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1.
用单克隆抗体（ＭＡｂ）对传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）不同毒株中和表位的相关性进行了分析。ＭＡｂ Ｂ６９能中和同源病毒Ｄ７８株，但不中和ＭＤ及ＩＢＤＶ Ｄｅｌ－Ａ变异株。而ＭＡｂ ３３Ｅ８和Ｒ６３能中和Ｄ７８株和ＭＤ及Ｄｅｌ－Ａ变异株。在体外将Ｄｃｌ－Ａ株ＶＰ２基因和一个１０＾３ｂｐ片段的ｃＤＮＡ克隆进行翻译，得到６种多肽，它们代表了一个全长产物（３５．５ｋｄ）和５份切割片段。用ＭＡｂ Ｂ６９、３ 相似文献
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应用杂交瘤技术获得了１３ 株抗传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ） 的单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） ,经过检测其中有９ 株ＭｃＡｂｓ 为ＩｇＧ 类, ４ 株为Ｉｇ Ｍ , 这些ＭｃＡｂｓ 与新城疫病毒（ＮＤＶ） 、传染性支气管炎病毒 （ＩＢＶ） 和马立克氏病病毒（ ＭＤＶ） 均无交叉反应, 病毒中和试验表明, 有５株ＭｃＡｂｓ 具有中和活性,Ｗｅｓｔｅｒｎ － ｂｌｏｔｔｉｎｇ 试验表明, 这５ 株有中和活性的ＭｃＡｂｓ 识别的抗原位点在ＶＰ２ 。传染性法氏囊病最早于１９５７ 年发现于美国东部特拉华州的甘博罗（Ｇｕ ｍ ｂｏｒｏ） 地区,１９６２ 年由Ｃｏｓｇｒｏｖｅ 首次报道, 此后该病相继在全世界许多国家和地区广泛流行。本试验对通过淋巴细胞杂交瘤获得的１３ 株单克隆抗体进行了生物学特性鉴定, 以期应用于对ＩＢＤ 的研究, 现将试验情况报告如下。 相似文献
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用单克隆抗体（ＭＡｂ）作酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、免疫荧光试验（ＩＦＡ）、病毒中和（ＶＮ）试验及兔疫沉淀试验证明了牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）致细胞病变株８７－２５５２（现地分离）与ＮＡＤＬ和Ｓｉｎｇｅｒ（原型株）之间的抗原差异。两个抗ＢＶＤＶ８７－２５５２株的ＭＡｂ（Ｄ１１和Ｂ７）能强烈中和现地分离株，并对该病毒的４８－ＫＤａ糖蛋白呈特异性。这两个ＭＡｂ有不同的亚型，Ｄ１１为免疫球蛋白Ｇ１ 相似文献
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分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 总被引：6，自引：0，他引：6
利用超速离心纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）广东地方分离株Ｄ４１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合,经筛选及克隆,成功地建立了６株可分泌抗ＩＢＶＤ４１株的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞：Ｂ５、Ｂ８、Ｃ７、Ｄ８、Ｄ９、Ｇ１１。其中Ｂ８、Ｃ７、Ｇ１１的稳定性最好,腹水ＭｃＡｂ效价高达１０１０,无血清培养上清ＭｃＡｂ（浓缩３０倍）效价达４×１０４以上。６株杂交瘤细胞的特异性均很好。 相似文献
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编码在ＩＢＤＶ变异株ＧＬＳ大基因组片段Ａ的ＶＰ２结构基因经过修饰后，编译出只在ＩＢＤＶ标准株才能见到的中和表位，编码有ＶＰ３，ＶＰ４的大片段Ａ的一个嵌合ｃＤＮＡ克隆和修饰过的变异ＩＢＤＶＶＰ２结构蛋白在一重组杆状病毒中得到表达。用一组中和单抗（ＭＡｂ）对表达的嵌合蛋白评价后指出，此嵌合蛋白不仅含有以前用ＭＡｂ鉴定过的所有ＧＬＳ变异株表位，而且还含有只有标准株才见到的Ｂ５９中和表位，这种亚单位疫苗对 相似文献
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马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体 总被引：3，自引：1，他引：2
用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。 相似文献
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马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原I型特异性和群共同性决定簇的… 总被引：5，自引：0，他引：5
用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体，以Ｉ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的１株单克隆抗体细胞株，定义名ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ｉ，ⅡⅢ型ＭＤＶ均呈阳 相似文献
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免疫过氧化物酶单层试验检测鸡传染性法氏囊病病毒抗体的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了检测鸡血清中传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）抗体的免疫过氧化物酶单层试验（ＩＰＭＡ）。用于野外鸡血清中ＩＢＤＶ抗体检测。结果表明，ＩＰＭＡ比琼脂凝胶扩散试验（ＡＧＤ）更敏感、快速稳定。这为ＩＢＤ和其它疾病的诊断提供了一种新方法。 相似文献
10.
