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化学发光免疫分析(chemiluminesecence immunoassay,CLIA)是用于疫病检测的一种免疫检测技术,是基于免疫反应原理,结合化学发光检测技术而建立的。与放射免疫分析、酶免疫分析等标记免疫技术相比,具有无放射性污染、灵敏度高和特异性强的特点,已被广泛应用于疫病流行病学调查、诊断、药物分析以及微生物检测等方面。本文简要介绍了CLIA技术的基本原理及发展,从细菌、病毒和寄生虫检测方面,综述了近年来该技术在动物疫病检测中的应用,提出该技术正向高特异性、高灵敏度、高通量、快速和自动化检测的方向发展,这为今后CLIA在动物疫病检测中的应用研究提供参考。 相似文献
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化学发光免疫分析法检测猪尿中莱克多巴胺残留 总被引:4,自引:1,他引:3
本试验运用化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)检测猪尿中莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)的残留。检测限为0.01 ng/mL,检测范围为0.036~32.2 ng/mL。添加浓度分别为0.1、1、10 ng/mL,平均回收率为73.2%,批内平均变异系数为9.7%,批间平均变异系数为11.3%。而本研究所建立的化学发光免疫检测方法(CLISA)可以达到检测RAC残留的要求。 相似文献
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检测免疫球蛋白的方法有免疫荧光技术、放射免疫技术和免疫酶技术等。但是 ,免疫荧光技术应用范围窄 ,灵敏度不高 ;放射免疫技术存在放射污染这一严重问题 ;免疫酶技术虽避免了放射污染 ,但灵敏度却未达到放免的水平。 80年代出现的化学发光免疫技术则避免了以上各技术的缺点 ,展示着广阔的应用前景 [1]。试验应用本实验室建立的化学发光自显影法 ( ChemiluminescentAutographic Immunoassay,CLAGIA ) [2 ] ,对 30头奶牛分娩后 5d内所泌乳样的 Ig G进行了检测。1 材料与方法1 .1 材料 标准牛 Ig G,用辛酸沉淀法从牛血清中纯化 ,终… 相似文献
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黄曲霉毒素B化学发光免疫检测方法的建立 《畜牧与饲料科学》2015,36(10):29-29
在利用化学法合成吖啶酯标记的黄曲霉毒素B1(AFB1)抗原(AFB1-BSA-AE)的基础上,建立了化学发光免疫分析法(CLIA)检测样品中的黄曲霉毒素B1(AFB1)含量。结果表明,该方法对应的回归线方程为y=-16.995Ln(x)+166.06,R2=0.9996,AFB150%竞争抑制浓度(IC50)为0.924 ng/m L,检测的线性范围为0.1~5.0 ng/m L。在黍米样品中的加标回收率为75%~115%,变异系数为0.36%~1.20%。 相似文献
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[目的] 建立快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。[方法] 将吖啶酯(acridinium ester,AE)与AFB1单克隆抗体进行体外化学合成,分别合成了吖啶酯∶AFB1单克隆抗体摩尔比为5∶1、10∶1、15∶1、20∶1、25∶1的吖啶酯标记AFB1单克隆抗体(AFB1-AE),分析了不同摩尔比的检测效果,选择吖啶酯∶AFB1单克隆抗体为25∶1的AFB1-AE偶联物建立化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)。[结果] 获得对应的标准曲线回归方程为:y=-0.245Ln(x)+ 1.578 1,R2=0.985 7,IC50=81.48 pg/mL;对样品进行加标回收实验,加标回收率88.4%~106.0%,变异系数0.92%~2.10%。[结论] 将吖啶酯与AFB1单克隆抗体体外交联,可建立新的化学发光免疫分析方法。 相似文献
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根据双抗原夹心ELISA检测方法,结合化学发光检测体系建立了检测血清中PRRSV抗体的化学发光免疫分析方法,确定了检测体系中所用各组成部分的浓度,并组装为试剂盒,同时对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确性、稳定性等技术参数与酶联免疫分析进行了对比,结果表明,二者的检测值显著相关,相关系数为0.9486.该试剂盒在2~8℃下可保存1年,并且灵敏度高、特异性强、精密度好,操作简便、耗时短,能准确检测出血清中抗体的浓度. 相似文献
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时间分辨荧光免疫分析(简称TRFIA)是新近发展起来的一种新型的非放射配基结合分析法。它与放射免疫分析、化学发光免疫分析及荧光免疫分析相比都有其独特的优点。该测定法的原理和通常的荧光免疫分析法不同,所用示踪物不是荧光素,而是采用 相似文献
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采用化学发光(CL)法测定雏鸡禽成髓细胞性白血病强毒(vAMV)感染后免疫器官淋巴细胞自由基产生水平的动态变化,结果表明雏鸡vAMV感染后淋巴细胞化学发光的变化不同于健康对照雏鸡,与vAMV致病过程直接相关。 相似文献
