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1.
不同剂量CpG序列对仔猪的免疫增强效果 总被引：7，自引：0，他引：7
以伪狂犬病毒为模式病毒,按照仔猪体质量分别将100、10、1μg/kg CpG序列同猪伪狂犬疫苗联合免疫接种仔猪,检测仔猪的体液及细胞免疫反应．试验结果表明：不同浓度的CpG序列均能显著提高仔猪的特异性抗体滴度、白细胞介素(IL)-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反应,证明CpG序列能显著增强仔猪对常规疫苗的免疫应答能力。 相似文献
2.
CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序(CpGmotif)为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA。随着对CpG基序的DNA和寡核苷酸免疫学特性的深入了解,人们对CpG特征结构在DNA免疫学中的重要作用有了逐步的认识,并在DNA疫苗、肿瘤免疫、病毒免疫等方面进行了临床应用。本文就CpG的特征结构、免疫活性、佐剂效应以及应用前景作一简要介绍。 相似文献
3.
CpG—DNA特征结构与其免疫刺激特性的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA。CpG基序(CpG motifs)是指一类以非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸为核心的寡聚脱氧核糖核苷酸,其碱基排列大多遵循以下规律:5’端为2个嘌呤,3’端为2个嘧啶。研究表明,这种序列可激活多种免疫效应细胞,其特征结构如CpG核心、侧翼序列、骨架长度等都对其免疫刺激特性有重要影响。本文就其特征结构与免疫刺激特性的关系作一介绍。 相似文献
4.
为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,将成功构建含CpG序列PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1- ORF5免疫SPF小鼠,检测小鼠的脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平.结果表明,构建的含CpG序列真核重组表达质粒CpG-pVAX1- ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的细胞免疫. 相似文献
5.
为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN），人工设计合成了9种未甲基化CpCr-ODN不同序列，分别作用于健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞，进行体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力，通过测得的OD490值，计算出淋巴细胞增殖指数（SI），筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示：9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激作用，其中CpG-ODN7对淋巴细胞增殖能力的增强效果最为明显（sI=3．5），CpG-ODN6对猪脾脏免疫细胞的刺激指数最大（SI=2．7）。为研制猪DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定了基础。 相似文献
6.
【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量（CD4+和CD8+）以及淋巴细胞增殖反应（MTT法）水平。【结果】本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫。【结论】CpG-ODN可提高PRRSV基因疫苗的免疫效果。 相似文献
7.
CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞免疫刺激作用的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),设计了9种未甲基化CpG-ODN不同序列,通过人工合成,分别作用于猪外周血淋巴细胞和脾细胞,进行健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力,通过测得的OD490值,计算出淋巴细胞增殖指数(SI),筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示:9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激效果,其中CpG-ODN6、CpG-ODN7刺激强度极显著。为研制DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定基础。 相似文献
8.
采用Percoll密度离心等技术,对异育银鲫的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行离体培养,经人工合成的CpG-DNA序列作用后,测定其对头肾巨噬细胞的氧、氮呼吸爆发活性和对外周血白细胞增殖的影响,从CpG-DNA核心CG两端的侧翼序列(种属）、核心CG的数量和位置等方面观察CpG-DNA基序对异育银鲫免疫细胞活性的影响。结果表明：1670较1826和2006具有更显著的增强巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和白细胞的增殖作用(P＜0.05); 1670-N与同浓度1670比较具有更强的提高白细胞的增殖能力;1670-D比同浓度的1670更能显著地促进白细胞增殖和巨噬细胞的氮呼吸爆发活性(P＜0.05）;1670-R对巨噬细胞氧、氮爆发活性及外周血白细胞的增殖无显著促进作用。结果证明了CpG-DNA可以通过促进巨噬细胞的氮氧爆发活性和增强外周血白细胞的增殖来提高机体的非特异性免疫功能,同时这种作用受到核心CG两端的侧翼序列、核心序列的位置数量及核心CG顺序的影响。 相似文献
9.
《南京农业大学学报》2017,(3)
[目的]验证多糖-硒化多糖复方的增强免疫活性,筛选出活性最强的复方,为研制新型免疫增强剂提供试验依据。[方法]在前期研究筛选出增强免疫活性较强的当归多糖(CAP)、党参多糖(CPP)、大蒜多糖(GP)、硒化当归多糖(sCAP)、硒化党参多糖(sCPP)和硒化大蒜多糖(s GP)的基础上,以其为组分药,按照多糖与硒化多糖质量比9∶1的比例组成CAP-sCPP、CAP-s GP、CPP-sCAP、CPP-s GP、GP-sCAP和GP-sCPP共6个复方,比较它们的体内/外增强免疫活性能力。体外试验,用MTT法测定6个复方对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响;体内试验,进一步比较了筛选出的3个复方对新城疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖,血清抗体效价,IL-2、IL-6和IFN-γ含量的影响。[结果]体外试验结果显示:单独或与植物血凝素(PHA)共同刺激时,6个复方均有不同程度的增强免疫活性,CAP-sCPP、GP-sCPP和CPP-sCAP的活性较强;体内试验结果显示:在免疫后7、14、21和28 d,GP-sCPP高剂量促进T淋巴细胞增殖的作用最强,血清抗体效价和IL-2、IL-6及IFN-γ含量均为最高,且均显著高于免疫对照组。[结论]GP-sCPP的增强免疫活性最强,可以考虑作为新型免疫增强剂的候选方。 相似文献
10.
蜂胶黄酮增强免疫作用的研究 总被引：6，自引：1，他引：6
以蜂胶黄酮(PF)为免疫增强剂,探讨其对免疫雏鸡血清抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖以及对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明:PF能显著提高雏鸡的血清抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖,且有一定的量效和时效关系;在体外,也能促进鸡脾脏T淋巴细胞增殖,以低浓度的效果较好。证明PF具有较强的增强免疫活性,是蜂胶中增强免疫作用的有效成分。 相似文献
11.
以猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)主要中和表位所在的糖蛋白GP5为模式抗原,采用肌肉注射、皮下注射和滴鼻免疫方式免疫6～8周龄ICR小鼠,利用间接ELISA检测血清抗体,MTT法检测淋巴细胞增殖.结果表明:三免后GP5弗氏佐剂乳化组小鼠血清抗体的水平最高,LTB+GP5免疫组的抗体水平显著高于单独GP5免疫组,肌肉注射免疫组的抗体水平明显高于皮下注射组,滴鼻免疫组没有检测到特异性血清抗体;各GP5免疫组均能不同程度地诱导脾脏B淋巴细胞增殖,其中GP5弗氏佐剂乳化组、LTB+GP5肌肉注射和LTB+GP5皮下注射组B淋巴细胞增殖显著,除了GP5弗氏佐剂乳化免疫组外,其他各免疫组均无明显的脾脏T淋巴细胞增殖反应. 相似文献
12.
黄芪多糖的提取及其对淋巴细胞增殖的影响 总被引：13，自引：0，他引：13
研究了黄芪多糖(APS)的体外免疫活性.淋巴细胞转化试验结果表明,APS对ConA诱导的T淋巴细胞增殖具有显著的促进作用. 相似文献
13.
CpG ODN是人工合成的具有非特异性免疫刺激的DNA序列,模拟细菌DNA在体内的应答过程,诱发细胞和体液免疫。CpG ODN作为新型免疫增强剂在兽医临床上的应用展现出了巨大的潜力,并在免疫学、药物学和药效学等领域备受关注。然而CpG ODN并不稳定且易被核酸酶酶解,其自身带负电荷,不易结合到细胞表面。因此,CpG ODN如何高效传递并能有效摄取成了新的挑战。纳米传递系统的研究使CpG ODN单独或协同疫苗免疫取得显著疗效,为改善CpG ODN在疫苗研究中的应用拓宽了思路。从CpG ODN纳米佐剂的作用机制、免疫活性、安全性及临床应用等方面进行综述,并对该领域未来的研究方向进行展望,为后续工作提供有益参考。 相似文献
14.
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硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的... 相似文献
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中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】研究两个中药成分复方（cCHMIs）的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。 相似文献
17.
通过改变生物活性,增加磁性提高生物免疫功能的研究,利用恒定磁场处理黄芪多糖和黄芪甙,进行鸡淋巴细胞转化试验.结果表明,在一定磁场处理条件下,采用恒磁场磁化植物多糖,可以进一步提高其免疫效用,对ConA诱导的鸡T淋巴细胞增殖和LPS诱导的鸡B淋巴细胞增殖有显著促进作用;T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖反应的最优磁化条件不同.磁化强度和时间与效果之间不存在明显的规律性关系,呈现"窗口效应".磁化条件必须是针对具体的对象,磁化的药物不同,使用的动物对象不同甚至同一动物的细胞不同,磁化的条件也不相同. 相似文献
18.
《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2019,(4)
经大孔吸附树脂分离纯化,从三七中得到三七总皂苷(PNS) S-3组分,研究其溶血性及体外免疫活性。采用红细胞溶血率测定溶血性,以体外小鼠T、B淋巴细胞增殖反应及IL-2诱生检测S-3的体外免疫活性。结果表明:S-3浓度在0.25 mg·mL~(-1)以下时无溶血性,在125μg·mL~(-1)以下时未表现出对脾淋巴细胞活力有抑制作用。S-3浓度为10μg·mL~(-1)时对刀豆蛋白A诱导的体外小鼠T淋巴细胞增殖有极显著促进作用,为100μg·mL~(-1)时则极显著抑制T淋巴细胞增殖反应;而PNS浓度在1～100μg·mL~(-1)范围内均呈现出显著促进作用, S-3浓度为10、100μg·mL~(-1)时极显著抑制LPS诱导的小鼠B淋巴细胞增殖作用,在此浓度下PNS显示出对B淋巴细胞增殖有显著或极显著促进作用。S-3浓度为25μg·mL~(-1)时极显著促进小鼠T淋巴细胞IL-2分泌,与相同浓度的PNS相比, S-3无更显著的促进作用。这一研究提示S-3具有较好的安全性,且在体外具有一定的细胞免疫活性和诱生细胞因子的能力,为从PNS中开发出安全、高效的动物免疫增强剂奠定了基础。 相似文献
19.
通过喷雾干燥法制备狂犬疫苗壳聚糖微球冻干粉,以微球吸附疫苗原液的吸附率为主要评价指标,运用均匀设计试验确定制备微球的最佳处方并对最佳处方得到的微球进行粒度分布、吸附率及免疫原性考查;用狂犬疫苗壳聚糖微球、狂犬疫苗脂质体、空白壳聚糖微球和生理盐水分别免疫小鼠,通过脾淋巴细胞增殖试验检测脾淋巴细胞增殖能力。结果表明:采用优化工艺制备的狂犬疫苗壳聚糖微球冻干粉复溶后于显微镜下观察呈圆形或近似球形,分散性好,粒度分布均匀,平均粒径为4.71μm,吸附率为74.21%;在小鼠免疫第7天时狂犬疫苗壳聚糖微球组和狂犬疫苗脂质体组产生的脾淋巴细胞增殖水平(SI值)无显著差异,分别与空白微球组和生理盐水组比较均有极显著差异,说明壳聚糖微球作为疫苗佐剂也可增强机体的细胞免疫。 相似文献
20.
[目的]研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理.[方法]选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-y.IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率.[结果]两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-Y、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果.[结论]两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂. 相似文献