采用腹腔的接种１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株，这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株，ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应，经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＣ２ａ，ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０＾３～１０＾５之间。 相似文献
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应用多重聚合酶链反应同时检测鉴别鸡新需疫病毒,鸡传染性支气管炎病毒,鸡 总被引：12，自引：1，他引：11
本文建立了一种同时检测ＤＮＶ、ＩＢＶ、和ＭＧ４种病原体的多重ＰＣＲ技术。根据ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＬＴＶ和ＭＧ的基因文库,设计了４对分别与ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＬＴＶ和ＭＧ某段基因序列互补的引物,用这４对引物对同一样品中的ＮＤＶ、ＩＢＶ、ＩＬＴＶ、ＭＧＲＶＡ和ＤＮＡ模板进行多重ＰＣＲ扩增,结果均同时得到了４条特异性大小与实验设计相符的３１０ｂｐ（ＮＤＶ）、１７２０ｂｐ（ＩＢＶ）、６４７ｂｐ（ＩＬＴＶ）和７３２ｂｐ（ＭＧ）多重ＰＣＲ扩增带,而对其他６种禽病病原的ＰＣＲ扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重ＰＣＲ技术难检出１０ｐｇ的ＩＢＶ、１ｂｇ的ＮＤＶ ＲＮＡ模板和ＩＬＴＶ、１ｐｇ的ＭＧ ＤＮＡ模板。 相似文献
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蓝舌病病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
以纯化的蓝舌病病毒（ＢＴＶ）１１型ＶＰ７免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,动用淋巴细胞杂交瘤技术,借助间接ＥＬＩＳＡ筛选,获得了３株分泌抗ＢＴＶ１１ ＶＰ７的群特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株,命名为Ｃ１２Ｄ９、Ｂ４Ｆ３、Ｅ１Ａ７。这３株杂交瘤细胞株连续传代３个月再经液氮冻存６个月后复苏培养,仍能稳定分泌特异性ＭｃＡｂ。３株ＭｃＡｂ均具有ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性,其中Ｃ１２Ｄ９株上清液的ＥＬＩＳ 相似文献
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鸡传染性法氏囊病病毒适应于Vero细胞的初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
将国内６个省市（广东、巾东、河北、辽宁、、新疆和北京）的７株鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的法氏囊组织处理后，直接在Ｖｅｒｏ细胞上盲传３～４代，均能不同程度的产生特征性细胞病变效应（ＣＰＥ），并通过选用具有广谱性的抗法氏囊病病毒的单克隆抗体（ＩＢＩ）Ｖ－ＭｃＡｂ）采用间接免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶桥联酶显色技术（ＡＰＡＡＰ）的方法对７株分离毒的Ｖｅｒｏ第８代细胞进行鉴定，又用逆转—聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对７株分离毒的第１４代Ｖｅｒｏ细胞毒进行进一步证实，结果表明这７株ＩＢＤ囊毒均适应于Ｖｅｒｏ细胞上，这是国内首次报道将组织毒直接适应于Ｖｅｒｏ传代细胞上。 相似文献
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作者对传染性氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）变异株ＧＥＳ的大基因片Ａ编码的ＶＰ３结构基因进行修饰，使之编码中和表位Ｂ６９。该表位只在ＨＢＤ古典株中发现，将可编码ＶＰ，ＶＰ４和修饰的ＩＢＤＶ变株ＶＰ３各结构蛋白的较大片段Ａ的嵌合性ｃＤＮＡ克隆在重组件状病毒中表达。用一组中和性单克隆抗体（ＭＡｂ）对所表达的嵌合性蛋白进行测定，表明该嵌合性蛋白不但包含ＧＬＳ变异株的所有表位，而且包含只在古典株中发现的Ｂ６９中和表 相似文献
