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重组鸡GSTA3蛋白对福美双诱导的TD肉鸡血清中Bax含量的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
《山西农业科学》2017,(11):1849-1852
为研究谷胱甘肽硫转移酶A3(GSTA3)对胫骨软骨发育不良(TD)肉鸡血清中凋亡因子Bax的影响,试验将90羽1日龄AA肉仔鸡预饲7 d后,随机分为6组(A,B,C,D,E和F组),分别在8,9日龄对D,E,F组饲喂添加100 mg/kg福美双的日粮,将饲喂基础日粮组(A,B,C组)和添加福美双日粮组(D,E,F组)的肉鸡各分对照组(A,D组)、重组GSTA3蛋白低剂量(20μg/kg)注射组(B,E组)和高剂量(50μg/kg)注射组(C,F组),在试验第8,10,12天腿部肌肉注射重组GSTA3蛋白,对照组注射稀释用PBS。在饲喂福美双后第1,2,4天分别采集各组肉鸡血液、分离血清,利用ELISA方法测定肉鸡血清中Bax的含量。结果显示,低剂量的重组GSTA3蛋白显著降低第2天基础日粮(B)组肉鸡血清中Bax的浓度,同时显著降低第4天福美双处理(E)组肉鸡血清中Bax的浓度;高剂量的重组GSTA3蛋白显著降低第4天基础日粮(C)组和福美双处理(F)组肉鸡血清中Bax的浓度。低剂量的重组鸡GSTA3蛋白对降低TD肉鸡血清中Bax含量的效果较好,这一研究将为肉鸡TD的防治提供新的方向和研究基础。 相似文献
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为研究细胞外脂肪酸结合蛋白Ex-FABP对胫骨软骨发育不良(TD)肉鸡血清中凋亡因子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)的影响,试验采用连续2 d饲喂含有福美双的日粮来诱导构建肉鸡TD模型,共设置4组正常日粮组(健康组)、4组添加福美双日粮组(福美双组)和1组空白对照组,然后注射Ex-FABP蛋白。结果表明,福美双组和健康组分别注射重组Ex-FABP蛋白后,血清中Bcl-2蛋白浓度相比福美双对照组、健康对照组和空白对照组显著升高。重组鸡Ex-FABP蛋白可能通过刺激机体血清中Bcl-2蛋白的表达,从而抑制软骨生长板细胞凋亡,以发挥治疗TD的作用。研究结果可为TD肉鸡的治疗提供新的思路和方法。 相似文献
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《山西农业科学》2017,(11)
为研究重组鸡GSTA3蛋白对肉鸡TD抗氧化功能的影响,先构建肉鸡TD模型,即通过肌肉注射不同剂量(20,50μg/kg)的原核表达鸡GSTA3蛋白,运用ELISA技术检测血清中GST-α的含量。结果表明,与空白组相比,饲喂福美双第1,2,4天,血清GST-α的含量显著上升(P0.05),注射蛋白组与饲喂福美双组相比,试验第1天,GST-α的含量没有显著差异,试验第2,4天,GST-α的含量显著降低(P0.05),而高剂量组与低剂量组之间GST-α的含量无显著性差异。GSTA3可通过修复肝脏损伤增强其抗氧化能力,直接或间接调节软骨组织中软骨细胞在TD发生过程中的功能。 相似文献
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《江苏农业科学》2015,(8)
采用福美双诱导建立肉鸡胫骨软骨发育不良(tibial dyschondroplasia,TD)模型,研究甲状旁腺素相关肽-印第安刺猬蛋白(PTHr P-Ihh)信号轴在肉鸡发生胫骨软骨发育不良中的调控机制。100羽1日龄健康Ross308肉鸡经1周预饲后,随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组在饲喂8、9 d时饲以基础日粮并添加100 mg/kg福美双,之后继续饲以基础日粮;于15日龄时采集组织样本,进行检测。结果显示,与对照组比较,试验组体质量极显著降低,但TD发生率极显著升高;胫骨与肱骨的骨长度、骨密度,胫骨与股骨的骨强度均显著或极显著降低,而肱骨的骨指数显著增强;TD肉鸡胫骨生长板软骨组织Ihh、PTHr P的mRNA表达极显著下降,ColⅩmRNA表达极显著上升。试验表明,PTHr P-Ihh信号轴调控紊乱,会影响生长板软骨细胞的分化和Col X表达,导致肉鸡形成胫骨软骨发育不良。 相似文献
6.
