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1.
[目的]探讨渗透胁迫对藜幼苗叶片干旱诱导蛋白和可溶性蛋白的影响。[方法]用浓度5%、10%、20%聚乙二醇（PEG-6000）模拟干旱对藜幼苗进行胁迫处理,测定相关生理参数的变化。[结果]SDS-PAGE电泳结果显示,PEG胁迫可引起藜叶片产生110.3、103.9、22.7、19.2 kD 4种新的蛋白谱带,其中110.3、103.9 kD蛋白谱带的量随PEG浓度的增加而增加。随着胁迫时间的延长,浓度5%PEG胁迫下叶片中可溶性蛋白含量的变化表现为缓慢上升的趋势,浓度10%、20%PEG胁迫下叶片中可溶性蛋白含量的变化表现为先升后降的趋势。[结论]藜在渗透胁迫下,可溶性蛋白质增加,并有新的蛋白质合成。 相似文献
2.
镉诱导黄瓜金属硫蛋白的分离、纯化和鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]通过不同浓度Cd2+诱导黄瓜产生金属硫蛋白,探寻植物金属硫蛋白含量与Cd2+浓度关系。[方法]用不同浓度Cd2+诱导黄瓜幼叶组织产生金属硫蛋白,经Sephadex G-50凝胶过滤层析纯化后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定黄瓜金属硫蛋白的分子量。[结果]1 000 mg/LCd2+诱导黄瓜幼叶产生金属硫蛋白的产量最高,可达2.62μg/g。黄瓜金属硫蛋白的分子量为9.5 kD。[结论]黄瓜是一种对Cd2+敏感的植物。Cd2+诱导的金属硫蛋白含量与Cd2+浓度呈正相关。 相似文献
3.
不同浓度药物与不同天数鱼苗对吉富罗非鱼雌性诱导效果的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
[目的]研究不同浓度药物（苯甲酸雌二醇）与鱼苗天数对吉富罗非鱼雌性诱导效果的影响。[方法]将苯甲酸雌二醇设置6个浓度0、80、90、100、110、120μg/g,分别对卵黄囊刚吸收完的第0天、第5天、第10天吉富罗非鱼苗进行雌性诱导1个月,再饲养至体长16cm时,统计雌性率。[结果]不同天数鱼苗,在6个浓度药物作用下,组内雌性诱导效果均差异极显著（P〈0.01）。其中第0天鱼苗以120μg/g浓度药物,诱导效果最好,平均雌性率67.24%;第5天、第10天鱼苗分别以100、90μg/g浓度药物,诱导效果最好,平均雌性率为56.58%、24.83%。相同药物浓度下,第0天、第5天、第10天鱼苗间,雌性诱导效果差异极显著（P〈0.01）,其中以第0天诱导率最高。[结论]对第0天吉富罗非鱼苗,以浓度为120的药物进行雌性诱导,效果最好。 相似文献
4.
[目的]研究环氧丙烯酰胺（ GA）对体外培养的 R2C细胞生长及孕酮合成的影响。[方法]用0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L 浓度的GA作用于细胞48 h,MTT法获得 GA作用浓度的IC25,IC50及 IC75。用以上3种浓度的GA刺激细胞48 h,观察细胞形态。GA作用于细胞4 h后,通过彗星试验（Comet Assay）检测细胞 DNA的损伤程度;放射免疫法（ RIA）测定 GA刺激细胞24 h后的孕酮合成量。[结果] GA能抑制 R2C细胞活性,其 IC25、IC50、IC75分别为0.635、0.872及1.198 mmol/L;3种浓度的 GA能不同程度的影响细胞生长形态;作用4 h对 R2C细胞 DNA有损伤作用;各浓度组作用24 h后均能降低孕酮的合成量。[结论] GA能抑制 R2C细胞增长及孕酮合成能力。 相似文献
5.
