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相似文献
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1.
本试验为了研究不同贮藏时间及温度对猪尿中莱克多巴胺快速检测的影响。向阴性猪尿中添加莱克多巴胺标准品配制成5μg/kg、50μg/kg和500μg/kg三个不同浓度后,分别在常温(室温)、冷藏(4℃)、冷冻(-20℃)条件下贮藏,于1、3、7、15、30d分别用酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法进行快速检测。结果表明,所有的猪尿样本都呈阳性,且检测到起始浓度为5μg/kg的样本随时间延长检测值降低,同时冷冻的保存效果最好。  相似文献   

2.
为研究不同贮藏时间及温度对猪尿中盐酸克伦特罗快速检测的影响,向阴性猪尿中添加盐酸克伦特罗标准品,配制成5、50、500μg/kg三个不同浓度后,分别在常温(室温)、冷藏(4℃)、冷冻(-20℃)条件下贮藏,于1、4、7、18、21、28 d用酶联免疫吸附法和胶体金免疫层析法进行快速检测。结果表明,所有的猪尿样本都呈阳性,且可检测到起始浓度为5μg/kg的样本随时间延长检测值降低,同时冷冻的保存效果最好。  相似文献   

3.
本试验旨在研究不同pH对酶联免疫法检测猪尿样中莱克多巴胺含量的影响。向阴性猪尿中添加莱克多巴胺标准品,配制浓度为5μg/kg、50μg/kg和500μg/kg,用盐酸和氢氧化钠将不同浓度的猪尿pH分别调为4、5、6、7、8、9,并用酶联免疫法进行快速检测。结果表明,所有猪尿样本均呈阳性,且不同pH对不同浓度快速检测无影响。  相似文献   

4.
本文探讨了酶联免疫吸附法(ELISA)测定猪尿中沙丁胺醇的效果。在猪尿中添加1、2、4和8ng/m L四个不同浓度的沙丁胺醇,利用ELISA法测定回收率。结果显示,猪尿中沙丁胺醇在0~8.1ng/m L范围内的回收率在86.0~94.5%之间,精密度在3.9~11.6%之间,说明ELISA法检测猪尿中沙丁胺醇结果相对稳定、可靠,能够满足初检筛选要求,是一种值得在基层检测部门推广使用的方法。  相似文献   

5.
动物尿液中沙丁胺醇残留检测试纸条的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了制备可用于检测动物尿液中沙丁胺醇(SAL)残留的试纸条,试验采用胶体金免疫层析方法,首先将小分子SAL进行改造,并在此基础上制备SAL抗原和抗SAL抗体,进而制备得到胶体金标记抗体,然后将其喷涂于胶体金结合垫,并与样品垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水纸及塑料底板组装,得到SAL检测试纸条。结果表明:试纸条对猪尿、牛尿、羊尿中SAL的检测限为3.0μg/L,检测时间为5 min,特异性高,重复性良好,与仪器检测方法结果一致,可用于动物尿液中SAL的现场快速检测和筛选工作。  相似文献   

6.
为探讨酶联免疫法(ELISA)检测饲料中沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的前处理方法,试验对提取液的pH、离子强度、有机溶剂浓度及样品稀释倍数等条件进行了考察,选取最适宜的提取液条件对2种不同类型的饲料样本进行提取,用ELISA测定样品中沙丁胺醇的残留量。结果表明,沙丁胺醇标准曲线的IC50值为0.606 ng/mL,线性范围为0.221~1.658 ng/mL,R2=0.9998,提取液的pH为7.5,PBS缓冲液最优浓度为0.06 mol/L,稀释倍数为10倍,2种不同类型的饲料样本的检测限(LOD)为5.0 ng/mL。当沙丁胺醇的添加浓度为5、10 μg/kg时,该方法的添加回收率为77%~110%,变异系数<8%。  相似文献   