【目的】研究在基础日粮中添加不同水平维生素D3（VD3）对仔鹅钙磷代谢和免疫机能的影响。【方法】将300只健康、体重均匀的28日龄扬州鹅公鹅随机分成5个处理组,每个处理组6个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂添加500、1 000、2 000和4 000 IU•kg-1维生素D3的试验饲粮,饲养至10周龄。【结果】基础日粮中添加1 000 IU•kg-1的维生素D3显著提高了10周龄扬州鹅血清钙含量、胫骨钙含量、胫骨强度和血清免疫球蛋白IgG含量（P＜0.05）;添加2 000 IU•kg-1维生素D3显著提高了血清钙含量（P＜0.01）、胸腺指数和血清白细胞介素-4水平（P＜0.05）;但日粮维生素D3水平对血清磷含量和碱性磷酸酶活性影响不显著（P＞0.05）。【结论】日粮中添加适宜水平的维生素D3（1 000—2 000 IU•kg-1）有利于提高扬州鹅仔鹅的钙代谢和免疫机能。 相似文献
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【目的】探讨原核表达的柔嫩艾美耳球虫杨凌株3-1E蛋白的生物学活性。【方法】将含有3-1E基因的pGEX-3-1E重组质粒转化大肠杆菌BL21,进行表达并对表达条件进行优化,表达产物纯化后进行Western-blot-ting分析。【结果】表达的3-1E重组蛋白相对分子质量为44.7 ku,与推导结果一致。在28℃、IPTG诱导浓度为0.5mmol/L的条件下诱导6 h,可溶性3-1E重组蛋白表达量最高。Western-blotting结果表明,3-1E重组蛋白可与兔抗鸡E.tenellaYL阳性血清发生反应。【结论】3-1E重组蛋白表达成功,表达产物具有免疫原性。 相似文献
8.
【目的】研究重组人乳铁蛋白对断奶仔猪生长性能及血液生化指标的影响。【方法】选取 28 日
龄,体重均匀的断奶仔猪 180 头,试验设 6 个处理,每个处理 3 次重复,每个重复 10 头仔猪（公母各半）。A
处理饲喂基础日粮,作为对照;B 处理添加抗生素,在基础日粮中添加 1 g/kg 10% 的杆菌肽锌 +200 mg/kg 10%
的抗敌素;C、D、E、F 处理在基础日粮基础上分别添加 160、320、480、640 mg/kg 重组人乳铁蛋白。试验为
期 28 d。【结果】（1）试验末重与日均增重 B、C、D、E、F 处理均显著高于 A 处理,日均采食量 B、E 处理
显著高于 A 处理,料重比 B、D、E、F 处理显著低于 A 处理,腹泻指数 B、D、E、F 处理显著低于 A、C 处理。
（2）E 处理血清白蛋白、总蛋白含量显著高于 A 处理,B、E 处理血清尿素氮含量显著低于 A 处理。（3）血
清总抗氧化能力,C、D、E、F 处理显著高于 A 处理。D、F 处理血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于 A 处
理,E 处理血清总超氧化物歧化酶活性显著高于 A、B 处理,MDA 浓度 A 处理显著高于 C、D、E、F 处理。【结
论】断奶仔猪日粮中添加重组人乳铁蛋白能提高断奶仔猪生长性能、改善血清生化指标及提高抗氧化能力。
综合试验结果,重组人乳铁蛋白添加量为 480 mg/kg 的效果最好。 相似文献
9.
福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良早期生长板消减cDNA文库的构建 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减 cDNA文库。【方法】将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福美双100 mg?kg-1,2 d后继续饲以基础日粮,诱发肉鸡TD。应用抑制消减杂交技术(SSH)构建正反向消减cDNA文库,用PCR验证两个文库中克隆的插入片段,随机抽取100个阳性克隆测序,对所测序列同源性分析和功能预测。【结果】从两个文库共获得2 227个有效阳性克隆,插入片段大小主要分布在200—1 000bp之间;所测序列中有97条ESTs与GenBank中的鸡基因序列同源性达到99%,且非冗余度达到68.7%;此外,有3条ESTs未找到同源序列。这些基因具有构成细胞外基质,参与软骨内骨化和骨的重构,调节骨发育,行使信号转导、血管发生,参与电子传递及能量代谢等功能。【结论】成功构建了消减 cDNA文库,将为进一步点制cDNA芯片,筛选不同阶段的差异表达基因奠定了基础,也为肉鸡TD机理研究提供新线索。 相似文献
10.
