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1.
应用混合纤维素酯微孔滤膜作固相支持物进行斑点-ELISA(Dot-ELISA),对1337头份猪血清作了猪伪狂犬病血清抗体的检测。应用猪伪狂犬病高免血清和自然感染阳性血清作阻断试验,证明了本实验的特异性。猪瘟高免血清、猪细小病毒阳性血清、猪轮状病毒阳性血清、猪流行性腹泻阳性血清及未注过苗的健康猪血清均为阴性。与常规的病毒血清中和试验(NT)进行比较,Dot-ELISA阳性检出率为28.19％(53/188),NT阳性检出率为20.74％(39/188),前者的敏感性显著地高于后者。本法的优点是操作简便、省时、快速,不需特殊仪器设备,可用肉眼判定,诊断膜与试验标本膜可长期保存,适于基层单位的诊断和流行病学调查。 相似文献
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将A型魏氏梭菌培养液经蔡氏滤器过滤,硫酸铵沉淀,再经Sephadex G-200柱层析,收集毒素峰洗脱液,浓缩后制备A型魏氏梭菌毒素纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体,制备检测兔魏氏梭菌抗毒素的快速诊断膜。用Dot-ELISA检查6只魏氏梭菌高免兔的血清均呈阳性反应,对13只兔轮状病毒(LaRV)阳性血清、13只兔大肠杆菌(E.Coli)阳性血清、15只兔巴氏菌感染兔、16只波氏菌感染兔、9只葡萄球菌感染兔及27份健康兔血清检查均为阴性。A型魏氏梭菌阳性血清均可被特异性抗原所阻断。Dot-ELISA与SPA-ELISA对比差异不显著(P>0.05),两者阴、阳性符合率为89.06％。试验结果证明,本方法特异性强、敏感性高、操作简便、快速。为该病的监测净化提供了一种准确检验方法。 相似文献
3.
Dot—ELISA检测兔血清中兔轮状病毒抗体方法的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
应用生长良好的第２４～４３代ＭＡ１０４传代细胞接种兔轮状病毒（ＬａＲＶ），待出现９０％以上细胞脱落时收获病毒液，制作纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体，制备检测ＬａＲＶ抗体的快速诊断膜，进行Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，检查１０只人工感染兔血清，于感染后第１０天出现阳性反应，２１天全部阳转。应用该方法做了ＬａＲＶ阳性血清阻断试验、其它病的兔血清排除试验，对３８只健康兔血清的检查均为阴性。利用Ｄｏ 相似文献
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以混合纤维素酯微孔滤膜作为 Dot-ELISA 固相载体,HRP-SPA 代替酶标抗犬 IgG 抗体,用于检测犬传染性肝炎病毒抗体,并与微量血清中和试验比较。结果表明,Dot-ELISA 具有良好的重复性、敏感性和特异性,能客观地反映犬体抗体水平变化。经对165头太血清检测,阳性传出率为54.5%。该方法简便易行,不需复杂仪器,宣于推广使用。 相似文献
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应用生长良好的第２４～４３代ＭＡ１０４传代细胞接种兔轮状病毒（ＬａＲＶ），待出现９０％以上细胞脱落时收获病毒液．制作纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体．制备检测ＬａＲＶ抗体的快速诊断膜，进行Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，检查１０只人工感染兔血清．于感染后第１０天出现阳性反应，２１天全部阳转。应用该方法做了ＬａＲＶ阳性血清阻断试验、其它病的兔血清排除试验，对３８只健康兔血清的检查均为阴性。利用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对１３１６份兔血清的检查中．群养兔阳性率８３．５９％，散养兔为２７．５％。试验结果证明本法特异性强、敏感性高，操作简便、快速．适于现地ＬａＲＶ免疫监测及流行病学调查。 相似文献
