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1.
《中国预防兽医学报》2016,(6)
为分离及种属鉴定引起牛乳腺炎相关的链球菌和肠球菌,本研究于兰州及周边地区采集疑似奶牛乳腺炎乳样382份,通过THB(Todd-Hewitt Broth)固体选择培养基初步分离到67株疑似链球菌或疑似肠球菌。参照已发表文献合成链球菌属16S r RNA和16S~23S r RNA间隔区基因引物序列,扩增分离菌株16S~23S r RNA间隔区序列,产物分别利用AluⅠ和RsaⅠ单酶切消化,并以参考菌株的16S~23S r RNA酶切图谱为参考,对分离株进行限制性片段多态性(RFLP)分类分析;再选取各RFLP类群的任一菌株,扩增其16S r RNA基因并测序,并经NCBI核酸数据库进行比对,结果显示67株疑似链球菌中有53株为粪肠球菌(79.1%)、3株为屎肠球菌(4.5%)、3株为肠道肠球菌(4.5%)、8株为无乳链球菌(11.9%)。结果表明肠球菌属细菌(粪肠球菌、肠道肠球菌、屎肠球菌)与兰州市及周边地区奶牛乳腺炎的发病紧密相关,肠球菌属细菌与链球菌属细菌16S r RNA基因同源性很高,但可以通过分子生物学方法准确区分。 相似文献
2.
荧光定量PCR检测牛乳中金黄色葡萄球菌肠毒素A基因方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
为建立检测牛乳中金黄色葡萄球菌(S.aureus)肠毒素A基因(SEA)定性定量的检测方法,本研究针对S.aureus SEA基因片段设计1对引物,将构建的重组质粒作为阳性对照,建立了S.aureus SEA DNA的SYBR Green I real-time PCR检测方法.结果显示,特异性产物Tm值为78.2℃～78.5℃,最低可检测到49.5 fg/μL(16.5拷贝)的阳性质粒.标准曲线的相关系数为0.99.与其他常见的产SEB的S.aureus、产SEC的S.aureus、无乳链球菌、大肠杆菌、嗜热链球菌、伤寒沙门氏菌、大肠杆菌DH5 α及JM109均无交叉反应.该检测方法具有较好的特异性和敏感性,为牛乳中S.aureus的快速检测提供了新的技术手段. 相似文献
3.
旨在对甘肃省山丹地区马子宫内膜炎主要致病菌进行分离鉴定并建立一种病原菌多重PCR(multiplex polymerase chain reaction, MPCR)检测方法。根据病原菌分离鉴定结果,选取主要致病菌金黄色葡萄球菌(Saphylococcus aureus,S.aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)和马链球菌(Streptococcus equi,S.equi)进行多重PCR检测方法的建立。提取3种标准菌株基因组并基于nuc、phoA、fneB的保守区域设计3对特异性引物,扩增预期核酸片段分别为1 319,385,109 bp,进行引物特异性MPCR验证同时对扩增条件中的退火温度、引物浓度优化,建立检测3种病原菌的多重PCR,完成样品检测评估。结果表明,山丹地区马子宫内膜炎主要致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和马链球菌,设计的引物与无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S.agalactiae)、肺炎链球菌(Pneumococcus)无交叉反应,建立的多重PCR检测方法退火温度在59.4℃时最佳;在引物为0.3～... 相似文献
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乳链球菌对0～3周龄肉仔鸡生产性能、血清生化指标及肠道大肠杆菌的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为了评价在0.1 MPa,65℃制粒条件下筛选出的耐制粒乳链球菌时0～3周龄肉仔鸡生产性能、血液生化指标和粪便大肠杆菌的影响.将自制乳链球菌粉剂按3 g/kg添加量与1～21日龄肉仔鸡无抗生素日粮混合,制成试验颗粒料.选用1日龄健康的AA肉仔鸡混雏96只,随机分为时照组和乳链球菌组,每组4个重复,每重复12只鸡.试验期为3周.结果表明:乳链球菌组的生产性能指标与对照组相比,1周龄平均日采食量显著降低(P＜0.01);其他生产性能指标差异均不显著(P＞0.05);乳链球菌组血糖(GLU)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(CHO)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、谷草转氨酶(GOT)和白蛋白/球蛋白比值(A/G)与对照组相比均差异不显著(P＞0.05):能显著降低1、2、3周龄AA肉仔鸡肠道大肠杆菌数(P＜0.01).试验表明,乳链球菌对雏鸡的生产性能和部分血清生化指标没有影响,能降低肠道大肠杆菌数. 相似文献
6.