《新疆农业科学》2017,(2)
【目的】克隆绵羊真核翻译起始因子eI F3h,构建原核表达载体,并诱导外源蛋白表达,检测、鉴定带有His标签的目的蛋白。【方法】根据Genbank中绵羊eI F3h基因CDS序列设计引物,PCR特异扩增DNA片段,酶切、连接至pE T28α(+)载体,将重组质粒转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)株中诱导eI F3h蛋白表达。采用SDS-PAGE电泳分析目的蛋白表达情况,利用Western blot技术检测、鉴定目的蛋白。【结果】正确、完整的克隆到绵羊eI F3h基因CDS区序列,片段全长1 059 bp。将重组质粒转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)株后,在37℃,1 mmol/L浓度的IPTG诱导3.5 h后获得以包涵体形式存在的目的蛋白,分子量大小约为40 kD。【结论】获得了完整、正解的绵羊eI F3h基因CDS区序列片段,构建了该基因的原核表达载体,成功诱导了绵羊eI F3h基因外源表达的目的蛋白,为绵羊eI F3h基因的后续研究提供了科学数据。 相似文献
11.
【目的】以金定鸭为研究对象,孵化前向蛋清内注射三碘甲腺原氨酸（triiodothyronine,T3）,检测鸭出雏前后体重、胸浅肌重、血清中甲状腺激素（thyroid hormones,THs）水平的变化,分析肝脏中I型脱碘酶（deiodinases I,D1）和Ⅲ型脱碘酶（deiodinasesⅢ,D3）mRNA表达、蛋白水平及酶活性的变化,探究外源性T3对鸭出雏前后生长发育及肝脏中脱碘酶表达的影响。【方法】将200枚金定鸭种蛋随机分为对照组和试验组,在孵化前从蛋的锐端往试验组种蛋蛋清内注射100 μL含250 ng T3的生理盐水,对照组注射不含T3的100 μL生理盐水,两组种蛋在相同条件下同期孵化。在27胚龄和7日龄时,记录鸭的体重和胸浅肌重,采用放射免疫分析法检测鸭血清中T3和四碘甲腺原氨酸（thyroxine,T4）水平,利用实时荧光定量PCR检测鸭肝脏中D1和D3的mRNA表达,利用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测鸭肝脏中D1和D3蛋白水平及酶活性。【结果】在27胚龄和7日龄时试验组鸭的体重（P = 0.035,0.044）和胸浅肌重（P = 0.027,0.037）均显著高于对照组;试验组血清中T3和T4水平在27胚龄时与对照组之间差异不显著（P > 0.05）,而7日龄时均显著低于对照组（P = 0.040,0.040）;试验组鸭肝脏中脱碘酶mRNA表达量仅D3在7日龄时显著低于对照组（P = 0.040）;在7日龄时试验组鸭肝脏中D1和D3的蛋白含量和酶活性亦均显著低于对照组（P = 0.017,0.045;P = 0.013,0.039）。鸭出雏前后的胸浅肌重与血清中T3水平呈强的负线性相关（r = -0.431,P = 0.025）;血清中T3水平与肝脏中D3的mRNA表达呈极显著正向相关（r = 0.778,P = 0.005）,血清中T4水平与D1和D3的蛋白水平和酶活性均呈正线性相关（r = 0.685,P = 0.020;r = 0.662,P = 0.026;r = 0.710,P = 0.014;r = 0.705,P = 0.015）。【结论】蛋清内注射T3促进了鸭出雏前后生长发育,同时伴随着出雏后循环中THs水平的降低,肝脏中D1和D3的表达发生下调。 相似文献
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【目的】本试验旨在研究低磷条件下VD3对磷吸收的调节作用。【方法】选择40只断奶后大白鼠(雄),随机分为0.2%(低磷组)和0.6%(正常磷组)两磷(总磷)水平组,每组5个重复,每重复4只大白鼠,试验期7d。试验前6d,每组每只大白鼠肌注VD3代谢抗干忧药物EHDP(二磷酸盐);宰前的12h,每组2只老鼠以600ng/kg.wt剂量注射VD3,为试验组;另2只不注射,为对照组。第7天早晨屠宰、取样。测定血清和骨组织中钙磷及小肠NaPi-Ⅱb载体蛋白mRNA表达量和磷的吸收等指标。【结果】(1)低磷水平对照组骨钙、骨磷分别比正常磷水平低3.33倍(P0.01)和3.03倍(P0.01)。两磷水平试验组VD3含量比对照组高3.08倍和2.32倍,差异极显著;(2)0.2%磷水平小肠各段和肾脏Na+/PiⅡb mRNA表达量试验组皆极显著高于对照组;(3)两磷水平试验组4个部位磷的吸收皆显著或极显著高于对照组,0.2%磷水平试验组较对照组磷吸收4个部位分别提高:51.76%、62.68%、57.79%、47.37%。0.6%磷水平组分别提高18.19%、39.22%、54.72%、39.83%。【结论】(1)低磷情况下,VD3是调节磷吸收的一个重要因素,补充VD3可提高NaPi-Ⅱb转运蛋白mRNA的表达和磷的吸收;(2)VD3对磷吸收的提高作用随着磷水平的增加而减弱。 相似文献
