反应中，单抗１４Ｂ３６７对ＭＳＢ－１细胞及ＭＤＶ诱发的另二株肿瘤细胞系ＲＰ４和ＲＰ１细胞表现明显的阳性反应，但与鸡白血病病毒及网状内皮增生病病毒诱发的肿瘤细胞系ＲＰ９和ＲＰ１３，以及ＳＰＦ鸡的脾、胸腺、腔上囊细胞仅产生微弱的交叉反应。免疫转印试验和免疫沉 相似文献
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用乙型肝炎表面抗原地衣红染色法检测兔出血症病毒 总被引：4，自引：0，他引：4
本研究采用乙型肝炎表面抗原地衣红染色法对３０例实验感洒兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）的兔及１０例健康对照兔的肝脏进行切片染色观察，并与免疫胶体金抗体标记及ＳＡＢ免疫组织化学染色结果相比较。结果表明，在感染兔的细胞核及细胞 内可见到颗粒状暗棕色的地衣红染色阳性物质，阳性物质的分布及着色强度与免疫组织化学染色结果相一致。健康对照兔的肝细胞内未见到地衣红阳性反应物质。结果提示：ＲＨＤＶ可能与人类乙型肝炎病毒在 相似文献
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为了预防家兔和野兔病毒性出血症ＲＶＨＤ，用牛痘病毒本哈根株构建 了一株重组牛痘ＲＨＤＶ病毒。此重组病毒表达ＲＨＤＶ衣壳蛋白（ＶＰ６０）。对表达产物分析表明，此重组蛋白的大小为６０ＫＤａ，作为抗原，在免疫沉淀和间接免疫荧光试验中可与抗ＲＨＤＶ抗体反应，用重组病毒免疫接种兔，可产生高水平的抗ＲＨＤＶ特异抗体。通过皮内和口服途径接种，可使免疫动物抵抗ＲＨＤＶ强毒的攻击。 相似文献
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从感染细胞的胞核和胞浆分离鉴定出2种核酸型的兔出血症病毒 总被引：3，自引：2，他引：1
以南京（ＮＪ）株的成都（ＣＤ）株兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）人工感染家兔,取病死兔肝组织制成组织匀浆,用１％ＮＰ－４０处理,离心将核质粗分后,将离心洗涤的细胞核心及超声波裂解。上清和胞核匀浆分别经氯仿处理,ＰＥＧ沉淀和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱层析获得纯化病毒,血凝检测表明,不同毒株胞浆和胞核病毒的比例有显著差异,ＮＪ株胞核病毒占优势,ＣＤ株则相反。自胞浆和胞浆病毒样品中分别提核酸,经电泳,ＤＮａｓｅＩ 相似文献
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本文成功建立了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），应用于传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）的快速检测。该方法操作简便快速、特异性好、灵敏度高。同时对深圳某鸡场发生ＩＢＤ病料进行了病毒分离，用Ｄｏｒ－ＥＬＩＳＡ检测接种鸡胚的绒毛尿囊膜裂解上清呈强阳性反应。 相似文献
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用１２只青紫兰兔人工接种兔出血病病毒（ＲＨＤＶ），并于接种前，高温期及频死期分别进行红细胞数，血红蛋白，红细胞压积，红细胞平均容积（ＭＣＶ），红细胞平均血红蛋白（ＭＣＨ），红细胞平均血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）的测定，结果表明接种ＲＨＤＶ后的病兔呈现明显的高渗性脱水。 相似文献