表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒株的鸡胚传代研究     

唐国毅  商雨  李林涛  任助  李丽  王红琳  罗青平  曾驰  温国元 《动物医学进展》2019,40(11)

新城疫和禽流感严重危害世界养禽业,对其防控在我国主要依赖疫苗接种。课题组前期获得了一株可表达H9亚型禽流感病毒HA蛋白的重组耐热新城疫病毒rTS-HA株。进一步对其鸡胚传代特性进行研究,旨在分析重组新城疫病毒在传代过程中的热稳定性和外源基因表达稳定性。将其在SPF鸡胚传至18代,每隔4代耐热选育1次,取中间代次毒株,测定其增殖效价、鸡胚最小致死剂量的平均死亡时间(mean death time,MDT),同时设置未耐热选育的对照。结果表明,通过耐热选育将rTS-HA株传至第18代后,其增殖滴度未发现显著变化,MDT均大于120 h,表明毒力无返强现象,但其耐热性有显著提升,而未进行耐热选育的鸡胚传代株的耐热特性显著下降。动物试验结果表明,耐热选育后毒株的免疫效果较初代毒株也有明显的提升。以上结果表明重组新城疫病毒rTS-HA株需要进行耐热选育传代,才能保持其耐热特性,同时其免疫原性也有一定的提升,可作为新城疫和禽流感二联耐热基因工程活疫苗的候选毒株。  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒种子批的建立     

汪宏才  汪辉  王红琳  温国元  张腾飞  罗玲  卢琴  张蓉蓉  罗青平 《湖北农业科学》2020,59(10)

为保证传染性支气管炎抗原的质量,测定了3种不同来源的传染性支气管炎病毒株的EID_(50),选取滴度最高的病毒株作为毒种,建立了传染性支气管炎病毒WH株种子批,并对冻干毒种进行了毒价测定。结果表明,含毒尿囊液在冻干前后毒价无显著性差异,毒种的EID_(50)在10代内无变化。冻干毒种在-40℃和-15℃保存1年,其毒价基本不变。经检验种子批未受到细菌及其他微生物的污染。  相似文献   

鸭疫里默氏杆菌和副粘病毒混合感染的诊断     

罗玲  李丽  汪宏才  温国元  罗青平  王红琳  卢琴  商雨  邵华斌  王孝忠 《湖北农业科学》2020,(16):115-117

  相似文献   

新城疫病毒TS09耐热株HN基因的序列测定与分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

商雨  邵华斌  王红琳  杨峻  胡薛英  程国富  温国元 《湖北农业科学》2011,50(12):2543-2547

新城疫病毒TS09耐热株是由V4株经耐热选育得到的新毒株.对其血凝素-神经氨酸酶(Hemagglutinin-Neuraminidase,HN)基因进行序列测定分析.选取GenBank中国内外具有代表性的序列与其进行同源性和系统进化分析.结果表明,氨基酸序列同源性比较中,TS09耐热株与V4株的氨基酸的同源性为96.8...  相似文献   

鸭致病性大肠杆菌的分离及人工感染鸭的组织病理学研究     

罗玲  杨峻  邵华斌  张红  王红琳  罗青平  温国元  杨前平  艾地云 《湖北农业科学》2011,50(2):342-345

经过菌落形态、染色形态、生化试验,从来自湖北某鸭场的30份病料中,分离到20株鸭大肠杆菌。以3.0×108CFU/mL剂量感染健康昆明鼠和健康樱桃谷鸭,鼠和鸭分别在感染后8 h和12 h出现症状,12h和18 h后开始出现死亡,而对照组则未出现任何症状,表明该菌株为致病性菌株。药物敏感试验结果显示该鸭场分离菌株对某些药物已经产生很强的耐药性。人工感染鸭的组织病理学结果表明其肝脏、心脏有广泛的纤维素渗出物且发生严重的变性、坏死。  相似文献   

湖北1型鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

廖永洪  邵璐璐  邵华斌  杨峻  罗玲  王红琳  杨前平  罗青平  温国元  张蓉蓉  艾地云 《湖北农业科学》2010,49(12)

湖北地区某鸭场20日龄樱桃谷鸭发生疑似鸭疫里默氏杆菌病,临床表现为缩脖、腿发软,部分病鸭表现为仰卧、双腿划动呈游泳状,临死前出现典型的神经症状。剖检病变呈典型的心包炎、肝周炎和气囊炎。用含5%小牛血清的TSA平板从病鸭中分离到8株细菌,经过染色、PCR及测序分析、玻片凝集和动物回归试验,综合分析鉴定为1型鸭疫里默氏杆菌。  相似文献   

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验     

王红琳  杨峻  邵华斌  温国元  艾地云  罗玲  罗青平  张蓉蓉  张琳 《农业科学与技术》2009,10(2):102-107

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。  相似文献   

鹌鹑沙门菌的分离鉴定   总被引：1，自引：1，他引：0  

罗玲  艾地云  杨峻  王红琳  温国元  罗青平  张蓉蓉  邵华斌 《动物医学进展》2010,31(3):118-120

对病死鹌鹑的肝脏和心血进行了细菌分离培养、生化鉴定及动物接种试验,确定为沙门菌。在水井、禽舍输水系统处采取的两处水样中,同样分离鉴定出了上述细菌。动物试验结果表明,从脏器中分离到的沙门菌比从水样中分离到的沙门菌致病力更强。药敏试验结果表明,从脏器中分离的沙门菌对强力霉素、多黏菌素B敏感,水样中分离的沙门菌对卡那霉素敏感。  相似文献   

鹅禽流感免疫程序研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

杨峻  邵华斌  艾地云  王红琳  罗青平  张蓉蓉  罗玲  廖永洪  温国元 《湖北农业科学》2008,47(4):449-451

为了科学制定鹅的禽流感疫苗免疫程序,进行了5方面的试验.结果表明,雏鹅首免后3周可测定出AI-HI抗体,4周达到高峰,AI-HI抗体为4.8log2,6周开始下降.产蛋鹅免疫后4周抗体达到高峰9～11 log2,直到8个月抗体水平仍然维持在7～9 log2.1日龄雏鹩母源抗体AI-HI价为9.3log2,28日龄降至4 log2以下.试验所用的3个厂家的疫苗首次免疫雏鹅的抗体水平上升无明显差异,二次免疫抗体水平上升有明显差异.二次免疫的免疫鹅体内抗体消长情况测定结果表明,以每只1.5mL的免疫效果最好,免疫持续期可达8个月.  相似文献   

鸭坦布苏病毒E蛋白原核表达及反应原性分析     

卢琴  王红琳  罗青平  张腾飞  汪宏才  罗玲  温国元  张蓉蓉  邵华斌 《中国家禽》2018,(13)

参照Gen Bank已发表的鸭坦布苏病毒序列,采用生物信息学分析并利用PCR方法从鸭坦布苏病毒湖北分离株(JL2011株)扩增出E基因全长片段(E1)及E基因截短片段(E2),将含有双酶切位点的目的片段连接p ET-28a(+)载体,成功构建出重组表达质粒p ET28a-E1和p ET28a-E2。将p ET28a-E转化BL21(DE3)后,经IPTG诱导可表达出约54.3 ku和44.8 ku的蛋白,但E2的表达量明显高于E1,故将筛选的E2包涵体进行纯化后,用坦布苏病毒阳性血清进行Western blot分析表明纯化后的重组蛋白具有良好的反应原性。研究为进一步阐明鸭坦布苏病毒E蛋白的功能及建立快速灵敏的鸭坦布苏病毒检测方法奠定基础。  相似文献