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应用Dot-ELISA检测结核病牛血清抗体效价 总被引：1，自引：0，他引：1
用牛型结核菌菌体蛋白(PP)及提纯牛结核菌素(PPD)作抗原,硝酸纤维素滤膜(NC 膜)作载体。以斑点-酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测了30份结核菌素变态反应阳性牛及30份非结核病牛血清中的抗体效价。结果证实,Dot-ELISA 与变态反应符合率很高(20/30),只有简便、快速、经济及适于现场推广应用等优点,可望在今后牛结核病检疫中取代变态反应和常规 ELISA. 相似文献
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以二倍体顿河红豆草为实验材料,运用组织培养法和香草醛-盐酸法筛选优良浓缩单宁高表达的细胞系。用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,对同一细胞系不含浓缩单宁(CT-)愈伤组织和含有浓缩单宁(CT+)愈伤组织蛋白质进行鉴定。用制备型SDS-双向电泳对目标蛋白进行纯度分析,以及用SDS-PAGE法和IEF(等电聚焦)法测定该目标蛋白质分子量和等电点。最后经电印渍技术,将目标蛋白质转移至固相膜上进行氮端氨基酸序列分析。结果表明,筛先出10个优良浓缩单宁合成细胞系和相同基因型愈伤组织增殖细胞系。同一细胞系含有浓缩单宁愈伤组织比不含者多一条蛋白带,该蛋白分子量为28kD,等电点为5.7。该电印渍法将蛋白印渍至PVDF(聚偏二氟乙烯)膜上的效率较高。并测定了氮端部分氨基酸序列。 相似文献
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新城疫快速诊断试纸条的研制及初步应用 总被引：5，自引：1，他引：4
以红色胶体金标记鸡新城疫(ND)抗体，兔抗鸡ND抗体和兔抗鸡二抗包被于硝酸纤维素膜上，研制出快速诊断鸡新城疫的免疫层析测试条。将试纸条插入样品中，利用滤膜的层析作用，使加在膜一端的样品，向另一端移动，在移动过程中抗原与抗体发生反应，产生肉眼可见的红色条带。该法具有操作简便、快速准确、特异性强、重复性好，无需任何仪器设备等特点，对于鸡场中快速诊断及防治本病具有重大意义。 相似文献
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应用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)orngonC_(24)株作抗原,混合纤维素微孔滤膜作固相载体,制备检测猪瘟(HC)抗体的快速诊断膜,进行斑点-ELISA(Dot-ELISA)试验.结果,以 HC 高免血清和自然感染 HC 猪阳性血清作阻断试验,证明了本方法的特异性:猪轮状病毒阳性血清、猪流行性腹泻阳性血清、猪细小病毒阳性血清及断奶后未注射任何疫苗的健康猪血清均为阴性;断奶前后和未注苗仔猪血清几何平均效价低于1:40;注苗猪效价为1:70～1:160;注苗后又爆发,流行 HC 场的猪血清效价为16:10～1:320;未注苗爆发 HC 场的猪血清抗体效价与未注苗猪相似。本法特异性强、敏感性高、操作简便快速,适于现地 HC 免疫监测及流行病学调查. 相似文献
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据《农业科技要闻》报道,浙江省农科院病毒室运用现代生物技术,研制成功一种能够分泌抗猪水泡病的单克隆抗体杂交瘤的细胞株。主要操作步骤是以微孔滤膜或硝酸纤维素膜为固相载体,将猪水泡病抗原固定在滤膜上与该病酶联单克隆抗体试剂结合,经底物显色反应,用肉眼判断试验结果。试验表明,该抗体具有持异性强、灵敏度高、操作简便、诊断快 相似文献
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禽流感抗体斑点—ELISA诊断技术的研究 总被引：22，自引：1，他引：21