《中国家禽》2017,(11)
试验旨在研究饲粮添加屎肠球菌对禽大肠杆菌O78感染肉鸡生产性能、肠道微生物菌群和血液抗氧化功能的影响。选取288只1日龄罗斯308母鸡,随机分成4组。分别在各试验组基础饲粮中添加0、100、200、300 mg/kg屎肠球菌。各试验组在11日龄均气囊接种禽大肠杆菌,0.2 mL/只。结果表明:与无添加组相比,(1)饲粮中添加屎肠球菌可线性提高10日龄肉鸡体重(BW)(P0.05),线性及二次线性提高22和35日龄肉鸡BW(P0.05),线性提高1~10、10~22和10~35日龄肉鸡平均日增重(P0.05),降低感染后肉鸡死亡率。(2)饲粮中添加屎肠球菌可线性降低感染后3 d盲肠大肠杆菌和沙门菌数量(P0.05),线性及二次线性降低双歧杆菌数量(P0.05);感染后7 d,屎肠球菌添加组大肠杆菌和沙门菌数量线性降低(P0.05)。(3)感染后3和7 d,屎肠球菌组血清总抗氧化能力分别呈线性(P0.05)和二次线性降低(P0.05);血清丙二醛含量均呈线性及二次线性降低(P0.05);谷胱甘肽过氧化物酶活性均为二次线性降低(P0.05)。由此可见饲粮添加屎肠球菌可缓解禽大肠杆菌O78感染导致的肉鸡生产性能下降,通过调节肠道菌群结构和机体氧化状态,来减轻大肠杆菌感染造成的生理失衡。提示饲粮添加200 mg/kg屎肠球菌可有效预防肉鸡大肠杆菌O78感染。 相似文献
7.
《黑龙江畜牧兽医》2017,(15)
为了解辽西地区致病性鸡大肠杆菌(E.coli)的流行情况,以明确该地区大肠杆菌16S核糖体核苷酸(ribosomal RNA,rRNA)基因序列变异特点,试验采用细菌分离纯化培养技术、生化鉴定技术及16S rRNA基因序列分析技术对从辽西地区不同规模养鸡场采集的12份病料中分离出的10株革兰氏阴性小杆菌进行了研究。结果表明:所分离出的阴性小杆菌被初步判定为大肠杆菌,这10株采集自不同鸡场的大肠杆菌16S rRNA核苷酸基因序列中有4株血清型为O_(78),余下6株中2株与O_(78)同源性最高,2株与O_2同源性最高,2株与O_(111)同源性最高,各株大肠杆菌碱基突变位点一致。说明辽西不同地域的致病性大肠杆菌血清型近半数为O_(78),故O_(78)可能为主要流行株。 相似文献
8.
《中国兽医学报》2016,(4)
为给黄土高原舍饲养殖场科学防治奶牛子宫内膜炎提供理论依据,对该地区2市4县13个规模奶牛场和5个自然村,共77头患子宫内膜炎的奶牛子宫分泌物进行细菌分离鉴定,并对致病性不明的主要分离菌进行了大鼠子宫致病性试验。结果分离鉴定出12个菌属、23个菌种、108株细菌,主要细菌为芽孢杆菌(30.56%)、大肠埃希菌(14.81%)、肠球菌(12.96%)、葡萄球菌(9.26%)、乏养球菌(9.26%)、链球菌(6.48%)等;对主要分离菌的致病性研究发现除缺陷乏养球菌外,凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌等均可引起子宫内膜炎。表明引起该地区奶牛子宫内膜炎的致病菌主要为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、化脓链球菌、不动杆菌、凝结芽孢杆菌、大肠杆菌(O20)、屎肠球菌,可为有效治疗本地区奶牛子宫内膜炎提供可靠的理论基础。 相似文献
9.
栗蚕蛹体液的一些免疫反应 总被引：2，自引：1，他引：1
为了探明栗蚕体内免疫机制,研究了栗蚕蛹体液免疫反应的某些特性。栗蚕蛹经细菌、真菌以及生理盐水诱导后,其体液对大肠杆菌(E.coli)、枯草杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)及柞蚕链球菌(T.streptoc-occus)均表现出一定的抑菌作用。大肠杆菌诱导6 h后,栗蚕蛹体液中出现抗菌活性物质,诱导后4 d,体液的抗菌活性达到高峰值,11 d后活性消失。SDS-PAGE电泳结果表明,诱导后的栗蚕蛹血淋巴中有新蛋白产生,推测可能与其产生新的抗菌活性有关。 相似文献
10.