《农业科学与技术》2015,(6)
[目的]研究环氧丙烯酰胺(GA)对体外培养的R2C细胞生长及孕酮合成的影响。[方法]用0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L浓度的GA作用于细胞48 h,MTT法获得GA作用浓度的IC25,IC50及IC75。用以上3种浓度的GA刺激细胞48 h,观察细胞形态。GA作用于细胞4 h后,通过彗星试验(Comet Assay)检测细胞DNA的损伤程度;放射免疫法(RIA)测定GA刺激细胞24 h后的孕酮合成量。[结果]GA能抑制R2C细胞活性,其IC25、IC50、IC75分别为0.635、0.872及1.198 mmol/L;3种浓度的GA能不同程度的影响细胞生长形态;作用4 h对R2C细胞DNA有损伤作用;各浓度组作用24 h后均能降低孕酮的合成量。[结论]GA能抑制R2C细胞增长及孕酮合成能力。 相似文献
6.
[目的]研究不同浓度NaCl处理对菠菜幼苗各组织器官的影响。[方法]分别用0、10、50 mmol/L NaCl溶液处理菠菜幼苗,测定各处理下菠菜幼苗根、茎、叶的鲜重、干重,抗氧化酶活性,可溶性蛋白和丙二醛（MDA）含量。[结果]菠菜根在低NaCl浓度（10 mmol/L）处理下已与对照组产生明显不同,表现为含水量下降、MDA含量明显升高、保护酶活性和可溶性蛋白含量下降的现象;菠菜叶在低NaCl浓度（10 mmol/L）处理下则表现为含水量、保护酶活性和可溶性蛋白含量的轻微下降,只有在高NaCl浓度（50 mmol/L）处理下才产生与根类似的反应;而一定浓度范围的NaCl对茎的生理指标影响均不大。[结论]菠菜不同组织器官对NaCl浓度的敏感程度不同,根反应最灵敏,叶的敏感性其次,而茎则只在高浓度NaCl下显现出生理指标的轻微下降。 相似文献
7.
[目的]对橡胶树不同品系橡胶粒子蛋白进行比较研究。[方法]以11个橡胶树品系为试材,采用不同离心速度分级分离方法,获得不同直径大小的纯化橡胶粒子,分别洗脱其膜蛋白并作电泳SDS-PAGE分析,并比较了高产品系和低产品系胶乳中的大橡胶粒子膜蛋白质谱。[结果]14.5、24.02、7.0、32.0、34.0和49.0 kD等蛋白条带的含量在不同直径大小的橡胶粒子上有明显变化,其中14.5 kD蛋白是橡胶延长因子,24.0 kD蛋白是小橡胶粒子蛋白。橡胶树各个品系具有各自独立的特征蛋白谱带,主要表现为在品系之间存在某些谱带表达量上的差异,其中27.0 kD橡胶粒子膜蛋白在耐乙稀利刺激的PR107中的丰度要显著高于不耐乙稀利刺激的海垦1号。[结论]橡胶粒子膜表面的一些蛋白条带可能跟橡胶粒子直径大小或发育相关。 相似文献
8.
[目的]研究猪初情期NPY-Y1 mRNA在下丘脑、垂体和卵巢的分布定位。[方法]选取60日龄、体重为20 kg和160日龄、体重为80 kg的苏姜母猪各3头,麻醉后,取出其下丘脑、垂体和卵巢,制成冰冻切片。采用原位杂交技术检测各样品中NPY-Y1 mRNA的表达定位,并用PBS液取代杂交液作阴性对照。[结果]不同发育阶段的下丘脑、垂体和卵巢中均检测到NPY-Y1 mRNA的阳性杂交信号,且初情期前期（60日龄）样品的阳性信号较初情期（160日龄）强。[结论]下丘脑-垂体-卵巢轴内分布有NPY-Y1 mRNA,其对雌性生殖过程具有调控作用。 相似文献
9.
高山红景天不同继代愈伤组织中红景天甙含量研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研究在离体培养条件下红景天甙合成的特征。[方法]以高山红景天的种子和试管苗的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,继代培养6次,测定每代愈伤组织中红景天甙的含量。[结果]以不同部位作为外植体诱导的愈伤组织中所含红景天甙的含量不同,茎诱导的愈伤组织中红景天甙含量最高,达6．2100mg／g,其次为种子诱导的愈伤组织,以叶为外植体诱导的愈伤组织中红景天甙含量最小。仅0．9968mg／g;红景天甙的含量在各继代培养的愈伤组织中的含量不同,在1～2代较低,3～5代最高,第6代明显下降。[结论]高山红景天中红景天甙含量与外植体和继代次数有关。 相似文献
10.
