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从广东省某猪场疑为病毒性腹泻的发病猪采集腹泻粪便样品,以PCR方法扩增出猪流行性腹泻病毒N基因后,采用细胞培养法进行病毒分离.用套式PCR、胶体金试纸卡和血清中和试验对细胞分离物进行检验,证实其为一株猪流行性腹泻病毒,命名为ShT株.将猪流行性腹泻病毒ShT株在Vero细胞上进行传代培养,观察其培养特性.结果表明,PEDV ShT株能在Vero细胞稳定传代,第20代、25代、30代病毒液的TCID50/0.1 mL分别为10-7.0、10-7.13、10-7.33. 相似文献
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猪流行性腹泻病毒分离鉴定及其灭活疫苗免疫保护效果研究 总被引：5，自引：0，他引：5
为筛选能用于猪流行性腹泻病毒(PEDV)疫苗研发的流行毒株,收集PEDV阳性病料,以Vero细胞进行病毒分离试验,并对分离毒株进行外源病毒检测、病毒培养特性研究、仔猪毒力试验及免疫效力试验等。9份PEDV阳性病料共分离到3株病毒,分别命名为PEDV-SC12、PEDV-JS12、PEDV-JX12。其中PEDV-SC12株存在支原体污染;PEDV-JS12株与PEDV-JX12株均能被PEDV特异性阳性血清中和;PEDV-JS12株能在Vero细胞上增殖并产生细胞病变,但适应细胞45代以后病毒培养效价仍然偏低;PEDV-JX12滴度能维持在106.0 TCID50/mL以上。PEDV-JX12株毒力试验显示,该分离株能够通过人工感染复制出腹泻病例,并能从发病动物体内检测到感染的病毒。免疫攻毒保护试验显示,以PEDV-JX12株制备的灭活疫苗免疫母猪,对所产仔猪攻毒后免疫组6.25%(1/16)发病,对照组100%(8/8)发病。说明PEDV-JX12株能够适应细胞培养,免疫接种母猪能给仔猪提供有效保护,可以用于PEDV流行毒株的疫苗研发。 相似文献
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目的:讨论猪流行性腹泻病毒的分离鉴定。方法:选取大型猪场中疑似猪流行性腹泻病死的仔猪的肠道内容物制成标本进行分离,RNA提取,反转录,RT-PCR,小白鼠感受性试验。结果:使用胰酶检测细胞的毒性,结果50μg/ml以下的胰酶含量对细胞没有毒性。经过RT-PCR检测确定病毒为猪流行性腹泻病毒(PEDV)。在小白鼠感受性试验中,小白鼠没有死亡,将其内脏解剖后,没有确定的变化。结论:经过分离达到病毒PEDV,在诊断中使用RT-PCR检测确诊可行。 相似文献
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《动物医学进展》2021,42(2)
旨在对疑似猪流行性腹泻(PED)患猪的病料进行病毒分离,并制备灭活疫苗。从因腹泻病死的7日龄内仔猪的小肠组织及内容物中,分离出1株猪流行性腹泻病毒(PEDV),命名为PEDV-GS。用Vero细胞对病毒进行扩增,病毒液中加入终浓度为0.7 mg/mL甲醛,28℃灭活48 h,加入ISA 61 VG佐剂进行乳化,经稳定性、安全性和效力试验,初步研制出猪流行性腹泻的流行毒株灭活疫苗。疫苗免疫妊娠母猪后对仔猪进行母源中和抗体检测、安全性和有效性试验。结果表明,制备的猪流行性腹泻灭活疫苗稳定性和黏度检测都合格,且对仔猪安全有效,对妊娠母猪产仔数量及质量无影响,其被动免疫抗体至少持续到仔猪产后28 d。试验成功制备了具有安全性和高保护率的猪流行性腹泻灭活疫苗。 相似文献
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青海地区猪流行性腹泻的病原诊断 总被引：1，自引：1，他引：0
对青海地区疑似猪流行性腹泻病料进行了细菌学和轮状病毒核酸电泳的诊断。试验结果:排除了致病菌和轮状病毒的病原感染;乳猪回归试验,复制出与自然病例相同的临床症状;病料经处理后与猪流行性腹泻病毒免疫血清发生特异性凝集;与猪传染性胃肠炎病毒荧光抗体染色呈阴性反应;与猪流行性腹泻病毒免疫血清进行间接荧光染色时,在细胞浆内见到了特异性荧光;电镜观察到冠状病毒科的病毒颗粒。从而确诊青海地区猪流行性腹泻病原为猪流行性腹泻病毒,代号为PEDV—青毒1株。 相似文献