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栎叶枇杷原生质体的分离与培养 总被引：4，自引：0，他引：4
初步探讨了栎叶枇杷胚培养获得愈伤组织，人胚愈伤组织分离原生质体以及原生质体的早期培养方法，着重研究了酶混合液对栎叶枇杷原生质体分离和培养的效应。结果表明：以１％纤维素酶和２％果胶酶配合使用效果最好，得率和成活率分别为（９．８±０．０３）×１０＾６和９６．０％。作为酶混合液中渗透压稳定剂的甘露醇浓度则以１１％－１２％为好，从合适的酶混合液中得到的原生质体培养已获得愈伤组织。 相似文献
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枇杷原生质体培养形成愈伤组织 总被引：4，自引：3，他引：4
林顺权 《福建农林大学学报(自然科学版)》1991,(2)
把茂木、尾早生、解放钟、长红等枇杷品种的心脏形至完全成熟的胚,离体培养于分别附加一定浓度植物生长调节剂的B_5,MS和改良MS(大量元素减半,简称mMS)的培养基中,诱导产生胚性愈伤组织.这种愈伤组织在添加低浓度的2,4-D的mMS培养基上产生体细胞胚.以初代和继代培养若干代的愈伤组织作为分离原生质体的材料来源.酶解液的主要成分为纤维素酶、离析酶和崩溃酶,附加0.6 mol/L的山梨醇作为渗透压稳定剂,原生质体的最高得率为1.65±0.6×10~7/g.原生质体经液体浅层培养或半固体培养4—5d后,观察到第1次细胞分裂,2周后形成小细胞团.培养2个月后,获得了愈伤组织. 相似文献
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枣树原生质体分离条件的研究 总被引：10，自引：0，他引：10
枣树原生质体分离研究是其原生质体培养与融合、外源遗传物质转化等研究的基础工作。用胚性悬浮培养细胞、细粒状胚性愈伤组织、未细切愈伤组织和已细切愈伤组织等４种材料进行原生质体分离。结果表明,枣树胚性悬浮培养细胞是最佳起邕材料,用浓度为１０ｇ／Ｌ纤维素酶＋１ｇ／Ｌ离析酶＋ＣＰＷ盐（１３２０ｍｇ／Ｌ ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ和１００ｍｇ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４·Ｈ２Ｏ组成的混合液）＋０．７ｍｏｌ／Ｌ甘露醇组成的混合 相似文献
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对福农８６／１７、桂糖１１号和粤糖５７／４２３等３个甘蔗基因型的胚性愈伤组织进行了原生质体分离，研究了聚乙二醇（ＰＥＧ）预处理对福农８６／１７胚性愈伤组织原生质体分离的影响．结果表明，桂糖１１号的原生质体活力较高，但得率较低，福农８６／１７的原生质体活力和得率都较低，粤糖５７／４２３的原生质体得率较高，但活力也较低．ＰＥＧ预处理可以提高胚性愈伤组织分离的原生质体活力．一定质量浓度和一定时间的ＰＥＧ预处理能够成倍地提高原生质体的得率，以质量浓度为０．５０ｍｇ·Ｌ－１的ＰＥＧ预处理１５ｍｉｎ，甘蔗福农８６／１７每克胚性愈伤组织可分离获得１×１０６个有活力的原生质体 相似文献
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在大麦花培品系“Ａ１６”的花粉胚继代培养过程中获得一种适合游离原生质体的松散型胚性愈作组织，其直接游离原生南体的产量可达１－２×１０＾７／ｇｆｗ。在改良ｋａｏ８Ｐ培养基中原生质体植板率为０．５％－１．５％。原生质体愈伤组织可分化产生完整的绿苗。对原生质体产生的多细胞结构类型及其发育趋势作了描述和分析。 相似文献
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新疆长绒棉胚性悬浮细胞原生质体的培养及再生 总被引：1，自引：0，他引：1
在进行新疆长绒棉胚性细胞原生质体培养期间，比较酶液中不同甘露醇浓度，悬浮细胞不同继代时间及不同培养方法，不同包埋培养基，不同滴加液对原生质体培养的影响。发现琼脂糖珠包埋培养最适宜其培养，获得了原生质体的再生，植板率为２９．８４％（以第八天计），进一步培养，获得再生愈伤组织，愈伤是胚性愈伤。 相似文献
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[目的]探究罗布麻愈伤组织原生质体的分离培养及其影响因素,[方法]以罗布麻无菌苗子叶与下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究MS培养基附加不同激素组合对原生质体分离培养的影响以及愈伤组织继代培养、不同浓度纤维素酶与离析酶组合、DPD和MS等4种培养基对原生质体产量的影响。[结果]激素组合中以6-BA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L组合获得最高愈伤组织诱导率,达100％;用固体培养基进行继代培齐的愈伤组织的原生质体产量高于液体培养基,尤其以从继代1次愈伤组织收集的原生质体最为适宜;纤维素酶0．30％＋离析酶0．30％组合获得的原生质体产量最高,且细胞碎片较少;DPD培养基的原生质体较其他培养基的分裂得早,MS培养基的培幂效果最差,[结论]该研究为罗布麻遗传转化、突变体筛选及体细胞融合育种提供了技术途径： 相似文献
