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固氨粪产碱菌野生型Ａ１５０１菌株及其胞外多糖（ＥＰＳ）突变株Ｅｘｏ＋＋（Ａ１５３２）和ＥｘＯ－（Ａ１５３１）,以及ｎｉｆＡ和ｎｔｒＣ－ｎｉｆＡ转化子（Ａ１５１３和Ａ１５２３）的ＥＰＳ,由高分子量（２５０ｋＤ左右）组分（ＥＰＳＨ）和低分子量小于４０ｋＤ组分（ＥＰＳＬ）组成。两个组分中均含有葡萄糖、半乳糖、果糖和戊糖,其主要成分葡萄糖和半乳糖的分子摩尔比：Ａ１５０１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为３：１;Ａ１５３１－ＥＰＳＨ为２：１、ＥＰＳＬ为１：１;Ａ１５３２－ＥＰＳＨ为８：１、ＥＰＳＬ为５：１;Ａ１５１３－ＥＰＳＨ和ＥＰＳＬ均为４：１;Ａ１５２３－ＥＰＳＨ为４：１、ＥＰＳＬ为８：１。高分子量ＥＰＳ中还含有多肤,其氨基酸组分在各突变株和转化子之间差异明显,而ＥＰＳＬ中仅含有痕量多肽。 相似文献
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固氮粪产碱菌胞外多糖的理化特性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
ＥＰＳ结构分析表明，ＥＰＳ突变株及工程菌株的糖骨架结构与野生型菌株相比有差异，尤其是ｎｔｒＣ－ｎｉｆＡ基因结合子Ａ１５３２的糖骨架结构明显不同于其它菌株，各个菌株之间，其侧链基因均稍有改变。ＥＴＩＲ证实，各个菌株ＥＰＳ中蛋白构象存在差异，ＥＰＳ中均有丰富的β折叠构象。ＥＰＳ丰富型突变株中无规卷曲构象所占比例较大，而野生型菌株中ＥＰＳ则没有无规卷曲构象。 相似文献
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应用Ａ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ｓｐ７的ｅｘｏＣ基因为探针，发现Ａ．ｆａｅｃａｌｉｓ Ａ１５０１具有与Ａ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ Ｓｐ７ ｅｘｏＣ基因同源的基因。Ａ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ ｅｘｏＣ基因能恢复Ａ．ｆａｅｃａｌｉｓ ＥＰＳ缺陷型（ＥＰＳ＾－）突变，表明粪产碱菌ＥＰＳ的产量为ｅｘｏＣ基因产物所调控。本工作已获得类似Ａ．ｂｒａｓｉｌｅｎｓｅ Ｓｐ７的ｅｘｏＣ－ｌｉｋｅ基因的克隆 相似文献
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本文阐述了ＩＣＰ－ＡＥＳ和ＡＡＳ在原理、火焰、检出限、精密度、干扰、分析速度、分析范围等方面的不同，比较了在测定土壤和植物中常量及微量元素时，如何根据ＩＣＰ－ＡＥＳ和ＡＡＳ的特性，选择进行测定，从而得到准确、合理的结果。 相似文献
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提出了在不用任何基体改进剂的条件下,用平台石墨炉原子吸收法测定土壤保水剂中铅、镉的方法。加标实验结果表明:铅、镉平均回收率分别为101%、98.4%。本方法切实可行。 相似文献
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蜡质芽孢杆菌超氧化物歧化酶(SOD)的纯化研究 总被引：9，自引：0，他引：9
蜡质芽孢杆菌经培养后,离心收集菌体,将菌体破碎,离心,经（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－７５凝胶过滤和ＤＥＡＥ－５２柱层析所获得的超氧化物歧化酶进行了ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳为一条带,亚基分子量为１７７８３Ｄ,表明制备得到了电泳纯品。将该样品经氰化钾,双氧水,氯仿－乙醇抑制实验和特征吸收光谱分析,鉴定出此酶为Ｆｅ－ＳＯＤ,比活为：１７５３．８ｕ。 相似文献
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研究出一种新方法用１ＭＮＨ４Ｃｌ从土壤中浸提出植物有效乐取５ｇ土样放入５０ｍｌ聚乙烯瓶中，加３０ｍｌ１ＭＮＨ４Ｃｌ溶液，在水平式振荡机上于２５℃以每１８０次的强度振荡１６小时。悬液以２５００ｇ离心５分钟，在真空条件下硝化纤维素滤纸过滤上清液。用配有石墨炉的原子吸收分光光度计在２２８．８ｎｍ处测定浸出液中的镉。结果表明，用１ＭＮＨ４Ｃｌ浸出的土壤镉量的对数（ｌｎ）与相应的土壤上生长出的硬质小麦籽粒中 相似文献
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用猪瘟兔化弱毒（ＳＦＶ—Ｃ）牛睾丸细胞培养上清液，经ＰＥＧ—２００００沉淀和蔗糖密度梯度离心提纯制备ＳＦＶ—Ｃ抗原，腹腔免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取抗体阳性的免疫小鼠脾细胞，在５０％（Ｗ／Ｖ）ＰＥＧ—４０００作用下，与ＳＰ２／０－Ａｇ１４小鼠骨髓瘤细胞进行融合，产生杂交瘤细胞。用间接ＥＬＩＳＡ法筛选阳性杂交瘤细胞株。通过有限稀释进行３次克隆，获得了２株分泌抗ＳＦＶ—Ｃ的单克隆抗体杂交瘤细胞株，并对其染色体形态和数目进行分析鉴定。 相似文献
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本研究克隆了萤光假单胞菌ＡＳ１．５５（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓＡＳ１．５５）的亮氨酸基因（ｌｅｕ＾＋）ＥｃｏＲＩ片段（－６．６ｋｂ）,并获得含有该片段的重组质粒ｐＢＲ３２２－ＬＥＵ。从ｐＢＲ３２２－ＬＥＵ质粒中分离出ｌｅｕ＾＋ＥｃｏＲＩ片段,将其插入到ｎｉｆＡ质ｐＭＣ７１Ａ的ＥｃｏＲⅠ位点使氯霉素抗性基因失活,从而构建了不带抗药性基因ｎｉｆＡ质粒ｐＭＣ７１Ａ－ＬＥＵ。 相似文献
