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piggyBac转座子具有识别位点特异性5'-TTAA-3',剪切和插入都不留下印迹,且高效转座。基于piggyBac转座子的特性,借助载体系统,已应用于哺乳动物转基因的研究。此外,piggyBac转座子还应用于基因诱导突变和基因治疗等领域。RNAi技术作为基因功能研究的一个工具,在应用于克服畜牧业中家畜的生产繁殖障碍等方面已取得一定研究成果。本文对piggyBac转座子的结构和特性、转座机制及影响因素和在动物中应用等方面进行总结,为RNAi技术借助piggyBac转座子用于哺乳动物转基因提供理论依据。 相似文献
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转座子(transposon)是存在于生物体基因组中的可移动的DNA片段,能够影响基因的结构和功能,广泛存在于生物演化过程中。转座子通过切离和粘贴机制介导外源基因的插入,是研究基因功能,制备转基因动物及基因治疗的优良载体。目前在哺乳动物中转座活性较高且研究最多的是"睡美人"转座子和piggyBac(PB)转座子。前者是目前临床前基因治疗研究中使用最为广泛的转座子,但存在剂量抑制效应和转座效率低等缺陷。而PB转座子可克服剂量抑制效应,且转座高效,转基因载量大,因此在哺乳动物中的应用越来越广泛。作者就PB转座子的作用机制、影响因素及在哺乳动物中的应用现状等进行报道。 相似文献
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人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)具有刺激细胞增殖的强大能力,是伤口愈合的关键因子.利用转基因技术,在家蚕后部丝腺利用丝素轻链基因(fibroin light chain,FibL)启动子驱动FibL-hEGF融合蛋白的表达.借助piggyBac转座子将FibL-hEGF融合基因导入到家蚕基因组,利用荧光检测总共获得8个转基因阳性卵圈,转基因阳性率为36.36%.PCR和反向PCR检测证明外源融合基因FibL-hEGF已被成功整合到家蚕基因组中,且随机插入到家蚕染色体的5个位点.Western blotting检测表明FibL-hEGF融合蛋白在家蚕后部丝腺中表达且成功分泌到蚕茧中,进一步证实了转基因家蚕的产生.本研究中利用piggyBac转座子介导的转基因技术成功获得了转基因家蚕并得到重组hEGF蚕丝,该蚕丝可用于制造伤口敷料. 相似文献
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昆虫转座子及在家蚕中的应用 总被引:2,自引:1,他引:1
概述了近年来广泛应用于昆虫的若干转座子及其基本构造和应用;着重讨论了piggyBac转座子的构造和转座机制及所作成的转基因昆虫种类及标记基因:同时列举了在家蚕转基因中的实例. 相似文献
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转基因表达的调控方法 总被引:4,自引:0,他引:4
转基因动物技术作为一种研究基因功能的技术体系 ,在生命科学研究领域有着广泛的应用前景。有效地使精确的遗传基因修饰在动物体内得到表达并实现世代间的传递是转基因技术的关键。近年来由于转座子、逆转录病毒的运用以及采用加入或去除某些基因的体细胞的克隆技术的发展 ,不同物种转基因的培育方法日趋简便。 Cre-L ox P系统越来越多地用于从基因组中去除特定的序列或靶向整合外源DNA。四环素等系统已被证实可获得确切的转基因表达。具有反式显性阴性效应的与 DNA形成三链螺旋的 RNA、反义 RNA(包括 :含 RNA干预和核酶的双链 RNA)以及蛋白质的表达均被证实可特异性地抑制宿主或病毒基因的表达。文章综述了转基因的概念、表达及调控转基因表达的常用方法 相似文献
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转基因技术是现代生物技术中一个重要的研究领域,是21世纪生物技术发展的热点之一,目前已有转基因猪、牛、羊等多种转基因动物问世.笔者对动物转基因研究方法以及其在家畜研究上的应用进行了综述.同时指出了转基因动物还存在的问题.最后就其未来发展前景进行了展望. 相似文献