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【目的】 评定肉鸡对酵母水解物的表观代谢能、氮校正表观代谢能、回肠表观氨基酸消化率、标准回肠氨基酸消化率、全肠道表观氨基酸消化率,拟为酵母水解物在肉鸡饲粮中的广泛应用提供基础参数。【方法】 选择18 d、体重无差异的科宝白羽肉仔鸡160只,随机分成对照组和试验组,每组8个重复,每个重复10只试验鸡,公母各半。对照组饲喂以玉米淀粉、葡萄糖、纤维、大豆油配制的无氮日粮,试验组饲喂以酵母水解物为唯一粗蛋白质来源的半纯合日粮,对照组和试验组均添加0.5%的二氧化钛作为外源指示剂。试验期间自由采食,全收粪法收集试验鸡22—24 d粪便,并统计该期间肉鸡采食量,通过检测日粮以及粪便中总能、含氮量来计算酵母水解物表观代谢能值和氮校正表观代谢能值。粪便收集完后自由采食,26日龄麻醉剖解收集回肠后半段食靡,分别检测日粮、回肠食糜中氨基酸及二氧化钛含量,计算酵母水解物回肠表观氨基酸消化率、标准回肠氨基酸消化率、全肠道表观氨基酸消化率。【结果】 （1）酵母水解物总能值为18.19 MJ·kg -1,表观代谢能值为11.22 MJ·kg -1,氮校正表观代谢能为10.17 MJ·kg -1,其有效能值与普通豆粕相当。（2）酵母水解物粗蛋白质含量为41.7%,总氨基为36.97%,必需氨基酸与非必需氨基酸之比为44﹕56,与普通豆粕接近;酵母水解物肉鸡限制性氨基酸依次为Met、Met+Cys、Arg、Leu、Ile、Phe+Tyr、Val、His、Lys、Thr、Trp,与豆粕差异较大。（3）酵母水解物回肠表观氨基酸消化率、标准回肠氨基酸消化率、全肠道表观氨基酸消化率均大于70%,肉鸡可利用限制性氨基酸依次为Met、Met+Cys、Arg、Leu、Ile、Thr、Phe+Tyr、His、lys、Val、Trp,蛋氨酸、精氨酸为第一、第二限制性可利用氨基酸,亮氨酸、异亮氨酸为第三、第四限制性可利用氨基酸,苏氨酸可利用较差,为第五限制性可利用氨酸,酵母水解物限制性氨基酸与豆粕差异较大。【结论】 酵母水解物是一种蛋白饲料原料,其蛋白质含量、有效能值与豆粕相当,但其氨基酸组成及氨基酸可利用率与豆粕存在较大差异。因此,酵母水解物在肉鸡日粮中应用,需要考虑补充不同氨基酸或者搭配不同蛋白质饲料来平衡氨基酸的需要。 相似文献
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Wei ZHANG JinJun DAI XueHai YANG JinTao WEI MingXin CHEN JunPeng HU ShaoWen HUANG 《中国农业科学》2019,52(20):3685-3694
【Objective】 The purpose of this study was to evaluate the apparent metabolic energy, nitrogen-corrected apparent metabolic energy, ileal apparent amino acid digestibility, standard ileal amino acid digestibility and total intestinal apparent amino acid digestibility of yeast hydrolysate in broilers, so as to provide the reference for the wide application of yeast hydrolysate in broiler diets. 【Method】 A total of 160 Cobb white-feathered broilers at 18 days old with no difference in body weight were randomly divided into the control group and experimental group. There were 8 replicates in each group, and 10 chickens with half male and half female were in each replicate. The control group was fed a nitrogen-free diet consisting of corn starch, glucose, fiber and soybean oil, and the experimental group was fed a semi-homozygous diet using yeast hydrolysate as the sole crude protein source. Furthermore, the control group and the experimental group were fed with 0.5% titanium dioxide, respectively, as an exogenous indicator. During the whole experiment, free feeding was available for broilers, feces were collected on 22-24 days using total fecal collection method, and the feed intake of broilers was counted. Further, the apparent metabolic energy of yeast hydrolysate and nitrogen-corrected apparent metabolic energy were calculated by measuring the total energy and nitrogen content in both diets and feces of broilers. After26 days of experiment, the latter half of ileum was dissected under anesthesia, the chime was taken out, and the contents of amino acids and titanium dioxide in both diet and ileal chyme were measured to calculate the apparent amino acid digestibility, standard ileal amino acid digestibility and total intestinal apparent amino acid digestibility of yeast hydrolysate. 