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在常规酶联免疫法(ELISA)的基础上,用辣根过氧化物酶标记氯霉素与牛血清白蛋白偶联后免疫小鼠制得的单克隆抗体,并优化抗体工作浓度、反应时间等试验参数,建立了一种简便、快速、准确的氯霉素(CAP)残留一步式化学发光酶联免疫检测方法。结果表明:该方法最佳检测范围为20~1620 pg/mL,IC50值达59.911 pg/mL,检测限为9.3 pg/g,可检出国际规定的CAP残留标准限量值以下的残留量。与常规ELISA检测方法相比,不仅提高了检测限和灵敏度,而且反应时间缩短了60 min。采用一步式化学发光酶联免疫检测氯霉素残留,可以大幅度缩减检测时间,更符合快速检测的要求。 相似文献
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《中国草食动物科学》2020,(3)
为建立动物血清中O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的O型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体,制备了O型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。结果表明:该方法能够定量检测猪、牛、羊血清中的O型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,与其他偶蹄类动物病原无交叉反应,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,同国产O型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率92.62%,阴性样品符合率92.14%,总符合率92.45%;重复性试验组内与组间变异系数分别低于10%和15%。综上,该研究建立的O型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 相似文献
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《动物医学进展》2020,(8)
为建立动物血清中的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,通过获得的A型口蹄疫病毒VP1融合蛋白与相关单克隆抗体建立了A型口蹄疫病毒抗体竞争化学发光检测试剂盒。该方法能够特异性的定量检测猪、牛、羊血清中的A型口蹄疫病毒VP1蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的偶蹄类动物病原无交叉反应,批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,具有良好的重复性。对该方法的特异性指标和敏感性指标进行了验证,同国产的A型口蹄疫抗体检测试剂盒进行了比较,阳性样品符合率为92.63%,阴性样品符合率为93.98%,总符合率为93.17%。建立的A型口蹄疫病毒抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高,敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 相似文献
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《畜牧与兽医》2020,(10)
为了建立动物血清中的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体化学发光免疫分析检测方法,采用PPRV N融合蛋白与相应单克隆抗体对化学发光抗体检测方法进行了研究。结果显示:建立的检测方法能够特异性地定量检测羊血清中的PPRV N蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的动物病原无交叉反应,组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性;对该方法的特异性指标、敏感性指标进行了验证,与法国IDVET公司的PPRV抗体检测试剂盒进行比较,阳性样品符合率为95.02%,阴性样品符合率为82.08%,总符合率为90.33%。结果表明:建立的PPRV抗体化学发光免疫分析检测方法,特异性高、敏感性强,操作简单、快速,具有较高的应用推广价值。 相似文献
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为了快速检测猪肉中呋喃西林代谢物残留量,试验采用自主研发的以磁性微球为固定相的化学发光免疫试剂盒,并对其方法学进行评价及与高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS法)检测结果进行比较分析。结果表明:采用化学发光免疫试剂盒测定猪肉中呋喃西林代谢物的灵敏度为0.331μg/kg,精密度较好,最低检测限为0.077μg/kg,与呋喃西林原药的交叉反应率为8.9%,与其他类似物的交叉反应率均0.1%,平均回收率为92.7%~104.8%,与HPLC-MS/MS法检测样本的阴性和阳性结果一致。说明该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等特点,适用于现场快速检测猪肉中呋喃西林代谢物的残留。 相似文献