共查询到10条相似文献，搜索用时 15 毫秒
1.
[目的]研究拟南芥甲基化转移酶基因AtMET 1在银腺杨84K(Populus alba×P. glandulosa ‘84K’)中的诱导表达特性,为建立杨树甲基化诱导变异体系、进而实现杨树品种改良等奠定基础。[方法]以白杨派优良品种84K杨的无菌苗叶片为受体材料,采用农杆菌介导法将化学诱导启动子与AtMET1基因导入84K杨基因组中;经潮霉素筛选获得抗性植株,通过常规PCR检测、DNA测序等方法对抗性植株进行鉴定。通过化学诱导剂17-β-雌二醇对随机挑选的1个转基因株系离体叶片进行诱导处理,处理时间为0、3、6、12、24、48、96、144 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源基因AtMET1表达量变化。[结果]本研究共获得了潮霉素抗性芽648个,经生根筛选获得18株抗性植株,经分子检测证实全部为转基因植株,分别标号为AM-1～18#。qRT-PCR结果显示:化学诱导剂17-β-雌二醇处理3 h时,目的基因AtMET1的表达量即达到最大值,随后在处理6 h时表达量下降,处理12 h时有所回升,处理24 h后表达量降低至不足12 h时的一半。[结论]化学诱导剂17-β-雌二醇能迅速有效地调控转基因杨树中AtMET1基因的表达,为进一步研究MET1基因在杨树基因组甲基化调控方面的作用机制奠定基础,也为今后杨树化学诱导表达研究及品种改良提供新思路、新方法。 相似文献
2.
利用同源序列克隆技术,分离了三倍体黑杨中4类(MET、CMT、DRM、DNMT2)8个特异甲基转移酶片段,其中,5个片段与二倍体同源性达到100%,3个片段发生了剪切变化。通过实时定量PCR技术检测8个甲基转移酶在不同倍性、不同部位、不同生长时期间表达模式的差异,通过对5个不同部位基因表达的检测,表明不同倍性黑杨在相同的部位可能由不同种类的甲基转移酶参与主要的甲基化调控。通过分析植株从分化早期的茎尖到分化晚期的叶和茎整个生长过程中基因表达的情况,发现随着时间的推移,MET家族 (PnD1和PnD2) 基因可能是拮抗调节,CMT (PnD3和PnD4) 家族基因可能是协同调节;而隶属于DNMT2家族的PnD6基因在各部位的表达都比较弱,唯独三倍体茎尖有很高的表达。由于茎尖是生长旺盛的部位,PnD6有可能是影响三倍体速生的重要基因。这些结果可能暗示,DNA甲基转移酶基因可能参与了黑杨发育过程中叶片形态发生的过程。 相似文献
3.
4.
甲基磺酸甲酯处理的豫杂一号泡桐丛枝病幼苗的生长及SSR分析 总被引：2，自引：0，他引：2
DNA甲基化在基因表达、细胞分化以及系统发育中起着重要的调节作用(陆光远等,2005;Meyer et al.,1994;Ulian et al.,1996;Rossi et al.,1997).在植物生长发育过程中,DNA甲基化水平过高或过低,都会导致植物形态发生异常.DNA甲基化水平降低的拟南芥(Arabidopsis thaliana)出现了植株矮化、腋芽丛生和叶片变小等异常形态(Finnegan et al.,2000a;2000b). 相似文献
5.
植物经常暴露在各种生物和非生物的胁迫之下,这些胁迫会影响植物的生长发育和繁殖并最终导致植物死亡。为了抵御不利的环境条件,植物已经进化出复杂而精细的网络来感知胁迫并激活防御系统。为此,植物激活许多信号转导通路,这些信号转导通路可以改变一些胁迫响应基因的表达,从而引起植物形态、生理和生化的改变以适应逆境。DNA胞嘧啶甲基化是高等真核生物的主要表观遗传机制之一,在维持基因组稳定性和调节基因表达方面起着关键作用。表观遗传变异比遗传变异更为灵活。一旦环境条件发生变化,为了适应新的环境植物都会发生表观遗传的改变。许多研究表明DNA甲基化参与植物的发育和应激反应。基于相关研究对DNA甲基化进行了综述,对植物逆境胁迫有重要意义。 相似文献
6.
《绿色科技》2018,(22)
分析了黄萎病胁迫下的陆地棉与对照组之间甲基化水平的变化和甲基化模式的改变,进而探讨了棉花抗黄萎病胁迫的分子机理。将毛细管电泳的甲基化敏感扩增多态性分析法运用于陆地棉的DNA甲基化水平分析中,通过DNA甲基化序列的克隆分析寻找了棉花抗黄萎病相关基因。结果表明:陆地棉在黄萎病胁迫后DNA甲基化变化没有显著差异。通过克隆测序发现,逆转录因子基因、肌动蛋白解聚因子基因、Gorge3逆转录酶基因、赤霉素20-氧化酶基因、Transducin/WD40重复亚族蛋白基因以及泛素蛋白连接酶基因对棉花黄萎病抗性起重要作用。陆地棉的基因组甲基化水平在黄萎病胁迫下没有显著差异。陆地棉发生甲基化的相关基因,可能对黄萎病抗性机制具有重要意义。 相似文献
7.
肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase,CCR)是木质素合成中的关键酶,根据植物中CCR保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因,命名为Eu CCR。该基因g DNA长2 918bp,c DNA长1 045 bp,CDS区编码336个氨基酸。EuCCR核酸序列与Gen Bank已登录的桉属植物CCR基因同源性达到96%以上,与伞房属、杯果木属植物CCR的同源性达85%以上,其编码的氨基酸序列经比对发现具有完整FR_SDR_e结构域及NADP结合位点和底物结合位点,与可可树等植物中CCR基因编码序列同源性也在84%以上,确定为CCR基因。对EuCCR蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析,利用MEGA软件对基因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M15系统对EuCCR进行原核表达,重组质粒成功表达分子量约36 kD的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4中克隆得到EuCCR基因并原核表达,为该基因的酶学分析以及利用该基因转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。 相似文献
8.
体细胞胚胎发生作为生物技术在林木育种、繁殖和保护策略中得到了广泛应用。DNA甲基化在林木体细胞胚胎发生过程中起着至关重要的作用,它是一种与转录沉默相关的表观遗传修饰,是控制基因表达的关键因素。开展基于DNA甲基化的林木体细胞胚胎发生研究对于调控体胚发生、林木改良和种质资源建设等具有重要意义。文中从林木体胚发生过程中的DNA甲基化水平与模式变化情况、DNA甲基化与体胚影响因素之间的关联、去甲基化剂（5-氮杂胞苷）如何调控林木体胚发育及DNA甲基化如何调控相关基因转录、基因表达等方面进行综述,对目前研究中存在的问题进行分析,并展望了未来的研究内容和方向。 相似文献
9.
10.
多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过根癌农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR和PCR-Southern分析证明已将NP1和GAFP基因整合到烟草基因组中。离体抑菌实验表明转基因植株对真菌和细菌表现出一定的抗性。以上结果表明通过该表达载体进行遗传转化可获得含双价抗病基因植物,并能有效表达,提高转基因植物抗病能力。 相似文献