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本文对鸭血清分别采用了硫酸钠法、辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法进行了鸭IgG的提取。提取后的鸭IgG样品用纯度和蛋白含量两个指标来衡量。用辛酸-硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.45mg/ml,纯度能达到用于免疫标记技术的要求,而且操作简单、价格低廉,适于从大批量样品中提纯鸭IgG;用硫酸钠法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.14mg/ml,相对较高,但纯度较低;用硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量、浓度都较低。 相似文献
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探索了一种从牛蒡子中提取、纯化牛蒡苷元的方法。将脱脂牛蒡子粗粉用含5%盐酸的50%乙醇溶液回流5 h,过滤后,药渣用50%乙醇溶液重复提取1 h,合并滤液后用5 mol/LNaOH溶液调节至中性,氯仿萃取2次,减压旋转蒸干后得牛蒡苷元粗品。粗品用硅胶柱层析纯化2次,获得类白色粉末,HPLC法进行分析。结果表明,牛蒡苷元样品保留时间与对照品保留时间一致,约为12.1 min,其相对百分含量为99.3%。牛蒡苷元总提取率为1.1%。该方法是一种有效的、简便的、能满足常规实验室设备要求的牛蒡苷元制备方法。 相似文献
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抗绿脓杆菌外毒素A酶标抗体的制备及其应用 总被引:2,自引:0,他引:2
从病死羊体内分离到绿脓杆菌并提取出外毒素A(PEA),再以此毒素作为抗原加油佐剂制成乳化抗原免疫家兔,获得高免血清并提取免疫球蛋白G(IgG);用过碘酸钠法将过氧化物酶标记抗PEA抗体(IgG),制成酶标抗体,经检验,酶标抗体结合物中的HRP浓度和Ab(IgG)浓度分别是0.0608 mg/mL和0.336 mg/mL;HRP/Ab(IgG)克分子比值为1.724%;酶(HRP)结合率是11.15%.利用该酶标抗体以ELISA夹心法对羊体内抗PEA抗体含量进行了检测,结果证明,用酶标抗体ELISA法比用平板凝集实验法检测的抗体效价平均高出二个滴度,表明制备的PEA酶标抗体具有灵敏度高、特异性强的优点. 相似文献
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《饲料工业》2016,(9)
试验旨在分离提取菜籽粕中的芥子碱,为进一步研究芥子碱的功能提供试验材料。将市售菜籽粕样品混合均匀后采用石油醚脱脂处理,脱脂样品按照提取时间4 h、提取温度85.5℃、甲醇乙醇体积比35、料液比126进行粗提,粗提浸膏用20%KSCN溶液盐析,再用40倍量(质量/体积)的95%热乙醇重结晶数次。根据颜色反应和显微镜检验结果判断结晶物的主要成分,采用紫外分光光度法测定浸膏和结晶物中芥子碱含量。结果表明:1菜籽粕残油含量为7.6%。2结晶物主要成分为芥子碱。3菜籽粕浸膏和结晶物的提取率分别为10.01%和2.54%,浸膏和结晶物中芥子碱(以芥子碱硫氰酸盐计)纯度分别为68.22%和91.49%,菜籽粕样品中芥子碱(以芥子碱硫氰酸盐计)的含量为2.32%。利用本研究的工艺,能够有效提取菜籽粕中的芥子碱。该技术提取工艺简单,对仪器设备要求不高,成本低廉,能够满足普通试验要求,值得推广应用。 相似文献
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高效液相色谱法同时测定乌骨鸡肌肉中的黑色素与肌苷酸 总被引:2,自引:0,他引:2
研究建立了同时测定乌骨鸡肌肉中黑色素与肌苷酸含量的高效液相色谱分析方法.鸡肉样品经酶解后,分离肌苷酸待测溶液与纯化黑色素粗品;黑色素粗品再在碱性条件下经过氧化氢氧化为2,3,5-三-羧酸吡咯(PTCA).肌苷酸待测溶液溶解PTCA成供试样品,在高效液相色谱仪中通过C18柱分离,紫外检测器检测波长270 nm,甲醇-磷酸/三乙胺缓冲液作为流动相等度洗脱.PTCA定量后以乌贼黑色素为对照品换算黑色素含量,外标法定量.结果表明:PTCA回收率为68.22%~75.21%,RSD值为6.83%~6.92%(n=6);肌苷酸回收率为79.26% ~88.26%,RSD值为1.92%~2.35%(n=6).黑色素、肌苷酸的检测限分别为10μg/g、100 μg/g.该方法灵敏、可靠,少量乌骨鸡样本即可实现同时、快速检测黑色素与肌苷酸含量. 相似文献
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间接抑制酶联免疫吸附法测定大豆凝集素方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
本研究用标准抗原、纯化抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG ,建立间接抑制酶联免疫吸附法 ,测定了几种不同品种生大豆和豆粕产品的凝集素含量。结果表明 ,间接抑制ELISA检测大豆制品中的凝集素含量变异系数小于 15 % ,样品回收率误差在 15 %以内 ;抑制率在 2 0 %~ 70 %范围内 ,曲线呈现良好的线性关系 ,提取液中的大豆凝集素检测下限为 10mg mL。因此本研究建立的间接抑制ELISA法检测生大豆和大豆加工产品中的凝集素含量是可行的 相似文献