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猪常用疫苗基本特性及使用方法 总被引：1，自引：0，他引：1
(一)猪瘟疫苗免疫接种是预防和控制猪瘟的主要手段,目前我国瘟猪疫苗种毒均为猪瘟兔化弱毒,疫苗有组织苗和细胞苗2种类型。组织苗主要是利用猪瘟兔化弱毒接种3～5日龄乳兔,接种36小时后取乳兔的肝、脾及肌肉组织制成的疫苗。细胞苗是猪瘟兔化弱毒经犊牛睾丸细胞或ST细胞培养制成的疫苗,犊牛睾丸细胞有可能携带牛病毒性腹泻粘膜病病毒。生 相似文献
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猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞旋转培养制造猪瘟冻干苗的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
为了克服猪瘟兔化弱毒乳免疫苗成本高,易污染的缺点,弥补采用常规猪肾细胞制造猪瘟弱毒疫苗的潜在致病危险性。本文成功的在犊牛睾丸细胞上连续增殖猪瘟化弱毒,特别是利用次代或二代细胞进行转瓶堵养,收获的猪瘟兔化弱毒其毒价稳定,细胞不易老化脱壁。现已制成猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞培养冻干疫苗,生产工艺简单,成本较低。疫苗对猪的免疫原性良好,免疫期一年以上。性能稳定,在-15℃可保存13个月,4℃保存半年以上,25℃也可保存14天。经7691头猪的免疫接种试验,证明本苗安全,无一死亡,个别猪有反应,其反应率仅为0.74%。 相似文献
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猪瘟病毒流行株与疫苗株主要抗原编码基因差异研究 总被引：1，自引：0，他引：1
从全国7个省市1200多份可疑猪瘟病料中分离出9个猪瘟病毒（HCV）野毒株，编号分别为HCV－01－09。将9株野毒分别通过PK15细胞分别通过PK15细胞传6代，测其毒价，并提纯做电镜观察，结果表明：毒价范围在10^2-10^7TCID50，电镜观察均可清晰地见到直径为25－70nm，略呈圆形的病毒颗粒，具有较完整的囊膜和纤突结构。从9株野毒中选取5株经猪瘟阴性猪各传3－4代，测其毒力、病原性、致死性，结果表明：各毒株在传代中其上述生物学特性上有变化和差别。用猪瘟兔化弱毒疫苗分别对这5株野毒做免疫保护相关性试验，结果证明：攻毒后的疫苗接种猪100％保护，而攻毒对照猪100％死亡，且对照猪在攻毒1周后便出现猪瘟野毒感染，而免疫猪在整个观察期均未见到野毒感染。用不同剂量的猪瘟兔化弱毒，表明猪瘟兔化弱毒不通过胎盘垂直感染仔猪。将猪瘟野毒株、石门系强毒株、兔化弱毒株及1982年分离的郑州野毒等毒株进行主要抗原编码基因差异研究，结果表明：猪瘟病毒可分2个基因组6个基因亚组，HCV－02、03、06、07等4个野毒株与国内的C株、石门强毒株、国外的C株、日本GPE株、ALD株、意大利Brescia株均属同一基困组，而HCV－08株及郑州株等2个野毒与法国的Alfor株同属另一个基因组。 相似文献
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为观察蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的调节作用,选择高、中、低剂量(0.2mL/kg、0.1mL/kg、0.05mL/kg)的蟾酥注射液与猪瘟兔化弱毒疫苗联合使用作试验组,猪瘟兔化弱毒疫苗组、猪瘟兔化弱毒疫苗与盐酸左旋咪唑+黄芪多糖组、空白组作为对照。试验猪在用药前及首次用药后的7d、14d、21d、28d,通过静脉采集血液,用试剂盒检测血清中猪瘟免疫抗体效价和IL-2水平。结果显示,蟾酥注射液高、中剂量组能够显著提高接种猪瘟兔化弱毒疫苗猪的血清中抗体水平(p0.05);不同剂量蟾酥注射液对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫猪血清IL-2的产生具有不同程度的促进作用,其中蟾酥注射液高剂量组作用快,持续时间较长。本试验的结果说明蟾酥注射液是猪瘟兔化弱毒疫苗有效的免疫佐剂。综合考虑,推荐蟾酥注射液的临床应用剂量为肌内注射0.1mL/kg体重,1日2次,连用3日。 相似文献