7.
为了现场灵敏、特异、快速地检测猪尿中莱克多巴胺(RAC)的残留情况,试验用胶体金标记RAC单克隆抗体构建一种能够快速检测猪尿中RAC的免疫层析试纸条,通过正交试验优化试纸条中标记抗体的量、胶体金结合垫上胶体金单克隆抗体(CG-mAb)溶液的体积和牛血清白蛋白封闭的莱克多巴胺(RAC-BSA)的浓度得到最优组合,并测定试纸条的特异性、稳定性、检测时间和检测限。结果表明:经过优化后得到的最优组合为标记抗体的量1.5μg/mL,胶体金结合垫上CG-mAb溶液的体积1.5μL,RAC-BSA的浓度0.2 mg/mL;该试纸条可在3 min内特异性地检测RAC,检测限为3 ng/mL,在室温条件下能保存12个月。说明试验构建的快速检测猪尿中RAC试纸条能达到现场使用的要求,适用于快速筛查猪尿中RAC的残留。  相似文献   

8.
《畜牧与兽医》2016,(9):45-50
为探讨蛋氨酸碘杀灭病原菌的效果和对精子质量的影响,以达到阻断病原菌垂直传播的目的,本试验以大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌为试验菌株,通过肉汤二倍稀释法研究蛋氨酸碘的抑菌作用;利用不同浓度的蛋氨酸碘溶液处理猪精液,在保存后不同时间点取样进行精液接种和培养,用细菌菌落计数的方法检测细菌菌落总数,采用显微镜镜检法检测精子活力、精子快速染液染色检测顶体完整性和低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整性。结果显示,蛋氨酸碘对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为100μL/L;用蛋氨酸碘消毒猪精液时,在0~400μL/L随着蛋氨酸碘溶液体积浓度的增加杀菌效果越好,保存4、5、6 d时100、200、400μL/L处理组与对照组相比细菌菌落数低,且差异显著(P0.05);在猪精液稀释液中添加体积浓度0~100μL/L的蛋氨酸碘对17℃保存猪精子质量无影响,保存3、4、5、6 d时200、400μL/L的处理组与对照组相比,精子活力、质膜完整率和顶体完整率明显降低(P0.05)。表明蛋氨酸碘在体积浓度100μL/L能很好地抑制病原菌的生长,且对17℃保存猪精子质量常规指标(活力、质膜完整率和顶体完整率)无显著影响。  相似文献   

9.
HPLC法测定猪血浆中帕托珠利的方法学建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
建立了HPLC法测定猪血浆中帕托珠利含量的方法。色谱柱为安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相0.2%乙酸水溶液-乙腈(47∶53),柱温35℃,流速为1 m L/min,检测波长为250 nm。在本方法条件下,帕托珠利在0.1~10μg/m L浓度范围内线性关系良好(r0.999),检测限(LOD)为0.04μg/m L,定量限(LOQ)为0.1μg/m L,批内和批间回收率均大于90%,批内和批间精密度RSD均小于9%。本方法简单、准确、快速,可用于测定猪血浆中帕托珠利的含量。  相似文献   

10.
本试验旨在采用重氮化法合成的免疫抗原通过免疫BALB/c小鼠进行融合,获得高特异、高灵敏度的单克隆抗体。在建立磺胺二甲嘧啶单克隆抗体(SM2 mAb)杂交瘤细胞株和阻断ELISA的基础上,初步研制出一种一步法检测磺胺二甲嘧啶(SM2)的ELISA快速检测试剂盒(SM2-Kit)。结果表明:SM2-Kit检测范围为0.5~40.5μg/L,检测时间为30 min,IC50为1.4μg/L,最低检测限达0.1μg/L。经大量现场试验,猪肉组织最低检测限为1μg/kg,猪饲料最低检测限为1μg/kg,猪尿最低检测限为1.8μg/L,牛奶最低检测限为1.5μg/L,测试的回收率平均在70%~110%。  相似文献   

