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大肠杆菌新菌毛抗原的研究：I.菌毛抗原及其血凝活性测定 总被引：1，自引：1，他引：0
Ｎｏ．１和Ｎｏ．２两株大肠肝菌产生一种新菌毛抗原（暂定各Ｆ１９８７），并有性菌毛形成；菌毛直径３．６３６ｎｍ，性菌毛直径４．２ｎｍ。抗Ｄ－甘露糖血凝试验（ＭＲＨＡ）表明：本菌毛抗原具有独特的血凝谱、能稳定地凝集人（Ａ、Ｂ、ＡＢ、Ｏ）及貂的红血球，不凝集豚鼠、绵羊、山羊、马、牛、家兔、犬、貉子、小白鼠、鸽、鹌鹑等动物的红血球，戏猪红血球凝集不稳定；血凝作用仅能被相应菌毛因子血清所抑制，不被Ｋ８８、Ｋ 相似文献
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大肠杆菌的一种新型菌毛抗原（F1987） 总被引：6，自引：2，他引：4
从腹泻死亡貉病例中分离到２株（Ｎｏ１,Ｎｏ２）能产生一种新型菌毛抗原（暂定名：Ｆ１９８７）的大肠杆菌。该新型菌毛在菌体上生长致密、长短不一,直径为３．６３６ｎｍ,同时有性菌毛形成（直径４．２ｎｍ）。该菌毛在Ｍｉｎｃａ培养基上３７℃培养能良好表达,具有能稳定地凝集人及貂红细胞的特定血凝谱,血凝作用可被相应抗血清所抑制。菌毛蛋白质的分子量为１９１００,等电点为３．０,含有天门冬氨酸等１６种氨基酸。用凝集反应、沉淀反应、标记抗体技术等血清学反应能有效地检验该新型菌毛抗原。产生该新型菌毛抗原相应菌株的菌体抗原为Ｏ２３群,能产生肠毒素,人工感染能引起本动物貉发病。 相似文献
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本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原,并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果,四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ〉Ｓ〉Ｐ,而Ｔ检不出Ｋ９９;对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ〉Ｔ〉Ｐ〉Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果, 相似文献
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大肠杆菌K99和F41菌毛抗原的不同缓冲液热处理提取方法比较的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原，并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果，四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ＞Ｓ＞Ｐ，而Ｔ检不出Ｋ９９；对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ＞Ｔ＞Ｐ＞Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果，Ｆ４１纯化后大量上样做电泳时仍有微细的污染带出现，而且氯化镁沉淀后造成Ｆ４１严重损失。Ｋ９９和Ｆ４１纯化前后的各个样品经超声波处理、０．５％脱氧胆酸钠处理和未处理的原液与自家因子血清做琼扩试验以及Ｋ９９和Ｆ４１做交叉琼扩试验，均具有良好的特异性，而且以超声波处理后的样品做琼扩试验效果最佳。 相似文献
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仔猪腹泻大肠杆菌多价灭活苗的研究 总被引：6，自引：0，他引：6
根据广东省致仔猪腹泻的大肠杆菌血清型的调查结果，筛选出致病力强，免疫原性好的优势Ｏ抗原血清型菌株Ｃ４（Ｏ１１９），Ｄ３１（Ｏ６０）和Ｎ６（Ｏ７５）作为广东代谢菌株，与产粘附因子的菌株Ｃ８３９０１（中的Ｃ８３９１４Ｋ９９），Ｃ８３９１５（９８７Ｐ）制成多介灭菌苗，５批多价灭活菌苗对小鼠的平均保护率达９２．７％（３８／４１），９５０１批在兔体内粘附因子Ｋ８８，Ｋ９９，９８７Ｐ抗体效价可上升３ｌｏｇ２， 相似文献
6.