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黄瓜原生质体培养再生胚状体和植株研究 总被引：12，自引：0，他引：12
】对黄瓜原生质体分离和再生条件的研究表明,７日龄初展黄瓜子叶和１５～１７日的真叶,在１％纤维素酶、０．５％离析酶和０．２５～０．３０ｍｏｌ／Ｌ甘露醇混合酶液中,均分离出大量原生质体,转入附加１ｍｇ／ＬＢＡ和０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的改良ＫＭ培养基（去除ＮＨ４ＮＯ３）中浅层液体培养,形成微愈伤组织。由成都二早子黄瓜真叶原生质体愈伤组织培养的胚状体和子叶原生质体愈伤组织诱导的不定芽,皆培育成小植株。 相似文献
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龙眼胚性细胞系的建立与保持 总被引：34，自引：6，他引：34
本研究比较了生长调节剂、ＡｇＮＯ３、活性炭、碳源、基本培养基、光照度、胚发育时期以及基因型等对龙眼幼胚培养诱导愈伤组织的影响。从幼胚培养中，诱导出多种类型的愈伤组织，经继代培养并筛选，获得松散、生长旺盛、胚胎发生能力极强的松散型胚性愈伤组织。该类型胚性愈伤组织适宜建立悬浮细胞系和分离原生质体，并且转移至含体积分数为０．０５椰子汁的ＭＳ固体培养基上，形成大量的胚状体。采用在附加１ｍｇ·Ｌ＾－１２，４ 相似文献
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中国李原生质体培养及植株再生 总被引：11，自引：0，他引：11
对中国李原生质体分离和培养的有关因素进行了研究。以悬浮培养物为材料,在适宜的酶解液中酶解１２ｈ,原生质体产量和活力分别达到３×１０＾７个／ｇ和９５％。以改良ＭＳ为基本培养基,在培养初期加２,４－Ｄ１．０ｍｇ／＝Ｌ,ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ,培养３０ｄ后将ＢＡ调至１．０ｍｇ／Ｌ,以０．５５ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖调节渗透压,在２×１０＾５个／Ｌ的植板密度下液体浅层培养５０ｄ后形成了微愈伤组织。 相似文献
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枇杷原生质体培养再生植株（简报）林顺权，陈振光（福建农业大学园艺系，福州３５０００２）关键词普通枇杷；原生质体；再生植株中国分类号５６６７．３以普通批把（Ｅｒｉｏｂｏｔｐｅ声ｐｏｎｉｃａＬｉｎｄｌ．）的球形胚、鱼雷形胚和子叶形胚作为胚培养接种材料诱导... 相似文献
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花椒原生质体分离与培养研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以花椒试管苗叶片、愈伤组织和悬浮细胞为试验材料,通过单因素试验研究酶液浓度、渗透压调节剂浓度对花椒原生质体分离的影响,并以花椒试管苗叶片分离出的原生质体为试验材料,研究培养基种类、培养密度、不同激素配比对花椒原生质体培养的影响。结果表明,酶液浓度、渗透压调节剂浓度对花椒原生质体分离有显著影响。在适宜条件下,用甘露醇作花椒原生质体分离的渗透压调节剂,浓度在0.6~0.7 mol·L-1时分离效果最佳。以花椒叶片为原生质体分离材料的最佳酶液组成为CPW-0.7 mol·L-1甘露醇+1.0%(w/v)纤维素酶R-10+1.5%(w/v)果胶酶,酶解时间为10 h,纯化后的原生质体产量和活力分别可达82.36×105 个·g-1和72.74%。以愈伤组织和悬浮细胞为分离材料的最佳酶液组成均为CPW-0.6 mol·L-1甘露醇+2.0%(w/v)纤维素酶R-10+0.5%(w/v)果胶酶,酶解12~14 h,纯化后的原生质体产量及活力分别为31.26×105 个·g-1、59.15%和53.87×105 个·g-1、63.92%。以花椒试管苗叶片为原生质体分离材料,分离纯化后的花椒原生质体在无激素的WPM培养基中,培养密度为1×105个·mL-1,培养第3天原生质体第1次分裂,2周分裂3~5次,原生质体28 d后形成微细胞团,培养60 d后可形成2 mm左右的愈伤组织。 相似文献
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影响草地早熟禾原生质体生长和分裂的生理生化因素分析 总被引：2，自引：1，他引：1
以草地早熟禾‘午夜Ⅱ号’、‘新格莱德’和‘橄榄球Ⅱ号’3个品种继代20次的愈伤组织为材料,进行原生质体培养,测定愈伤组织可溶性蛋白质含量、氨基酸含量、SOD和POX酶活性.结果表明:3个草地早熟禾品种原生质体经培养15 d后,原生质体分裂率分别为‘新格莱德’50.1％、‘午夜Ⅱ号’42.8％、‘橄榄球Ⅱ号’29.4％.... 相似文献