【Result】 (1) The total energy value of yeast hydrolysate was 18.19 MJ·kg -1, the apparent metabolic energy value was 11.22 MJ·kg -1, and the nitrogen-corrected apparent metabolic energy was 10.17 MJ·kg -1. Effective energy was equivalent to that of common soybean meal. (2) Crude protein content of yeast hydrolysate was 41.7%, and total amino acid was 36.97%. The ratio of essential amino acid to dispensable amino acid was 44:56, which was close to that of common soybean meal. The limiting amino acids of yeast hydrolysate were Met, Met+Cys, Arg, Leu, Ile, Phe+Tyr, Val, His, lys, Thr and Trp, which were different from soybean meal. (3) The ileal apparent amino acid digestibility, standard ileal amino acid digestibility and total intestinal apparent amino acid digestibility of yeast hydrolysate were all higher than 70%. The available limiting amino acids were Met, Met+Cys, Arg, Leu, Ile, Thr, Phe+Tyr, His, Lys, Val, and Trp. Methionine and arginine were the first and the second limiting amino acids, and leucine and isoleucine were the third and the fourth limiting amino acids, respectively. Threonine was poorly available, and was regarded as the fifth restrictive available amino acid. In addition, the limiting amino acids of yeast hydrolysate were quite different to soybean meal. 【Conclusion】 Yeast hydrolysate was a kind of protein feed material. Its protein content and effective energy value were similar to soybean meal, but its amino acid composition and availability were quite different to soybean meal. Therefore, in the application of yeast hydrolysate in broiler diet, it was necessary to consider the need of supplementing different amino acids or mixing different protein feeds to balance amino acids. 相似文献
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【目的】为获得禽戊型肝炎病毒（hepatitis E virus, HEV）中国分离株（CaHEV）ORF3基因重组蛋白,并对其抗原性进行分析。【方法】提取CaHEV总RNA,通过RT-PCR获得ORF3基因,构建重组质粒pFastBac-HTB-ORF3,转座DH10Bac感受态细胞,提取重组杆粒Bacmid-ORF3,转染sf9细胞,用SDS-PAGE、IFA和Western blot对重组蛋白表达进行鉴定。优化表达条件,将纯化的ORF3蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,用制备的多抗分别与截短表达的3段CaHEV ORF3蛋白进行Western blot和ELISA检测,分析ORF3蛋白的抗原表位区。【结果】SDS-PAGE、Western blot和IFA 结果表明CaHEV ORF3蛋白被成功表达且存在细胞内,昆虫细胞在接毒后4天表达量最高。将ORF3重组蛋白免疫小鼠,利用间接ELISA方法,对制备的多抗倍比稀释检测,效价达到104,Western blot 和ELISA分析表明ORF3蛋白C端74-88氨基酸处具有较强的抗原性。【结论】本试验用Bac-to-bac系统成功构建含有CaHEV ORF3基因的重组杆状病毒,并在昆虫细胞中得到表达,其主要抗原表位位于C端74-88氨基酸,为进一步研究禽HEV ORF3的蛋白结构和功能奠定了基础。 相似文献
