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为获得体外稳定表达的高抗菌活性新型抗菌肽,通过重叠延伸PCR技术获得了拟穴青蟹抗菌肽Scygonadin (简记为Scy)和斜带石斑鱼抗菌肽Hepcidin 3 (简记为Hep3)的杂合抗菌肽基因scygonadinhepcidin3 (简记为scy-hep3),将scy-hep3与毕赤酵母Pichia pastoris的p PIC9K质粒连接,构建了分泌型表达载体p PIC9K-scy-hep3,用电转化法将其转化至毕赤酵母GS115菌中,经甲醇诱导表达和亲和纯化后获得杂合抗菌肽Scy-Hep3,并进行抗菌活性分析。结果表明:本研究中成功构建了重组毕赤酵母菌株GS115/p PIC9K-scy-hep3,用体积分数为0. 5%的甲醇诱导表达24 h,分泌表达上清液中获得了稳定表达的相对分子质量约24 000的表达产物,与预期杂合抗菌肽Scy-Hep3的大小相符;抗菌活性结果表明,杂合抗菌肽Scy-Hep3具有广谱抗菌活性,对被测的3种革兰氏阳性菌(溶壁微球菌Micrococcus lysodeikticus、谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus)和4种革兰氏阴性菌(施氏假单胞菌Pseudomonas stutzeri、荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila和弗氏志贺氏菌Shigella flexneri)具有较强的抗菌活性(最小抑菌浓度MIC12μmol/L);对比于单一的抗菌肽Scy和Hep3,杂合抗菌肽Scy-Hep3的抗菌活性显著增强。本研究结果将为杂合抗菌肽Scy-Hep3的生产和开发应用提供数据资料。 相似文献
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应用氯化铵裂解、超声波破碎、离子交换层析和SDS—PAGE电泳等方法,对不同品种鸡白细胞中的抗菌肽成分进行了初步提取和分离,再用反相高效液相色谱法进一步分离和提纯.经微量琼脂糖弥散法初步检测体外抗菌活性后,利用微量稀释培养法分别检测了粗提抗菌肽对7个受试菌株的最小抑菌浓度(M1C).结果表明,在鸡白细胞颗粒中存在着天然抗微生物活性物质,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有抑制活性,且不同品种鸡粗提抗菌肽的体外抑菌浓度存在显著差异,其中罗曼褐壳蛋鸡粗提抗菌肽的抗菌活性最高,其次是三黄肉鸡,而罗斯308肉鸡较差. 相似文献
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黄粉虫幼虫抗菌肽的诱导特性及电泳组分研究初报 总被引:4,自引:0,他引:4
对黄粉虫幼虫分别进行空白对照、菌刺、菌饲、热激和超声波四种处理,并于处理后1d、2d、3d、4d、5d分别提取黄粉虫幼虫体内的抗菌肽,做抗大肠杆菌(革兰氏阴性菌)和抗金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)试验及交叉抑菌试验,测定其抑菌圈大小,确定其抗菌活性和诱导特异性,同时还进行抗菌肽热稳定性及电泳试验。结果表明:水浴后提取的抗菌液抑菌效果明显,四种处理的黄粉虫幼虫均能产生抗大肠杆菌/金黄色葡萄球菌物质。其中抗金黄色葡萄球菌效果要略好于抗大肠杆菌效果,其抗菌效果显著性依次为:菌饲、对照、热激和超声波、菌刺,而抗大肠杆菌效果显著性则依次为:菌饲、菌刺、热激和超声波、对照。交叉抑菌试验表明黄粉虫幼虫体内抗菌肽的产生不具有诱导特异性。电泳图谱显示黄粉虫抗菌肽含有5种肽组分。 相似文献
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抗菌肽是生物防御系统产生的一种阳离子活性肽,具有分子量小、无免疫原性、广谱抗菌等特点,是生物体防御系统的重要组成部分。与抗生素相比,抗菌肽具有作用速度快、无残留、不易产生耐药性等优点,是抗生素的理想替代品。本文就抗菌肽的结构特点、抗菌机理及其在畜牧生产中的应用作了综述。 相似文献
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抗菌肽(Arnibacterial peptide,ABP)是一种具有广谱抗菌活性的小肽类物质。研究表明,除了抗菌活性外,抗菌肽还具有抗病毒、抗真菌和抗肿瘤作用。文章对抗菌肽的分类与特性、结构与活性、作用机理等方面进行了系统的分析,并阐述了目前对抗菌肽的研究取其应用前景,以期为抗菌肽更深层次的研究提供参考。 相似文献
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诱导源及其诱导剂量对黄粉虫幼虫血淋巴抗菌活性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
采用紫外线、超声波、菌液饲喂、菌液注射等方法对黄粉虫(Tenebrio molitor)进行抗菌肽的诱导,每种诱导方法分别采用不同诱导剂量,以确定最佳的诱导方法和最适的诱导剂量。结果表明:不同诱导方法的黄粉虫幼虫血淋巴抑菌活性大小为菌液注射紫外线菌液饲喂超声波。菌液注射法适宜的注射剂量为104cfu/头,诱导后培养48 h抑菌效果最好。采用琼脂糖孔穴扩散法进行测定,其对猪致病性大肠杆菌等6种动物病原细菌均有不同程度的抑制作用,特别是对猪致病性大肠杆菌和猪链球菌具有较强的抑菌活性。 相似文献
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