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法氏囊病毒感染对肉鸡内分泌机能的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
用鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）弱毒疫苗免疫和强毒感染艾维菌鸡，采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定血浆甲状腺素（Ｔ３，Ｔ４）、促肾上腺皮质素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）来研究ＩＢＤＶ感染对肉鸡内分泌机能的影响。结果表明：ＩＢＤＶ弱毒疫苗免疫使肉鸡产生高效价抗体，血浆ＡＣＴＨ含量升高；ＩＢＤＭ强毒感染导致肉鸡血浆Ｔ２、Ｆ急剧升高，法氏囊肿大，血清中也出现ＩＢＤＶ抗体，但效价显著低下；而ＩＢＤＶ强毒感染曾 相似文献
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鸡贫血病毒山东分离株全基因克隆 总被引：1，自引：1，他引：0
设计了 Ｃ Ａ５、 Ｃ Ａ６ 和 Ｃ Ａ７、 Ｃ Ａ８ 两对引物,分别扩增鸡贫血病毒（ Ｃ Ａ Ｖ）山东分离株 Ｓ Ｊ１ 的 １５ Ｋｂ 和 ０８ Ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 片段。并将这两个片段分别克隆至 ｐ Ｕ Ｃ１１９ 和ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ Ｓ Ｋ＋ ）载体质粒,最后一起克隆到 ｐ Ｑ Ｅ３２ 载体质粒上,使两个片段前后连接成一个全长的病毒 Ｄ Ｎ Ａ。用该质粒转染 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ 细胞,经免疫荧光抗体法和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测到 Ｃ Ａ Ｖ 病毒,结果证明我们得到了一个 Ｃ Ａ Ｖ 感染性全基因克隆。 相似文献
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用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。 相似文献
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在经ＩＢＤ弱毒苗免疫和未免疫的３０－５９日龄ＡＡ鸡研究了感染ＩＢＤＶ后血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ和ＩＬ－２水平动态变化。结果表明：示免疫攻毒鸡（Ａ组）、免疫攻毒鸡（Ｂ组）和未免疫未攻毒鸡（Ｃ组）在ＩＢＤＶ攻毒前１天血浆ＣＡＭＰ和ＣＧＭＰ水平Ｂ组明显高于Ａ和Ｃ组,ＣＡＭＰ／ＣＧＭＰ幽会同样是Ｂ组高于或明显高于Ａ和Ｃ组,ＩＬ－２水平三组之间无明显差异。在攻毒后的头５天内,Ｂ和Ｃ组ＣＡＭＰ明显升高,而Ａ组 相似文献
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分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳＡ效价≥１∶２５６００，琼扩效价为１∶８～１∶１６。３株ＭｃＡｂ能与鸡血清中的Ｉｇ出现沉淀反应，琼扩在２４ｈ以内出现清晰的沉淀线，而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，分别用纯化并经辣根过氧化物酶（ＨＰＲ）标记的１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明，３株单抗识别的均为ＩｇＧ、ＩｇＭ分子的轻链 相似文献
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鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
通过中和试验证明，Ｂ３４腹水单克隆抗体中和ＩＢＤＶ ＣＡ株和中和效价高达１：４２００００。经１０倍稀释后，能等量中和含毒量为１０＾６．６２５ＴＣＩＤ５０／ｍｌ的ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞毒。利用Ｂ３４腹水单克隆抗体建立了ＭＡｂ－ＡＣ－ＥＬＩＳＡ，可用于测定ＩＢＤＶ ＣＡ株细胞的病毒含量，与ＴＣＩＤ５０之间的相关系数为０．９４。 相似文献