《南京农业大学学报》2021,(1)
[目的]本研究旨在探究Nesfatin-1在雌性大鼠生殖轴上的表达及其对初情期启动的影响。[方法]以雌性SD大鼠为研究对象,采用免疫组化技术对成年雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴(HPOA)上的Nesfatin-1/Nucb2蛋白进行定位;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法分析Nesfatin-1/Nucb2、Tac2、Gnrh mRNA在雌性大鼠的不同发育阶段(幼年期、初情期前、初情期和成年期)下丘脑转录水平的变化;对初情期前(25日龄)的雌性大鼠进行侧脑室注射Nesfatin-1,在阴门开启时取下丘脑、垂体、卵巢和血清,用RT-qPCR分析下丘脑中Gnrh、ERα,垂体中GnrhR、FSHβ、LHβ及卵巢中FSHR、LHR mRNA的转录水平变化,用ELISA检测血清E_2的水平。[结果]Nesfatin-1主要分布于弓状核(ARC)、室旁核(PVN)、下丘脑外侧区(LHA)、视上核(SON)、腺垂体、卵母细胞、黄体细胞、间质细胞、颗粒细胞。Nesfatin-1/Nucb2、Tac2、Gnrh mRNA在不同发育阶段大鼠下丘脑中表达水平均呈先上升后下降的趋势,且Nesfatin-1/Nucb2与Tac2 mRNA表达变化的趋势大体一致,呈正相关(r=0.940,P0.001),在初情期前表达水平最高(P0.01)。对25日龄雌性大鼠侧脑室注射Nesfatin-1可使初情期启动提前10 d左右,并显著增加卵巢重(P0.05)和血清中E_2浓度及生殖轴Gnrh、GnrhR、LHβ、LHR、FSHβ、ERα mRNA表达水平(P0.05),但不影响FSHR mRNA的表达。[结论]Nesfatin-1在HPOA轴均有表达,Nesfatin-1通过上调Gnrh及其受体等生殖相关基因的表达而促进大鼠初情期的启动。 相似文献
11.
甜菜夜蛾卵黄原蛋白多克隆抗体制备及其在不同发育时期蛋白表达 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】制备甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)卵黄原蛋白(vitellogenin,Vg)多克隆抗体,并检测甜菜夜蛾不同发育时期血淋巴中的Vg蛋白表达量变化,为进一步研究Vg转运与利用机制以及生物学功能打下基础。【方法】以羽化24 h的甜菜夜蛾雌成虫c DNA为模板,通过PCR扩增得到甜菜夜蛾Vg基因片段,其包含vitellogenin-N结构功能区。将Vg目的片段连入pMD-19T载体后进行测序,利用DNAMAN软件分析该基因序列的准确性及编码蛋白的特性。将测序正确的Vg基因片段通过Nde Ⅰ和Xba Ⅰ限制性内切酶连接到原核表达载体pCzn1。将重组表达载体pCzn1-Vg转入大肠杆菌Arctic Express,离心收集诱导表达的菌液,超声波破碎菌体沉淀,取上清液与沉淀进行SDS-PAGE检测,分析Vg重组蛋白的可溶性。在不同温度、不同浓度IPTG条件下诱导表达Vg重组蛋白,筛选最优表达条件。经Ni-NTA琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化得到了Vg重组蛋白,将该蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗Vg血清抗体。采用间接ELISA方法检测血清抗体的效价,并通过Western blot法检测甜菜夜蛾雌虫不同发育阶段血淋巴中Vg蛋白的表达差异。【结果】扩增所得Vg基因片段为2 091 bp,编码697个氨基酸,预测蛋白分子量为80.88 k D。通过大肠杆菌表达出的Vg重组蛋白相对分子量为80 k D,其大小与预期的Vg重组蛋白带大小相符合。其主要以包涵体形式表达,而在上清中表达量不明显。不同温度、不同浓度IPTG条件下诱导表达Vg重组蛋白的结果显示温度为25℃,IPTG浓度为0.6 mmol·L~(-1)时,Vg重组蛋白表达量最高。继续提高温度和IPTG浓度,对提高Vg重组蛋白的表达量无明显作用,且杂蛋白增多。新西兰白兔经4次免疫后,间接ELISA法检测表明,制备的兔抗Vg抗体具有较好的灵敏度,效价达到1﹕512 000。Western blot检测Vg蛋白在甜菜夜蛾不同发育阶段血淋巴中的表达,其杂交出的单一条带在180 k D左右。Vg蛋白在甜菜夜蛾雌蛹末期开始微弱表达。雌成虫羽化后血淋巴中Vg蛋白表达量先升高后降低,呈动态变化,到羽化48 h表达量最高,随后降低。【结论】纯化获得了Vg重组蛋白,并明确了最优表达条件(温度为25℃,IPTG浓度为0.6 mmol·L~(-1));制备了高效价的甜菜夜蛾Vg多克隆抗体,明确了甜菜夜蛾Vg蛋白的表达规律。 相似文献
12.
