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根据已克隆的堆型艾美球虫(Eimeria acervulina)广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计了特异性引物,用PCR方法扩增cSZ1的开放阅读框架(ORF)后克隆至表达载体pET-32a( ),构建了重组表达质粒pET-32a( )-cSZ1,并将其转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了cSZ1重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达,表达产物量可达菌体总蛋白的9.3%,融合蛋白的分子质量约为40ku。重组菌诱导表达的产物经SDS—PAGE后,用堆形艾美球虫感染鸡的超免疫血清进行免疫印迹分析,结果为阴性,提示cSZ1所编码的抗原可能主要是T细胞抗原表位。 相似文献
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根据克隆的毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白-2基因(EnMIC-2(Gd))的cDNA序列设计特异性引物,用PCR方法扩增其阅读框架(ORF)后,克隆至质粒表达载体pET-32a( ),成功构建了重组表达质粒pET-32a( )-EnMIC-2。用CaCl2法将其转化至宿主细菌E.cliBL21(DE3),并用IPTG成功诱导了EnMIC-2重组抗原在大肠杆菌表达。表达的重组蛋白约占菌体总蛋白的10.8%,其相对分子质量约为55000。重组蛋白经SDS-AGE分析后,用E.necatrix(广东株)感染鸡的高免血清进行Western Blotting分析,结果为阳性。 相似文献
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近年来广东省鸡球虫病防治的反思及今后的对策 总被引:2,自引:0,他引:2
自从1870年发现鸡球虫以来,至今已有一百多年,虽然从40年代初就开始应用磺胺类药物来治疗球虫病,随后也涌现出一大批不同类型的防治药物,然而,鸡球虫病的危害没有因此而得到完全控制,相反,在世界范围内,由于鸡球虫病所造成的损失却逐年增加,据lung(1985年)估计,每年全世界因球虫病的损失为5亿美元,1992年Bh。gal估计损失达20亿美元。作为我国畜禽业大户的广东省,由于所处的地理位置而形成的特有气候,为球虫的体外发育提供一个非常理想的发育环境,历来鸡球虫病是一个重要的疾病。近年来,随着饲料密度的增加,球虫病对鸡的… 相似文献
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丁型流感病毒是继甲型、乙型和丙型流感病毒之后的一种新型正粘病毒,2011 年首次由美国从表
现出流感样症状的猪只中分离出来,并于 2016 年被国际病毒分类委员会正式命名为丁型流感病毒。目前丁型流
感病毒已广泛分布于美洲、亚洲、欧洲和非洲的数十个国家。丁型流感病毒利用牛作为其自然宿主和扩增宿主,
并定期扩散到其他哺乳动物物种,包括猪、马、羊和骆驼等。因此,丁型流感病毒具有广泛的地域分布和宽泛
的宿主范围。丁型流感病毒感染可导致牛患轻度至中度呼吸道疾病,被认 为是牛呼吸系统疾病综合征的重要关
联因子。血清学证据表明,丁型流感病毒具有感染人的潜在风险。我国研究人员于 2014 年首次在山东省的牛群
中检测到丁型流感病毒,随后,来自不同团队的研究人员分别于 2017、2021 和 2022 年报道了丁型流感病毒核
酸阳性病例。为更好地了解丁型流感病毒对我国畜牧养殖业的影响,系统综述了丁型流感病毒在我国的分布情
况和研究进展,并分析 了丁型流感病毒在我国的流行趋势及对我国畜牧养殖业的潜在威胁。 相似文献
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为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。 相似文献