用单克隆杂交技术检测了纽约州６６６头牛及５７头猪分离的埃希氏大肠杆菌的肠毒素（ＳＴａＰ，ＳＴｂ，ＬＴ，ＳＬＴ－１及ＳＬＴ－Ⅱ）和粘着素（Ｋ８８，Ｋ９９，Ｆ４１，９８７Ｐ）。有３６７株牛源分离株（４５．２％）至少能与一个基因探针杂交，其中２２３株（３３．２％）与Ｆ４１、１１２株（１６．７％）与Ｋ９９、８２株（１２．２％）与９８７Ｐ，９６株（１４．３％）与ＳＴａＰ，７株（１．１％）与ＳＴｂ杂交。能与Ｋ 相似文献
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预防犊牛大肠杆菌腹泻双价基因工程菌毛苗应用的研究 总被引：3，自引：1，他引：2
用大肠杆菌Ｋ９９、Ｆ４１基因工程菌毛苗对１５００头怀孕母牛皮下注射菌毛苗５ｍｇ／头，局部和全身均无任何不良反应，未造成母牛流产、早产及犊牛畸形，无任何毒副作用。对菌毛苗主动免疫的怀孕母牛所产犊牛吃初乳后用强毒Ｋ９９、Ｆ４１大肠杆菌攻击，保护率达９０％，证明该菌毛苗具有较强的Ｋ９９和Ｆ４１免疫原性，可使犊牛获得确实的被动免疫。在５个牛场对１４８０头犊牛进行菌毛苗免疫效果观察，未免疫对照组腹泻发病率为 相似文献
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仔猪腹泻大肠杆菌多价灭活苗的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
根据广东省致仔猪腹泻的大肠杆菌血清型的调查结果，筛选出致病力强、免疫原性好的优势Ｏ抗原血清型菌株Ｃ４（Ｏ１１９）、Ｄ３１（Ｏ６０）和Ｎ６（Ｏ７５）作为广东代表菌株，与产粘附因子的菌株Ｃ８３９０１（Ｋ８８）、Ｃ８３９１４（Ｋ９９）、Ｃ８３９１５（９８７Ｐ）制成多价灭活菌苗。５批多价灭活菌苗对小鼠的平均保护率达９２．７％（３８／４１）。９５０１批在兔体内粘附因子Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ抗体效价可上升３ｌｏｇ２，母猪免疫一次后血清中粘附因子抗体效价上升０．８～１ｌｏｇ２。免疫比对照母猪所产的仔猪腹泻发病率显著降低（ｐ＜０．０１）；死亡率也降低。断乳均重增加０．３８Ｋｇ。 相似文献
9.
仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株K88菌毛研究 总被引：12，自引：0，他引：12
通过玻片凝集试验、抗Ｄ－甘露糖微量血凝试验（ＭＲＭＨ）、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫印迹、质粒ＤＮ民泳等。分析了仔猪腹泻源大砀杆菌贵州株（４０９－１１）所产Ｋ８８菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附特性、菌毛蛋白单位分子量,并对其Ｋ８８基因进行了初步定位。结果表明：其所产Ｋ８８菌毛的血凝谱能凝集豚鼠和允许红细胞;能介导细菌粘会于仔猪离体肠上皮细胞,这种粘附作用 相似文献
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用大肠杆菌K99和F41菌毛抗原检测牛血清抗体的琼脂扩散试验的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
用含２ｍｏｌ／Ｌ尿素的磷酸盐缓冲液以热处理方法提取的Ｋ９９和Ｆ４１菌毛作为抗原,对琼脂扩散试验方法进行研究。结果表明本试验方法简便,特异性强,敏感性高,可用于血清抗体检测;所制备的抗原稳定、重复性好。 相似文献
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从不同发病地区患鸡传染性腺胃病的鸡中分离出４株病毒，选择Ｈ９５和Ｓ９６两株流行株，采用胰蛋白酶和卵磷脂酶Ｃ处理，在不同条件下测定其血凝性，试验表明：用２％胰蛋白酶３７℃处理０．５小时后的病毒株对鸡的红细胞凝集价高达２１４，这种血凝性不能被抗Ｈ９５毒株的单克隆抗体、鼠、鸡特异性抗血清所抑制。经４单位／ｍｌ卵磷脂酶Ｃ３７℃处理３小时后血凝价可达２９，而能被相应的特异性单克隆抗体、鼠、鸡抗血清所抑制。 相似文献
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猪肠毒性大肠杆菌（ETEC）病抗病育种研究 总被引：5，自引：0，他引：5
猪肠毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）是仔猪黄痢、白痢等腹泻疾病的主要病原菌，发病率和死亡率分别占总发病率和死亡率的５６．２％和２４．７％。按其特异菌毛产生的粘附素不同有Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ等多种类型，Ｋ８８又可分为ａｂ、ａｃ、ａｄ血清型，现已知ＥＴＥＣ Ｋ８８能否致病，取决于宿主小肠粘膜上皮细胞刷状缘有无受体，并受制于１对等位基因，有受体（敏感型）为显性（Ｓ），无受体（抗性型）为隐性（ｓ）。该痊点位于 相似文献