以混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体,用自制的禽流感全病毒抗原和酶标抗体,建立了禽流感抗体斑点 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测法,其抗原最适包被量为 ０．０６μｇ／点;血清抗体最佳稀释度为 １１００;酶标抗体作 １２００ 稀释;出现明显清晰的斑点者判为禽流感抗体阳性。该方法对 Ｓ Ｐ Ｆ鸡血清及新城疫、传染性法氏囊病等其它 １１ 种鸡疫病阳性血清均为阴性,对不同亚型特异性的禽流感病毒（ Ａ Ｉ Ｖ）分型血清、琼扩（ Ａ Ｇ Ｐ）阳性血清及血凝抑制（ Ｈ Ｉ）阳性而 Ａ Ｇ Ｐ疑似的血清样品均呈阳性;对人工接种 Ａ Ｉ Ｖ 的 Ｓ Ｐ Ｆ鸡第 ３ 天即能检出抗体阳性,第 ５～１１７ 天可全部检出。与间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法比较,不仅其特异性、敏感性、重复性相一致,而且结果可用肉眼判定,更适合现地禽流感抗体监测及流行病学调查。 相似文献
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为了解新疆养马集中县域马腺疫链球菌的感染情况及流行特点,在新疆特克斯县、昭苏县、富蕴县和吉木乃县采集2 549份马血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马血清中的马腺疫链球菌抗体。结果表明,被检样品的马腺疫链球菌抗体平均阳性率为23.93%,昭苏县及特克斯县的血样中马腺疫链球菌抗体阳性率较高,分别为30.30%和26.64%,吉木乃县抗体阳性率为4.34%。结果表明,新疆不同地区马腺疫链球菌血清抗体阳性率差异显著(P0.05),抗体阳性率随马匹年龄的增长不断提高,0~1岁马抗体阳性率最低(P0.01),马腺疫链球菌抗体阳性率性别差异不显著(P0.05)。 相似文献
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1.为促进神经功能的恢复,用0.2％硝酸士的宁5毫升、75％酒精10毫升,混合注入患部肌肉,每日1次,连用4～5日为一个疗程。 2.10％葡萄糖30～40毫升、维生素B_(12)5～10毫升,混合注入抢风穴(马、牛前肢肩端与尺骨上头连线中点凹陷处),隔日注射一次,连续5～7次为一个疗程。 相似文献
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《中国预防兽医学报》2017,(7)
为了解新疆伊犁地区的马鼻肺炎、马腺疫及马流产沙门菌病的流行现状和特点,本研究从新疆伊犁地区养马最为集中的10个乡镇和3个国有马场采集了818份血清样品。分别采用ELISA法和微量凝集法进行马疱疹病毒(EHV)、马腺疫链球菌(S.equi)和马流产沙门菌(S.abortus)的抗体检测,并应用统计学方法从年龄、性别、地域及养殖规模等方面对影响这3种病感染的风险因素进行了分析。检测结果显示该地区EHV抗体阳性率为28.85%,S.equi抗体阳性率为24.69%,S.abortus抗体阳性率为25.31%。性别和年龄对马鼻肺炎感染影响显著(p0.05)。地域和年龄对马链球菌抗体阳性率的影响显著(p0.05);地域对马流产沙门菌抗体阳性率的影响显著(p0.05)。马疱疹病毒(EHV)和马腺疫链球菌(S.equi)的混合感染率较高。本研究为新疆地区马的这3种传染病有效防控提供了调查数据。 相似文献
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研究确定用1:2.5～1:3补体与1:2鼻疽血清等量混合后,滴加于含1:5鼻疽抗原致敏红细胞的琼脂糖凝胶反应盘的相应孔中,置于4℃或15～29℃下感4～12h,可以产生直径在8.1mm以上的溶血环。对健马及马传贫等6种传染病马血清做检测,则不引起溶血反应。以31匹M~+马血清的CFT结果和扑杀10匹鼻疽马血清的CFT及病理组织学变化做依据,确定了固相溶血试验(S_p—HLT)的判定标准,即溶血环直径在6.0～7.0mm的为阴性,7.1～3.0mm的为疑似,8.1mm以上的为阳性。以此标准检测了411匹马(来自鼻疽疫区的368匹.鼻疽清净区健马43匹)。结果,疫区马血清CFT阳性率为5.2％,Sp—HLT阳性率为7.6％;43匹健马血清的CFT和Sp—HLT均为阴性。Sp—HLT检测方法简便,快速,检出率较CFT略高,从病理组织学角度考虑并非假阳性。由此认为,用Sp—HLT代替CFT进行鼻疽检疫是可行的。 相似文献