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为了查找生产中原料兔接种猪瘟兔化弱毒C株病毒后定型热比例常低于70%的原因,观察了无猪瘟病毒抗体的8个批次,共3 512只中型齐卡肉兔对猪瘟兔化弱毒C株病毒的热型反应。结果:定型热占(91.3±1.5)%,轻热(5.8±1.2)%,可疑(1.8±1.5)%,无反应(0.9±0.7)%;8个批次的试验兔,对5个毒种代次的体温反应,差异不显著(P0.05)。研究认为,来自农村养兔户的原料兔,可能接触过猪瘟病毒,致定型热比例下降;无猪瘟抗体的中型齐卡肉兔,对不同代次的猪瘟兔化弱毒C株病毒均有良好的体温反应,可作为猪瘟弱毒疫苗(脾淋源)的原料兔。 相似文献
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为了消灭猪瘟,及时制止疫情的扩大,我們采用兔化猪瘟弱毒苗在疫区內接种效果很好澖τ猛没绲男Ч肮灿泄貑栴}提出探討: 一、疫区应用兔化猪瘟弱毒接种的效果利用兔化猪瘟弱毒(下簡称兔化苗)产生免疫力快的优点,我們曾用兔化苗来接种疫区內的健康猪,效果良好。如某县小桥公社的小桥、郭步两生产队,原有猪218头,今年二月发生猪瘟,半个月內,发病81头,死亡65头。后来应用福建省兽医生药厂批号“55”的兔化猪瘟弱毒冻干苗,按1:50 相似文献
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本试验对３个代次不同冻干日期的猪瘟兔化弱毒进行了兔体最小感染量测定,并对经猪瘟兔化弱毒Ｆ４７６代毒繁殖冻干的两批猪瘟兔化弱毒Ｆ４７９代毒进行了免疫原性鉴定。结果表明,猪瘟兔化弱毒在－７０℃条件下保存１４年、１５年、２９年,其兔体最小感染量均无明显改变;繁殖的两批猪瘟兔化弱毒的最小免疫量均为１０＾－５稀释１ｍｌ,符合《兽用生物制品规程》规定。 相似文献
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Studies on Transmissible Gastroenteritis of Swine I. The Isolation and Identification of a Cytopathogenic Virus of Transmissible Gastroenteritis in Primary Swine Kidney Cell Cultures 总被引：4，自引：3，他引：1 
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下载免费PDF全文 A. W. McClurkin 《Canadian journal of veterinary research》1965,29(2):46-53
Two virus isolates from transmissible gastroenteritis (TGE) of swine were adapted to grow in primary swine kidney cells. Growth of the virus was indicated by the resistance of the infected cells to the cytopathic effect of a virus diarrhea virus of cattle, and by the development of large round cells on the cell sheet.
Evidence that these virus isolates were TGE was obtained by the development of signs of the disease followed by death of exposed SPF pigs, or the resistance of the recovered pigs to further signs of disease when they were exposed to virulent TGE contained in virus bearing intestinal tissue.
The in vitro and in vivo serum neutralization tests, along with staining of infected cells by fluorescein conjugated TGE antiserum, gave further indication of the specific nature of the virus growing in the cell cultures.
相似文献12.