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鸡腺胃型IBV分离株血凝特性初探 总被引：6，自引：0，他引：6
从不同发病地区患鸡传染性腺胃病的鸡中分离出４株病毒，选择Ｈ９５和Ｓ９６两株流行株，采用胰蛋白酶和卵磷脂酶Ｃ处理，在不同条件下测定其血凝性，试验表明：用２％胰蛋白酶３７℃处理０．５小时后的病毒株对鸡的红细胞凝集价高达２＾１４，这种血凝性不能被抗Ｈ９５毒株的单克隆抗体、鼠、鸡特异性抗血清所抑制。经４单位／ｍｌ卵磷脂酶Ｃ３７℃处理３小时后血凝价可达２＾９，而能被相应的特异性单克隆抗体、鼠、鸡抗血清所抑制 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究 总被引：10，自引：0，他引：10
本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。 相似文献
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应用ＬＢ培养基３７℃,１５０ｒ／ｍｉｎ振荡培养１７小时,室温４００ｒ／ｍｉｎ,离心３０分钟,收集沉淀菌体,用ＰＢＳ离心洗涤一次,沉淀物重悬于适量的ＰＢＳ中,三等分离体悬浮液分别用超声波,冻融,热休克等方面处理后,室温８０００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟,取上清液加入饱和硫酸铵４℃过夜,沉淀蛋白经透析,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０过柱纯化,应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,凝胶扫描测定Ｋ８８、Ｋ９９蛋白的分子量及浓度, 相似文献
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本试验对Ｍ４１，Ｈ５２，Ｑ１－７６，Ｊ，Ｆ，ＴＫ６等６种传染性支气管炎毒株的血凝性进行了研究。处理后的Ｍ４１及Ｑ１－７６株，呈现较强的血凝性，而其他４种霉株峨无或血凝性很低。ＭＰ１与Ｑ１－７６株之间无交叉反应性。本地毒株ＴＫ６诱导地抗体，能够抑制ＭＰ１的血凝性，但与Ｑ１－７６无反应。 相似文献
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仔猪黄痢、白痢病原调查报告 总被引：1，自引：0，他引：1
对深圳某猪场，通过实验室手段进行仔猪黄痢、白痢病原调查，结果显示：除含有致病性大肠杆菌Ｋ＿（８８）．（３４．３％）外，尚含有Ｋ＿（９９）（８．６％）、Ｆ＿（４１）（２７．３％）．以及轮状病毒（４０％），同时还分离出一株等孢子球虫，证实本地区仔猪黄痢、白痢病原复杂。 相似文献
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嗜水气单胞菌粘附特性的研究 总被引：7，自引：1，他引：6
不同来源的６株嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）对１０种不同红细胞的血凝试验表明，Ｊ－１株能凝集所有的１０种红细胞，而与其他菌株的血凝谱有所不同。血凝图式有２种：人、鸡、麻雀的红细胞凝集快，呈大小不等的絮状；而鲫鱼、绵羊、猪、小鼠、兔、鸭、犬的红细胞凝集慢，且呈均匀颗粒状。这两种血凝均能被Ｄ－甘露糖抑制，但不能被Ｊ－１株Ｒ菌毛抑制。组织粘附试验显示，Ｊ－１株能粘附小鼠和鲫鱼的肠组织和肠绒毛。将提纯的Ｒ菌毛预处理肠组织，或用Ｄ－甘露糖或木瓜蛋白酶消化的Ｒ菌毛抗血清Ｆａｂ片段预处理菌体，都不能抑制上述的粘附作用。Ｊ－１株对ＨＥｐ－２细胞显示强粘附，菌体随机粘附在细胞上，有少数侵入细胞浆内。其余５株菌的粘附特性与Ｊ－１株不尽相同。所有６株菌对草鱼肠组织及肠绒毛、ＥＰＣ细胞（鲤鱼乳头状上皮瘤细胞系）均无粘附性。 相似文献
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禽病原性大肠杆菌I型菌毛单克隆抗体的研制及其对分离株的检测 总被引：1，自引：0，他引：1
从禽病原性大肠杆菌分离株ＴＫ３（Ｏ１）提取Ｉ型菌毛免疫ＢＡＩＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得４株能稳定分泌针对Ｉ型菌毛的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为ａＢ６、ｂＧ５、ｃＦ３和ｃＧ３。单克隆阻断甘露糖敏血凝试验,免疫胶体金和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ试验证明,单抗是Ｉ型菌毛特异的。这些单抗培养上清及腹水的ＥＬＩＳＡ效价为分别为１０＾－２～１０＾－３和１０＾－５～１０＾－６;腹水的平 相似文献