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相似文献
 共查询到19条相似文献,搜索用时 386 毫秒
1.
将AEV VR株种毒经卵黄囊接种6日龄SPF鸡胚复壮,然后取复壮的病毒作为种毒经卵黄囊接种6日龄SPF鸡胚扩大培养病毒,继续孵化至18日龄,收取病变明显的鸡胚脑组织、胰腺和小肠,充分研磨后经差速离心和CsC l密度梯度离心提纯AEV,取经密度梯度离心后的样品进行电镜观察其纯度,并经脑内接种1日龄SPF雏鸡观察其致病情况及其病理变化,结果证明获得了纯化的AEV。  相似文献   

2.
利用鸡胚成纤维细胞培养禽脑脊髓炎病毒的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用鸡胚成纤维细胞 (CEF)培养禽脑脊髓炎病毒 (AEV) ,经过六次盲传发现 :AEV在 CEF上无细胞病变 (CPE) ,但利用 CEF细胞上清接种 SPF鸡胚 ,可产生不同程度的 AE鸡胚病变。分别取不同时间的感染细胞上清 ,测定 AEV浓度 ,结合培养条件 ,进而确定 AEV培养的最佳时机。结果表明 :以 AEV在 CEF上培养 7天最好 ,病毒滴度可达 10 2 .8EID50 / 0 .2 ml。将经 CEF培养的 AEV差速离心 (浓缩约 5 0 0倍 ) ,接种 SPF鸡胚 ,可产生典型的鸡胚病变 ,其滴度为 8× 10 5.0 EID50 / 0 .2 m l。通过 Cs Cl密度梯度离心提纯病毒 ,在电镜下观察到了大小基本一致的病毒粒子 ,病毒直径约为 2 5 nm。利用 AEV感染的 CEF或通过“细胞飞片”制备荧光片 ,建立了间接免疫荧光快速检验 CEF是否感染 AEV的方法。  相似文献   

3.
为探索禽脑脊髓炎病毒强毒VR株对SPF鸡的致病性,开展了不同接种途径和不同日龄SPF鸡的致病力试验。不同接种途径致病力试验结果表明,AEV VR株口服后不能引起发病;刺种、肌肉注射途径接种随着日龄增大,发病率降低;脑内注射途径接种可引起试验鸡全部发病。最小致病量试验结果显示,VR株脑内注射攻毒的最小致病量为10~(2.0) EID_(50)。不同日龄SPF鸡的致病力试验结果表明,随着试验鸡日龄的增大,其致病力略有差异,日龄越小,发病率越高。结果表明,AEV VR株脑内攻毒70日龄内SPF鸡的发病率为80%及以上,攻毒剂量为10~(4.0)EID_(50)。  相似文献   

4.
禽脑脊髓炎病毒的分离与初步鉴定研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过SPF鸡胚连续快速传代,从自然发病雏鸡脑组织中分离出一株食脑脊髓炎病毒(AEV),经鸡胚接种,雏鸡接种、琼脂扩散试验和电镜观察,初步鉴定该株病毒为AEV,暂命名为AEV-SD961株。  相似文献   

5.
禽脑脊髓炎琼扩抗原的研制和应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
将禽脑脊髓炎病毒(AEV)陕西分离株接种于6日龄鸡胚卵黄囊,16日龄时收取活胚脑、胃肠道和胰腺,匀浆灭活后制成琼扩抗原,该抗原与AE标准阳性血清在36h内出现特异性的沉淀线,而与ND、EDS-76、AI、IB阳性血清及SPF鸡血清不出现沉淀线,用其检测60份血清,48份呈AE阳性,与用标准抗原检测的结果一致。  相似文献   

6.
用蔗糖密度梯度离心法进行了禽脑脊髓炎病毒的纯化.将禽脑脊髓炎病毒(AEV)L2Z株、Van Roekel株和1143株分别经卵黄囊接种6日龄SPF鸡胚,接毒后13天,收集脑、消化道及胰腺,用玻璃匀浆器制成10%的组织悬液.组织悬液经3次反复冻融后,以4500r/min离心15min,取上清液.而后用氯仿处理,取水相,经冷冻真空浓缩,进行不连续蔗糖密度梯度离心.取出含AEV的组分,用PBS稀释后超速离心除去蔗糖,得到提纯的病毒.病毒样品经2%磷钨酸负染,于电镜下观察可见典型的病毒粒子,大小为24~28nm.  相似文献   

7.
试验旨在研究实验室条件下人工感染对禽网状内皮组织增生症病毒(REV)非缺陷型毒株SNV致瘤能力的影响。通过将SNV株人工接种于7日胚龄SPF鸡胚、1日龄SPF雏鸡以及鸡胚成纤维细胞(CEF),动态观察被感染鸡只内脏器官肿瘤发生的特点与规律,同时监测CEF的分裂增殖能力及生长状态。结果表明:鸡胚接种SNV株后肿瘤发生的时间提前,最早可在2周龄雏鸡的肝脏、肾脏等器官发现网状细胞瘤及其他细胞的异常增生灶;免疫组化检测结果进一步显示这些异常生长的细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)表达量上升。CCK-8及β-半乳糖苷酶检测结果显示,感染SNV株的CEF增殖能力增强且衰老减缓;Western-blot结果进一步显示,感染组CEF中的PCNA表达量显著上升。由此可知,在实验室条件及人工接种等因素的影响下,原先具有慢性致瘤作用的SNV株致病能力已发生改变,表现为机体发生肿瘤的时间提前和体外培养的细胞异常增殖。  相似文献   