在实验室前期利用猪肾细胞（PK-15）CRISPR/Cas9全基因组敲除文库（PK-15-GeCKO）筛选到猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）复制相关的宿主因子磷酸十二烷基磷酸酯-葡萄糖基转移酶（ALG5）的前提下,深入研究ALG5与SIV复制的关系。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了包含ALG5基因向导RNA（gRNA）的质粒LentiGuide-puro-ALG5,并通过慢病毒包装感染稳定表达Cas9蛋白的新生猪气管上皮（NPTr）细胞系,采用有限稀释法筛选ALG5基因敲除的单克隆细胞株,通过靶基因组测序及Western blot验证了ALG5基因在NPTr细胞上的敲除水平,通过CCK-8试验验证基因敲除细胞和野生型细胞的细胞活性。结合TCID50和Western blot试验检测了ALG5敲除和过表达对SIV复制的影响。同时,检测了SIV感染NPTr细胞后内源性ALG5蛋白表达量的变化。最后检测了ALG5敲除对猪流感毒株F26复制的影响。结果显示：获得了ALG5敲除的NPTr单克隆细胞系（ΔALG5）,ALG5基因敲除细胞与野生型细胞的细胞活性无显著差异。ALG5基因敲除显著抑制SIV的增殖,过表达促进SIV的增殖。在病毒感染条件下,随着病毒的增殖,ALG5的蛋白表达量上调。ALG5基因敲除后,也可以抑制猪流感毒株F26的复制,无毒株特异性。本研究表明,ALG5是影响猪流感病毒复制过程的一个重要宿主因子,为研究猪流感病毒的复制和致病机制奠定了基础。 相似文献
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J. Tessler W. R. Hess I. C. Pan R. Trautman 《Canadian journal of veterinary research》1974,38(4):443-447
Suitably diluted cell culture adapted African swine fever virus preparations were inoculated on VERO cell monolayers and grown on coverslips. Gum tragacanth was used as an overlay. After three days incubation at 37°C the infected cultures were fixed with acetone and stained with fluorescent antibody conjugate. Fluorescing plaques consisted of 20-30 infected cells.
Three statistical criteria for a quantitatively reliable assay were met: the Poisson distribution for plaque counts, linearity of the relationship between the concentration of virus and the plaque count and reproducibility of replicate titrations. The method is suitable for counts up to at least 70 plaques per 5 cm2 coverslip and computed titers are reproducible within 0.16 log units with a total of 300 plaques enumerated.
相似文献14.
用ＥＬＩＳＡ检测了接种猪瘟疫苗猪的血清抗体。共计４８６份猪血样,检测到血清抗体阳性者４４１份,阳性率为９０．７４％。同时对其中的１１１份血清进行了自然强毒血清抗体的检测,检测到强毒抗体阳性４份,阳性率为３．６０％。结果表明青海省猪瘟疫苗注射密度较高,但也反映出在青海省猪群中可能存在猪瘟自然强毒感染。 相似文献
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The exhibition swine at agricultural fairs provides a critical human–swine interface that allows for the bidirectional transmission of influenza A virus (IAV). Previous IAV surveillance at the end of fairs has resulted in frequent detection of IAV‐infected swine; little is known, however, about the frequency with which swine arrive at fairs already infected with IAV. We investigated the IAV prevalence among exhibition swine entering fairs to better understand the epidemiology of IAV in this unique human–swine interface. In 2014, snout wipes were collected from 3547 swine during the first day of nine agricultural exhibitions in Indiana and Ohio. Samples were screened for IAV using rRT‐PCR and positive samples were inoculated into cultured cells for virus isolation. The overall IAV prevalence detected among swine arriving at exhibitions was 5.3% (188/3547) via rRT‐PCR and 1.5% (53/3547) via virus isolation, with IAV being detected and recovered from