[目的]为火棘果的进一步开发提供理论依据。[方法]对人工种植的火棘施纯氮0(N0)、23 g/株(N23),P2O5 0(P0)、23 g/株(P23),K2O0(K0)、23 g/株(K23),研究N、P、K对火棘淀粉和可溶性蛋白含量的影响。[结果]不同施肥处理火棘淀粉和可溶性蛋白含量有差异。N0P23K0处理的淀粉含量最高,最低的是N23P23K0;N23P0K0处理的可溶性蛋白含量最高,最低的是N23P23K23。N23P23K0、N0P23K23和N23P0K0处理的蛋白图谱中比其他处理多了一条分子量为51.766 kD的蛋白带。火棘可溶性蛋白的分子量集中在50～63 kD,属于低分子量蛋白。[结论]N、P、K相互作用对火棘淀粉的合成与积累有一定的作用,对蛋白的合成有较大的影响。 相似文献
13.
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副猪嗜血杆菌外膜蛋白pilA基因的克隆与表达（摘要） 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]克隆和表达副猪嗜血杆菌外膜蛋白pilA基因。[方法]对已发表的HPS的pilA序列进行序列分析,合成引物,并以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS的pilA编码基因,获得目的基因片段;构建重组表达质粒,经IPTG诱导表达至大肠杆菌BI21（DE3）中,进行SDS-PAGE与Westernblot检测。[结果]表达的重组蛋白分子质量与预期的43kD一致。[结论]为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础。 相似文献
15.
花生活性肽的分子量分布及抗氧化活性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]研究花生活性肽的分子量分布及其与抗氧化活性的关系。[方法]采用截留分子量8.0、3.5、1.0 kD的透析袋对花生蛋白酶水解液进行分级分离,得到不同分子量范围的抗氧化肽,分别测定其清除自由基的能力,并与Tricine-SDS-PAGE技术相结合,考察花生蛋白酶解物的分子量分布。[结果]分子量范围在1.0 kD以下的多肽混合物含量分别为碱性蛋白酶和风味酶的总水解物的76.21%和83.42%,不同分子量范围的水解物均具有一定的清除自由基的能力,且随分子量的减小而增大,分子量范围在1.0 kD以下的组分对碱性蛋白酶和风味酶中的自由基的清除能力最强,分别为(87.41±0.66)%和(67.88±0.48)%。[结论]花生活性肽的抗氧化能力较强,尤其是分子量1.0 kD以下的短肽,具有较好的开发应用前景。 相似文献
16.
[目的]对壳聚糖防治金叶女贞褐斑病的效果进行了研究,为壳聚糖在防治金叶女贞褐斑病上的应用提供参考。[方法]采用病原菌的分离培养及人工感染的方法,对壳聚糖体外抑制金叶女贞褐斑病菌以及预防和治疗金叶女贞褐斑病进行了试验。[结果]3种分子量的壳聚糖体外抑菌效果都很好,其中分子量5万～6万效果最好,1万～2万次之,6000效果稍差;壳聚糖预防试验中,分子量5万～6万和1万～2万的预防效果都很好,在2.0%浓度时,可以达到免疫效果,分子量6000的效果较差,感病率51.37%～83.32%;治疗效果与治疗时间关系密切,24h施药时各分子量的2.0%浓度也达到免疫效果;36和48h施药时分子量1万～2万和5万～6万的高浓度治疗效果不错,其他均较差。[结论]分子量5万～6万、浓度1.5%～2.0%的壳聚糖预防和治疗金叶女贞褐斑病,能够达到很好效果,治疗时间以感菌后48h以内为好。 相似文献
17.
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。 相似文献