11.
鱼精蛋白具有一定的抗菌效果和保护精子的作用,为探讨不同浓度的鱼精蛋白对猪精液17℃保存效果的影响,本实验在Modena稀释液中分别添加0、5、10、20μg/m L的鱼精蛋白,在常温保存过程中,检测精子活率、路径速度、直线速度、畸形率等质量参数。结果表明:精液在17℃保存过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白,精子活率、路径速度、直线速度显著高于其他组(P0.05),畸形率显著低于其他组(P0.05)。综上可知,17℃保存的过程中,在Modena稀释液中添加10μg/m L的鱼精蛋白能够提高精液的保存效果,延长猪精液的保存时间。  相似文献   

12.
本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1~3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。  相似文献   

13.
《畜牧与兽医》2015,(12):136-140
为了优化尿液中沙丁胺醇检测前处理过程中的酶解条件,以绵羊沙丁胺醇阳性尿液为研究对象,利用单因素试验,通过比较酶解及不同酶解条件(温度、时间、酶使用量)下沙丁胺醇含量测定结果,确定最佳酶解条件。结果表明:酶解是尿液中沙丁胺醇检测前处理的必要环节,其最优条件为温度37℃,酶解16 h,60μL添加量。在此条件下酶解效率最高,稳定性较好。  相似文献   

14.
为了探讨不同浓度肝素对塔里木马鹿精子体外获能的影响,试验随机取塔里木马鹿冻融精子,添加到SP-TALIP获能液中并添加不同浓度(0,10,20,50,100μg/m L)的肝素,在显微镜下检测0,2,4,6,8小时时的精子活力,试验采用金霉素(CTC)染色法检测精子获能率及顶体反应率等指标,探讨不同浓度肝素对塔里木马鹿精子活力、存活时间、获能率、顶体反应率的影响。结果表明:精子活力随肝素浓度升高而呈下降趋势,4 h后10μg/m L和20μg/m L肝素组精子活力显著高于其他组(P0.05),其中20μg/m L肝素组精子存活时间最长,显著高于其他组(P0.05)。随着培养时间的延长,各试验组精子获能率与对照组相比明显提高,2小时、4小时时20μg/m L肝素组精子获能率显著高于其他组(P0.05);各试验组精子顶体反应率与对照组相比有升高趋势。说明获能液中添加20μg/m L肝素可有效诱导塔里木马鹿精子体外获能。  相似文献   

15.
利用流式细胞术可以快速、准确地鉴定植物染色体倍性,但需要针对不同植物样本的制备及具体操作对应用方法进行选择和优化。为了建立适合桑树染色体倍性快速鉴定的流式细胞术应用方法,以桑树幼叶为材料,比较以不同解离液及机械解离方法和不同离心漂洗次数制作样本用流式细胞术检测的效果,并用不同染色体倍性桑品种的幼叶为材料,以效果最佳的方法进行验证试验。优化的样本制备方案为:采集0.2 g桑树幼叶,置于预冷的平面玻璃上,加入Mg SO4解离液后,用双面刀片快速切碎,转移至培养皿中静置3~5 min,用300目细胞筛网过滤至1.5 m L离心管中,得到500μL单细胞核悬浮液,再加入PI溶液(最终质量浓度为50μg/m L)和RNase A溶液(最终质量浓度为30μg/m L),4℃避光环境下染色30 min,经300目细胞筛网过滤后用流式细胞仪检测。如果采集叶片后不能立即进行检测,可在-80℃下保存待测。试验结果还表明,用在-80℃保存10 d和40 d的冷冻幼叶与用新鲜幼叶制备的样本所得到的检测效果相似。初步建立的适合桑树染色体倍性鉴定的流式细胞术应用方法效果最佳,具有细胞碎片少、主峰清晰、杂峰少等优点。  相似文献   