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果树原生质体培养及细胞融合的研究进展 总被引：2，自引：0，他引：2
本文综述了近年来世界各国果树原生质体培养和细胞融合的研究进展。指出以叶片、愈伤组织、悬浮细胞作为分离原生质体的材料较适宜。列举了分离原生质体的条件和已培养成完整植株的若干树种的培养步骤和条件,概述了原生质体的培养方法及关系到培养能否成功的一些因素。最后,介绍了引人注目的柑桔体细胞杂交和细胞质杂种的研究动态。 相似文献
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马铃薯原生质体培养体系改良 总被引：7，自引：1，他引：7
试验以马铃薯试管苗叶片为原生质体来源，通过研究材料预处理方法对原生质体产量和质量的影响，培养方式及培养基中糖醇与细胞分裂的愈伤组织形成的关系，优化并建立了高效稳定的原生质体培养体系，获得了2个双单倍体系的叶肉原生质体再生植株。 相似文献
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成雄鹰 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1991,(1)
在改良MS培养基上从5个大豆品种成熟种子来源的幼苗未展开叶片上诱导出愈伤组织,利用2个月月龄的这些愈伤组织在摇床上建立了细胞悬浮培养系,细胞悬浮培养系每1至2周转培1次,并用于原生质体分离,转培后3到5天的细胞经酶解后原生质体的产量最高,纯化后的原生质体用3种方法进行培养,即液体培养法、琼脂包埋法和琼脂底层法,在琼脂底层法中,培养皿底层先浇上无甘露醇的琼脂培养基,而原生质体则悬浮在2到4毫升含0.45 mol甘露醇的培养基中,3种方法以琼脂底层法最佳,原生质体在培养后2到3天内能见到第1次细胞分裂,在适当的条件下1周内高达80％的原生质体发生分裂,置板频率一般在40％到60％之间,5个供试品种中4个的原生质体愈伤组织在固体和液体培养中出现体细胞胚胎发生,在液体培养条件下得到了大量子叶和胚根发育良好的体细胞胚,但由于这些胚未进一步萌发,故未能得到完整的再生植株。 相似文献
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影响植物原生质体分裂的生理生化因素 总被引：3，自引：2，他引：1
以烟草试管苗幼叶,美味猕猴桃、毛花猕猴桃子叶愈伤组织和玉米幼叶为材料,进行了原生质体培养和一些生理生化指标的测定,结果表明,美味猕猴桃及毛花猕猴桃子叶愈伤组织原生质体在培养２０ｄ后,原生质体再生细胞分裂率为１７．８％和２０．５％,前者可继续分裂形成小细胞团,而后者仅分裂１～２次。对照材料烟草叶肉原生质体培养２周后,再生细胞分裂率高达７０．１％。玉米幼叶原生质体极难分裂。烟草叶中ＰＯＸ、ＳＯＤ活性以及可溶性蛋白质和氨基酸含量均高于其它３种材料。因此较低水平的ＰＯＸ、ＳＯＤ活性以及可溶性蛋白质和氨基酸含量是两种猕猴桃子叶愈伤组织原生质体分裂率低和玉米幼叶难以培养成功的影响因子。 相似文献
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以苹果试管苗叶片为原生质体分离材料,对影响原生质体分离和培养的因素进行了研究.结果表明适合叶片酶解的酶液组成是Cellulase-Onzuka R-10 0.8%+Pectinase 0.5%+PVP 1%+甘露醇0.65 mol/L+MES0.1%;以改良MT+BA 1.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+甘露醇0.65 mol/L+Vc 5.0 mg/L+Glu 500 mg/L+CH 100 mg/L+ME 500 mg/L+Arg 50 mg/L为培养基对原生质体进行培养,固液双层培养效果较好,最适培养密度为1×105个/ml,培养1～2天原生质体变形,3～4天第一次分裂,2周分裂3～5次.平邑甜茶原生质体一个月后形成微细胞团,两个半月形成肉眼可见的微愈伤组织.鲁加5号和M7均只形成7～10个细胞的细胞团,嘎拉未见细胞分裂. 相似文献
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橡胶树热研8—79原生质体培养再生植株 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础。【方法】以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率。【结果】酶组合为纤维素酶1.50%＋果胶酶0.15%＋离析酶0.50%、酶解时间为12 h时,继代培养第5 d的胚性悬浮细胞达最高产量（3.6 ×107个/mL PCV）;用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5 ×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%。原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株。【结论】通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系。 相似文献