swine at 5 of the 9 exhibitions. Within the fairs with IAV‐positive swine, the individual exhibition IAV prevalence ranged from 0.2% (1/523) to 34.4% (144/419) using rRT‐PCR and 0.2% (1/523) to 10.3% (43/419) with virus isolation. Single IAV subtypes were detected at three of the fairs but subtype diversity was detected among the pigs at two fairs as both H1N1 and H3N2 were recovered from incoming swine. At two of the exhibitions, a temporal relationship was observed between the order of the individual swine in sampling and the associated IAV rRT‐PCR results, indicating the fomite transmission of IAV through common contact surfaces may occur. With the knowledge that a small proportion of swine arrive at fairs shedding IAV, resources should be directed towards preventive strategies focused on limiting transmission during fairs to protect swine and humans during exhibitions. 相似文献
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表达H3N2亚型猪流感病毒HA基因重组伪狂犬病病毒的构建 总被引：4，自引：1，他引：4
将SV40启动子控制下的LacZ基因表达盒和CMV启动子控制下的H3N2亚型猪流感病毒（SIV H3N2）的HA基因插入到伪狂犬病病毒（PRV）通用转移载体pBdTK-Uni中，获得转移载体pLTK-HA。将该载体与PRV Bartha-K61株基因组DNA通过脂质体法共转染Vero细胞，经过10代蓝斑筛选、纯化和PCR鉴定获得了一株插入SIV HA基因的重组伪狂犬病病毒，命名为rPRV-HA。Western blotting和间接免疫荧光试验证实HA基因在重组病毒感染的细胞中获得了表达。用不同的细胞（PK-15、IBRS-2、Vero和鸡胚成纤维细胞）对该重组病毒与亲本病毒的增殖滴度和致细胞病变进行比较，未见显著差异，对第30代重组病毒的HA基因进行序列分析，表明该重组病毒遗传性状稳定。 相似文献
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猪瘟病毒(CSFV)的E2蛋白是引起猪体产生针对猪瘟保护性抗体的主要抗原,构建可稳定表达CSFV E2蛋白的细胞系,可为E2蛋白功能研究及基因工程猪瘟疫苗的研制提供物质基础。本研究将CSFV E2基因克隆至慢病毒表达载体,构建重组慢病毒表达质粒pCDH-E2。将pCDH-E2重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,获得重组慢病毒。将该慢病毒感染BHK-21细胞,经嘌呤霉素抗性筛选结合有限稀释法筛选出可表达CSFV E2蛋白的BHK细胞系。Western blot分析结果显示,所构建的重组细胞系传至第10代仍能稳定表达CSFV E2蛋白。该细胞系的建立为研制猪瘟新型重组疫苗及其生产奠定基础。 相似文献
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本研究以伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)Ra株体外感染ST细胞为生物模型,通过透射电镜对PRV的增殖规律和致细胞病变的显微结构进行观察。结果显示,PRV能诱导ST细胞发生明显病变,细胞的病变程度与PRV感染时间密切相关。PRV Ra株感染ST细胞,病毒吸附于ST细胞表面,以膜融合内陷的方式进入细胞和细胞核内,在细胞核内复制,出现包涵体结构,以出芽方式离开细胞核,在高尔基体等细胞内膜结构处完成病毒粒子的囊膜化过程。感染前期,病毒通过膜融合方式被释放到细胞外,完成细胞间病毒的传播;感染后期,细胞溶解,大量释放病毒粒子。感染细胞超微结构的变化主要体现为:线粒体肿胀、数目减少,嵴面积减少,核内出现包涵体,细胞融合,细胞内空泡化严重,溶细胞现象。 相似文献
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非洲猪瘟病毒p62蛋白单克隆抗体的制备及初步应用 总被引：1，自引：1，他引：0
为制备非洲猪瘟病毒（ASFV）p62蛋白的特异性单克隆抗体,并初步应用于感染组织样品中ASFV抗原的免疫组化（IHC）检测,本研究以杆状病毒表达的非洲猪瘟病毒重组p62蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示：基于纯化的p62蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了18株可稳定分泌抗非洲猪瘟病毒p62蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA检测,制备的单克隆抗体均与非洲猪瘟病毒反应,且不与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型等猪源常见病毒反应,特异性良好。抗体识别蛋白的鉴定结果显示,3株MAbs识别p35蛋白,15株MAbs识别p15蛋白。14株MAbs重链亚类为IgG1型,4株MAbs重链亚类为IgG2a,轻链均为κ链。利用18株MAbs对ASFV感染猪的肺、扁桃体、淋巴结等组织进行IHC检测,结果显示5株MAbs均能够与感染ASFV的组织发生特异性的免疫反应。本研究获得的非洲猪瘟病毒p62蛋白单克隆抗体可为非洲猪瘟病毒免疫学检测方法的建立及p62蛋白的结构功能等基础研究提供重要的生物材料。 相似文献