8.
从发病雏鸡脑中分离到一毒株,该毒株能使SPF鸡胚66.7%死亡。攻击非免疫鸡脑内组100%致死,口服组66.7%发病,死亡率为41.7%,临床症状与野外病例相吻合。病理切片显示,脑内各类种经细胞,尤其是星形胶质细胞有不同程度的变性及灶性液化坏死。经生物学、血清学及理化特性测定,证明该分离物为AEV,暂定名为AEV-SF株。  相似文献   

9.
单抗间接Dot-ELISA检测禽脑脊髓炎病毒抗原的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
利用制备的禽脑脊髓炎病毒 (AEV)单抗建立了检测AEV抗原的间接Dot ELISA方法 ,对AEV最低检出量为 1 6 0 8μg/mL。人工感染 1日龄SPF鸡 ,取发病鸡 (6~1 3日龄 )相应病料 ,各病料样本阳性检出率分别为 :脑 1 0 0 % ,胰 96 % ,十二指肠 98% ,腺胃 98%。对 40份临床自然发病鸡病料检测 ,阳性检出率为 92 %。对 1 0份AEV病原分离阳性样品 ,检测阳性率为 1 0 0 % ,而SPF鸡对照均为阴性  相似文献   

10.
禽脑脊髓炎病毒VR株衣壳蛋白基因的克隆及序列分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
用冻存的禽脑脊髓炎病毒Van Roekel(AEV VR)株通过SPF鸡胚传代复壮,获得了试验用病毒株样本。根据已知禽脑脊髓炎病毒1143(AEV 1143)株的衣壳蛋白VP0、VP3、VPl基因序列,设计了3对引物,分别扩增AEV VR株的VP0、VP3、VP1基因,将RT-PCR产物进行分子克隆和序列分析。结果表明,AEVVR株与AEV1143株VP0、VP3、VP1基因的核苷酸同源性分别为95.1%、93.6%和93.9%;氨基酸的同源性分别为97.57/6、97.5%和99.6%。  相似文献   

11.
The diagnostic value of laboratory examination methods was assessed in the diagnosis of avian encephalomyelitis in seven to twenty-two days old chickens. Histological examination and immunofluorescent test are expedient methods meeting the requirements for timely application of infection-control measures. The agreement of histological examination with the over-all laboratory examination is 70 to 81% and the agreement of the immunofluorescence test is 76%. Bioassay on chickens followed by a histological examination appears to be the best method, providing results with the highest significance. However, it is lengthy, applicable to the necessary demonstration of a virus or to cases when the histological or immunofluorescence examinations are dubious. With the over-all laboratory evaluation the method shows agreement in 95 to 100% of cases. The diagnostic value of the method of virus isolation in chick embryos is reduced by the fact that intercurrent viruses (adenoviruses, IB and others) may be passaged at the same time.  相似文献   

12.
Detection of avian encephalomyelitis virus   总被引:2,自引:0,他引:2  
Methods for the detection of two strains of avian encephalomyelitis virus (AEV) in chick embryo brain cell cultures and chickens were compared. It was found that the agar gel precipitin test (AGPT) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) carried out on the serum of inoculated chickens were more sensitive than either the indirect fluorescent antibody test in cell cultures or the detection of clinical signs in chicks. On the basis of results obtained in this experiment the effects were then determined of routes and time of inoculation of chickens on the detection of AEV. It was found that birds infected at two weeks old produced higher antibody titres than one-day-old birds and the AGPT and ELISA detected comparable levels of antibody in them. It was recommended that the tests to detect the presence of AEV as a contaminant of vaccines be replaced by a serological test carried out on chicks inoculated intramuscularly at two weeks old.  相似文献   

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禽脑脊髓炎(AE)是由禽脑脊髓炎病毒引起的雏鸡的一种以侵害神经系统为主的传染病,又称流行性震颤。其主要特征是患雏表现共济失调,头颈部肌肉震颤,腿麻痹,瘫痪等;产蛋母鸡则表现产蛋率下降。  相似文献   

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19.
禽脑脊髓炎是由病毒引起的一种严重侵害各种禽类中枢神经的烈性传染病,主要引起4周龄以内的雏鸡发病,以肌肉进行性共济失调、头颈震颤为特征,发病率在10%~90%之间,死亡率常低于10%,但易继发新城疫、禽流感、大肠杆菌等病毒病和细菌病,进而导致死亡率升高,一般可达30%左右.耐过病鸡常伴有发育不良、生长受阻、后期生产性能较差等后遗症,常可导致严重的经济损失[1].80年代以来,尤其在90年代中叶,我国广东、辽宁、江苏、黑龙江等地先后暴发该病,造成了较大规模流行[2].2000年下半年以来,山东省平原、禹城地区商品肉鸡时常有该病发生,为此,我们进行了病原的分离和鉴定.现报告如下:  相似文献   

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