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猪瘟病毒一步法RT PCR检测方法的建立 总被引：2，自引：1，他引：1
本研究根据NCBI公布的猪瘟病毒石门毒株的E2基因序列，设计、合成了1对检测猪瘟病毒E2基因的RT-PCR引物。自疑似猪瘟病料及接猪瘟F114毒的PK-15细胞中提取总RNA，经一步法RT-PCR扩增E2基因。建立了猪瘟病毒E2基因RT-PCR检测方法，RT-PCR从26份疑似猪瘟病料中检出阳性病料24份，阳性检出率为92.3%；结果表明，建立的 RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于CSFV的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。 相似文献
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猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种烈性传染病, 世界动物卫生组织将其列为A类传染病,被我国列为一类传染病.为了建立一种简易、快速、准确的检测方法,笔者采用琼脂凝胶免疫扩散试验方法(AGP)检测320份注苗猪血清,结果256份阳性,免疫密度80%,与中和试验的对比检测中,取得了基本一致的结果.用此法大面积检测抗体,可及时了解基层兽医的防疫质量,促使其适时补针,以提高和巩固防疫质量. 相似文献
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为了解河池市巴马香猪规模场内的猪瘟流行情况,通过RT-PCR方法检测2015—2018年372份病猪样品,其中检测出5份猪瘟病毒阳性样品,经基因扩增、序列测定等试验得到E2基因,并进行核苷酸、氨基酸同源性比对分析。结果显示,本次分离的广西巴马香猪猪瘟GX01毒株属于基因1.1亚群中,与C株是同一个亚群。检测出阳性后该场立刻采取相应措施,制定适合本场实际情况的净化技术方案,之后一年半时间再没有出现猪瘟疫情。 相似文献
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猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的急性、热性、高度接触性传染病。该病是严重威胁生猪养殖业重要的传染病之一,被世界动物卫生组织列为A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。净化对规模化养猪场的猪瘟的防控有很好的效果。因此,本文以猪瘟流行病学和症状为基础,对猪瘟净化场的建设和净化方式展开论述,以期为生猪养殖及猪瘟防控起到指导作用。 相似文献
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猪瘟（Hogcholera，HC或Swinefever，SF；在欧洲称为古典猪瘟-Classical swine fever，CSF）是由猪瘟病毒（HCV或CSFV）引起的一种高度接触性传染病，猪是该病毒唯一的自然宿主。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定必报传染病，我国也将猪瘟列为一类动物疫病。 相似文献
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1流行特点
猪瘟是一种呈多样性临床症状和病理变化，由猪瘟病毒引起的一种高度接触性猪传染病。是国际兽疫局（OIE）将其列为A类16种法定传染病之一，我国亦将其列为一类动物传染病。猪不分年龄、性别和品种均易感。一年四季都可发生。主要传染源是病猪，病毒主要经消化道、呼吸道感染。新疫区发病率和死亡率在90％以上，老疫区免疫效果不确实的猪群，感染猪瘟病毒症状相对轻微或无临诊症状，但会不断排出病毒，使猪场内猪瘟不断出现。到目前为止，猪瘟仍然对养猪业具有很大的威胁。 相似文献
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世界动物卫生组织（OIE，2002）将猪瘟列为A类16种法定传染病之一，在我国《家畜家禽防疫条例实施细则》中CSF也被列为一类传染病。国家对猪瘟的预防和控制一直都十分重视，尽管我国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗，并在预防猪瘟的发生中起到了重要作用，但由于近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化，其流行形式从频发的大流行转变为周期性、波浪形的地区性散发性流行，出现了所谓的非典型猪瘟、温和型猪瘟等，以及在出现上述种种迹象的地区和猪场往往同时表现无法解释的免疫失败。当前，猪瘟仍是世界养猪业的一大威胁，给养猪业造成了严重的经济损失。文中主要从临床症状、动物接种、病毒分离、血清学、细胞检测、分子生物学方面对猪瘟诊断进行了较全面的阐述，为猪瘟的诊断建立提供参考。 相似文献
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猪瘟是危害养猪业的烈性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为16种A类法定动物传染病之一。随着分子生物学研究的不断发展,人们对猪瘟病毒的基因结构、基因功能、检测手段、野毒和疫苗毒的鉴别以及疫苗预防方法有了更深入的认识。文章就猪瘟基因的结构特点、E0和E2基因的功能和变异的研究等方面进行了综述,以期对我国猪瘟病毒基因及其基因变异的研究提供一定依据,同时结合本实验室建立的对猪瘟病毒野毒和疫苗毒建立的二重PCR鉴别诊断和猪瘟净化方案的研究进行了综述,以期为猪瘟防治及净化方案的制定提供一定的参考。 相似文献
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应用MGB荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒野毒株进行实时定量检测,以实现对猪瘟病毒野毒株与疫苗株的鉴别诊断。以猪瘟病毒5’端非编码区为扩增靶区,通过鉴别诊断位点的筛选、引物、探针和反应条件的优化,建立了猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法的检测灵敏度为10拷贝/反应或3.0 TCID50/反应;对猪瘟病毒野毒株的检测结果均为阳性,而对猪瘟病毒疫苗株和其他猪源病毒的检测结果均为阴性,表明该方法具有较好的特异性;对515份临床样品的检测结果表明,该方法与RT-nPCR测序法的检测符合率为98.3%;猪瘟病毒人工感染猪实验结果表明,猪瘟野毒感染猪发病前2-4天即可被检测出阳性,疫苗免疫株检测结果始终为阴性。 相似文献
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为检测商品化猪瘟细胞毒活疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染,根据牛病毒性腹泻病毒5′端非编码区基因保守序列设计引物,建立了检测牛病毒性腹泻病毒一步法反转录—聚合酶链(RT-PCR)方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性,对牛病毒性腹泻病毒检测的灵敏性为1pg总RNA量,应用该方法,检测了32批猪瘟细胞毒活疫苗样品,以上结果表明该一步法RT-PCR方法检测速度快、特异性强、敏感性高,可用于猪瘟细胞毒活疫苗中污染的牛病毒性腹泻病毒外源病毒检测。 相似文献
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为同时检测猪源临床样本中的猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV),基于这两种病毒的5'UTR序列设计特异引物和TaqMan探针,建立了一种检测CSFV和BVDV的双重荧光RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、最低检出限和重复性等进行了评价。结果显示,该方法只对CSFV和BVDV呈现特异性扩增,对猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型不发生交叉反应,对阳性标准对照CSFV-5'UTR-RNA、BVDV-1-5'UTR-RNA和BVDV-2-5'UTR-RNA,最低可分别检出27、36和32拷贝/μL。该方法的组内和组间试验Ct值变异系数介于0.11%～1.20%,具有良好的重现性。对152份猪组织样本用该方法进行CSFV和BVDV核酸检测,结果检出CSFV阳性样本16份,BVDV阳性样本3份,CSFV和BVDV双阳性样本1份,与国标和OIE《陆生动物诊断试验和疫苗》相应的荧光RT-PCR方法阳性符合率为100%。结果表明,本研究建立的双重荧光RT-PCR方法可用于临床样本中的CSFV和BVDV检测,从而为猪瘟防制和净化提供了一种有效的技术手段。 相似文献
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