16.
本研究旨在制备性能优异的克伦特罗(clenbuterol,CLB)、莱克多巴胺(ractopamine,RAC)和沙丁胺醇(salbutamol,SAL)荧光免疫层析快速定量检测试纸条,并对该试纸条的检测范围、检测限、准确度、精确度、假阳性、假阴性及其与仪器方法的符合率进行评价。结果显示,克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条标准曲线范围分别为0~3.2、0~6.4、0~8.0μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇试纸条检测下限分别可达0.2、0.4和0.5μg/L;克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇与其他8种同类药物交叉反应均成阴性,特异性良好;各批添加回收率在60%~120%之间,准确度达到要求;不同克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇浓度下变异系数(CV)均小于15%,符合精密度标准;猪尿中假阳性率和假阴性率均为0;此外与仪器方法的符合率为100%。试纸条适用于猪尿中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺残留快速检测,具有灵敏度高、稳定性好和特异性强的特点。  相似文献   

17.
用酶联免疫吸附法对猪尿中莱克多巴胺进行了残留检测,结果:该方法的最低检测限为0.92μg/L;50%抑制浓度的平均值为2.7μg/L;回收率在(65.2±3.9)%(~86.6±6.1)%,批内变异系数≤17.8%,批间变异系数小于≤15.6%。试验表明该方法可用于莱克多巴胺残留量的筛选检测。  相似文献   

18.
为研究猪精子在17℃负压环境下保存时不同浓度恩诺沙星对精子质量的影响,并探讨恩诺沙星的最适添加浓度,试验在Modena基础稀释液中添加不同浓度恩诺沙星并在17℃负压环境下保存猪精液,利用迈朗全自动精子质量检测仪等检查猪精子活率、路径速度、直线速度和畸形率。结果表明:恩诺沙星浓度为50μg/L时,精子活率、路径速度、直线速度和畸形率都显著高于其他浓度(P0. 05)。说明50μg/L的恩诺沙星有利于17℃负压环境下猪精液的保存。  相似文献   

19.
本研究旨在建立饲料中17种霉菌毒素的液相色谱串联质谱快速分析方法。样品用甲醇∶水(80∶20,v/v)混合溶剂超声提取,经离心后提取液直接用0.1%甲酸溶液(5 mmol/L乙酸铵)稀释后进行液相色谱-串联质谱分析。采用Acquity BEH C18色谱柱分离,用0.1%甲酸溶液(5 mmol/L乙酸铵)-甲醇作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式电离(雷索酸内酯类化合物为负离子模式),多反应监测模式检测,基质校准外标法定量。各物质峰面积与样品质量浓度(6种黄曲霉毒素浓度范围0.15~25μg/L,T-2和HT-2浓度范围为0.25~25μg/L,赫曲霉毒素A浓度范围为0.125~12.5μg/L,2种伏马毒素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度范围为5~500μg/L,5种雷索酸内酯类化合物浓度范围为1.25~250μg/L)呈良好的线性关系,线性回归系数均大于0.99。添加回收实验结果表明,17种霉菌毒素猪、鸡配合饲料中平均添加回收率在77.5%~90.9%,批间RSD在4.30%~9.13%。17种霉菌毒素在猪、鸡配合饲料中的检测限为0.50~10.0μg/kg,定量限为2.50~30.0μg/kg。该方法能满足饲料中17种霉菌毒素含量分析的要求。  相似文献   

20.
为提高猪精液常温保存效果,本试验探讨17℃保存过程中,在Modena稀释液在不同浓度辅酶Q10(Co-Q10)(0、10、15、25、35μg/mL)对猪精液质量的影响。在17℃条件下每隔24 h检测不同组的精子活力、pH,每隔48 h检测精液的渗透压、精子线粒体活性和质膜完整率。结果表明:保存第5天,25μg/mL Co-Q10组精子活力、线粒体活性、质膜完整率均高于其他组(P<0.05),pH下降速度也最慢,并且对渗透压变化影响不大。综合考虑Co-Q10在猪精液17℃保存中的适宜添加浓度为25μg/mL。  相似文献   

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