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IGF-1调控RBM3表达抑制低温应激诱导牦牛卵丘细胞凋亡 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】探索动物机体遭受低温应激及细胞冷冻过程中胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor, IGF-1)与RNA结合基序蛋白3(RNA-binding motif protein 3, RBM3)之间的作用关系,及IGF-1参与哺乳动物细胞抑制低温损伤的机制。【方法】体外培养牦牛卵丘细胞,采用实时荧光定量 PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot, WB )和免疫荧光技术检测不同浓度（0、50、100、200 ng·mL -1）IGF-1和低温应激（30℃、25℃）对RBM3表达影响。卵丘细胞经最佳浓度IGF-1(100 ng·mL -1)和对照组(0 IGF-1)作用30 h后,低温（30℃、25℃）应激8 h,比较RBM3表达水平。评估在低温应激组、100 ng·mL -1 IGF-1处理组和100 ng·mL -1 IGF-1+RBM3抑制剂处理组,卵丘细胞25℃应激8 h后凋亡水平差异,并从基因和蛋白水平检测3组卵丘细胞中凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达水平。【结果】 (1) IGF-1作用卵丘细胞后RBM3基因和蛋白的表达水平显著上升 (P<0.05),其在100 ng·mL -1 IGF-1处理组最高,免疫荧光检测显示100和200 ng·mL -1 IGF-1处理组卵丘细胞胞核和细胞质均可检测到RBM3,而0和50 ng·mL -1处理组,RBM3仅定位在细胞质。(2) 卵丘细胞经受低温应激时,RBM3的表达水平显著增加,但其在30℃和25℃应激处理组差异不显著;100 ng·mL -1 IGF-1作用卵丘细胞30 h后,其再次接受25℃、8 h低温应激,卵丘细胞中RBM3的表达水平显著高于低温应激前未经IGF-1处理卵丘细胞中RBM3的表达水平,且该处理组卵丘细胞胞质和胞核均可检测到RBM3。(3) 25℃应激后,100 ng·mL -1 IGF-1处理组卵丘细胞的凋亡率为(15.94±2.03)%,显著低于其在未经IGF-1处理组和100 ng·mL -1 IGF-1+RBM3抑制剂处理组中卵丘细胞的凋亡率,两者分别为(25.86±1.09)%和(20.14±2.65)%,在100 ng·mL -1 IGF-1处理组Bcl-2的表达水平显著高于其余两个处理组(P<0.05),而Bax的表达水平显著低于其余两个处理组 (P<0.05)。【结论】RBM3参与牦牛卵丘细胞低温应激调控,IGF-1可调控其在低温应激中的表达水平,从而降低低温诱导的卵丘细胞凋亡。本研究为揭示IGF-1和RBM3参与动物机体或细胞免受低温损伤的分子机制提供了关键信息,为体细胞和生殖细胞冷冻技术的提高提供了理论依据。 相似文献
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[目的]研究日粮中添加富马酸对肉仔鸡体增重和屠宰性能的影响,确定肉鸡日粮中适宜的富马酸添加量.[方法]试验选用132只1日龄AA肉仔鸡随机分为3组,每组设置4重复,每个重复11只鸡,一组饲喂基础日粮作为对照组,另两组在基础日粮中添加0.25;和0.5;富马酸作为试验组,试验分两个阶段,前期0～21日龄,后期22～42日龄,每个阶段始末称重.[结果] 肉鸡日粮中添加0.25;、0.5;富马酸不同程度改善肉鸡各阶段的体增重、料肉比和成活率;但对肉鸡屠宰性能没有显著影响.[结论]综合指标来看,肉仔鸡日粮添加0.25;富马酸的作用效果最佳. 相似文献
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抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的制备及单链抗体基因的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体并构建其单链抗体（single chain variable fragment,ScFv）基因,为从PthA角度进一步研究柑橘溃疡病致病机理创造条件,并为构建单链抗体基因植物表达载体,尝试利用转基因和植物抗体技术创制抗溃疡病柑橘新种质奠定基础。【方法】利用PthA-NLS重组多肽免疫Balb/c小鼠,制备抗PthA-NLS多肽单克隆抗体,从分泌抗PthA-NLS多肽单克隆抗体的杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR和重叠延伸PCR（splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR）法构建其单链抗体基因,并克隆到pGEM-T载体和原核表达载体pET32a(+)中,重组原核表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白的表达。【结果】获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株1C8H1、2D12B6、3D8A10。成功构建了单链抗体基因ScFv,获得的ScFv基因大小约750 bp,其中重链可变区（VH）基因有360 bp,轻链可变区（VL）基因有342 bp,中间连接肽基因45 bp,经过IPTG诱导ScFv原核表达,获得了大小为44.5 kD的ScFv重组蛋白。【结论】试验获得了3株能稳定分泌抗PthA-NLS多肽的单克隆抗体杂交瘤细胞株,成功构建了ScFv基因,并实现了原核表达,为进一步探索PthA的致病机理和下一步利用抗体技术获得抗溃疡病柑橘种质的研究打下了基础。 相似文献