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甘薯羽状斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及特异抗血清的制备 总被引：12，自引：0，他引：12
根据已报道的甘薯羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因的核苷酸序列合成引物,利用ＲＴ－ＰＣＲ的方法获得ＣＰ基因后,再将其克隆到原核表达载体ｐＥＴ３０ａ（＋）中。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,经ＩＰＴＧ诱导,ＣＰ基因在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中获得了高效表达。以含表达产物的凝胶为抗原,免疫家兔,制备了ＳＰＦＭＶ外壳蛋白的特异性抗血清。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ和点免疫（Ｄｏｔｂｏ 相似文献
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应用荧光探针ＦＭＡ和荧光胺，证明ＥＰＳ中多肽的一些基因如ＳＨ基和ＮＨ基参予了与 系粘质的相互作用。ＮＨ４＾＋浓度可诱导ＥＰＳ中ＳＨ基和ＮＨ基数量的变化，并导致ＥＰＳ中多肽的构象改变，ＥＰＳ中的这些基因在粪产碱菌与水稻根系的结合过程起了重要作用。 相似文献
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细粒棘球蚴生发层细胞系可溶性抗原的免疫学及SDS-PAGE分析 总被引：3，自引：0，他引：3
本研究报道了细粒棘球蚴生发展细胞可溶性抗原的免疫学研究结果及ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果，将原头节可溶性抗原，生发展可溶性抗原，囊液抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备抗血清并用原头节人工感染Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备阳性鼠血清，再用生发展细胞系可溶性抗原以间接ＥＬＩＳＡ法进行检测以观察该抗原的反应原性；用ｐＡｇ，ｇＡｇ，ＳＨＦ以及生发展分泌抗在分别对曾反种过细胞系细胞的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠的血清进行检测，以了解细胞系抗原 相似文献
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《南方农业》2017,(9)
采集了惠州稀土矿区的冬瓜、豆角、黄豆、空心菜、茄子和丝瓜6种蔬菜,研究了蔬菜样品处理方法,采用火焰原子吸收分光光度计和石墨炉原子吸收分光光度计分析了其中Ni、Zn、Cu、Cd、Cr、Pb和Mn的含量。结果表明:冬瓜、黄豆、豆角、空心菜和茄子的Pb含量超出国家标准限值(0.1~0.3mg/kg);各类蔬菜的Cd、Cr元素含量使用干法灰化法均未检出超标,Cd含量均比较低,用石墨炉法较好;黄豆的7种重金属含量均明显高于其余5种蔬菜。针对惠州地区稀土采矿区,研究稀土重金属在蔬菜中的污染情况,建立可靠可行的检测手段,对矿区稀土等重金属污染加以分析,为政府环境风险管理和决策、发展可持续的稀土经济提供参考。 相似文献
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我国花生矮化病毒（PSV）株系的血清学和壳蛋白基因序列分析 总被引：3，自引：0，他引：3
琼脂双扩散血清试验表明，参试的我国花生矮化病毒６个分离物和株系之间血清学关系十分亲近，而与美国ＰＳＶ－Ｅ和ＰＳＶ－Ｗ株系存在明显的差异。完成对花生致病力不同的ＰＳＶ－Ｍｉ和ＰＳＶ－Ｓ两个株系壳蛋白基因的ＲＴ－ＰＣＲ扩增，克隆和序列分析。 相似文献
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本研究分离并提纯苏云金芽胞杆菌８０１０菌株的质粒ＤＮＡ，经ＢａｍＨＩ／ＰｓｔＩ双酶解后与ＤＩＧ标记的ｃｒｙＩ基因ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段的ＲＮＡ探针杂交，显示出分子量分别为６．５６ｋｂ和４．４ｋｂ的阳性片段。用Ｂｌａｓｓｍｉｌｋ回收４．４ｋｂ的阳性片段并与双功能载体ｐＲＩＴ５重组，转化感受态大肠杆菌ＴＧ１细胞，通过斑点杂交和快检获得含４．４ｋｂ片段的克隆株Ｔ２，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳表明它表达了１３０ｋＤ 相似文献
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应用转化转导法把含有鼠伤寒沙门氏菌Ｉ相鞭毛蛋白基因的重组质粒ｐＨＩ１０１导入无鞭毛的减毒株ＳＬ５９２８中获得表达；经玻板凝集试验及动力抑制试验动力转导菌表达了相应的外源鞭毛蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ试验证实表达产物与野生型鞭毛蛋白的特性基本一致。 相似文献
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花生条纹病毒外壳蛋白基因cDNA的合成、克隆及全序列测定 总被引：3，自引：0，他引：3
自田间采集的花生病叶中提取花生条纺病毒（ＰＳｔＶ）总ＲＮＡ,人工合成引物Ｐ１、Ｐ２,通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增合成ＰＳｔＶ－ｃｐ的ｃＤＮＡ,并将其克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上。经限制酶谱分析后进行全序列测定,结果表明：该布１０８４个核苷酸组成,包含了ＰＳｔＶ－ｃｐ ｃＤＮＡ完整的８６１ｂｐ编码序列（编码２８７个氮基酸）以及３＇端２２３ｂｐ非编码序列,与文献报道的４个ＰＳｔＶ－ｃｐ基因具有较高的保守性。 相似文献