《畜牧与兽医》2017,(10):113-116
为快速检测奶牛隐性乳房炎主要致病菌大肠杆菌和无乳链球菌,分别针对2种致病菌16S-23S rRNA和16S rRNA基因设计2对特异性引物,优化并确立双重PCR反应体系。特异性检测表明,对其他对照菌株未扩增出目的条带;敏感性试验表明,该双重PCR对大肠杆菌、无乳链球菌的最小检测浓度分别为10~2、10~3cfu/mL。同时采用双重PCR与细菌学检查法对送检的96份奶样进行检测,结果双重PCR检出63份大肠杆菌阳性、54份链球菌阳性;细菌学方法检出29份大肠杆菌阳性、37份链球菌阳性。说明本研究建立的双重PCR方法敏感、快速,可用于检测大肠杆菌和无乳链球菌引起的奶牛隐性乳房炎。 相似文献
11.
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旨在研究日粮中添加屎肠球菌对大肠杆菌感染的肉鸡生长性能、血清生化指标和盲肠菌群结构的影响。将360只1日龄体重接近的白羽肉鸡随机分为4组,每组6个重复(每重复15只):阴性对照组(NC)、阳性对照组(PC)、屎肠球菌组(E.f)和抗生素组(Anti)。后3组肉鸡在7日龄感染大肠杆菌,试验共持续28d。肉鸡的血清生化指标检测使用特定试剂盒,而盲肠微生物结构变化用PCR-DGGE检测。结果显示:1)14、21和28日龄时,屎肠球菌组肉鸡体重显著高于阴性和阳性对照组肉鸡(P0.05);10~14、15~21、10~28日龄屎肠球菌组肉鸡平均日增重显著高于阴性和阳性对照组肉鸡(P0.05);2)相较于阴性对照和阳性对照肉鸡,14和21日龄屎肠球菌组和抗生素组血清IgA浓度显著增加(P0.05);相较于阴性对照,10~28日龄屎肠球菌组和抗生素组血清中IgG浓度显著增加(P0.05);3)与21日龄阳性对照组肉鸡相比,屎肠球菌组血清中C3浓度显著增加(P0.05);与10、14和21日龄阴性对照肉鸡相比,其余3组肉鸡血清中溶菌酶的浓度显著增加(P0.05);4)与阳性对照组相比,饲喂屎肠球菌显著增加28日龄肉鸡盲肠微生物菌群的香农指数(P0.05)。结果提示,饲喂屎肠球菌可显著提高大肠杆菌感染肉鸡的生长性能,提高血液免疫相关指数,改变盲肠菌群多样性。 相似文献
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试验为检测从荷斯坦奶牛瘤胃中分离的三株牛链球菌(Streptococcus equinus, S. equinus)对苜蓿青贮品质的影响，将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum, L. plantarum)FE-1(CB组)、牛链球菌ON182139(S1组)、ON182142(S2组)、ON221850(S3组)等乳酸菌用于新鲜苜蓿青贮，以不额外接种乳酸菌作为对照组(CON)，在青贮的3、6、12、30 d和60 d，分别取出青贮苜蓿，测定化学成分、发酵品质、微生物数量和有氧稳定性。结果表明：(1)第60天，与CON组相比，各添加乳酸菌组均显著降低了干物质损失(P<0.05)，但牛链球菌组与植物乳杆菌组之间差异不显著(P>0.05)。(2)与CON组相比，相同添加量的乳酸菌组苜蓿的酸性洗涤纤维(ADF)、pH、氨态氮(NH3-N)和好氧菌群显著降低(P<0.05)，但牛链球菌组和植物乳杆菌组之间差异不显著(P>0.05)。(3)对于粗蛋白(CP)，与CON组相比，S3组与CB组显著降低了CP损失(P<0.05)... 相似文献
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为克隆、表达犬链球菌(S.canis)保护性抗原基因,并对其表达产物进行免疫原性分析.本研究以Lambda ZAP Ⅱ载体构建了S.canis的3 kb～8 kb随机基因组文库,通过S.canis阳性血清筛选和质粒拯救,获得一株阳性克隆重组质粒并进行了序列测定.通过BLAST分析并与GenBank中登录的相近基因序列比较发现,该基因为S.canis的1个保护性抗原(SPASc)基因,该基因与兽疫链球菌和产脓链球菌的保护性抗原及马链球菌M蛋白基因具有一定的同源性.根据该序列设计特异性引物,经PCR扩增、克隆并进行了SPASc基因的原核表达.用纯化SPASc重组蛋白免疫兔制备的血清对小鼠具有保护性作用. 相似文献
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新疆地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及其对抗菌药的敏感性试验 总被引：13，自引：0，他引：13
通过细菌形态学和细菌生化特性,分离和鉴定了新疆地区患子宫内膜炎的21头奶牛子宫分泌物中的病原菌分别为蜡样芽孢杆菌(24.5%)、非溶血性链球菌(18.4%)、大肠杆菌(14.3%)、溶血性链球菌(10.2%)、表皮葡萄球菌(10.2%)、金黄色葡萄球菌(10.2%)、胎儿弯曲菌(10.2%)和不动杆菌等.其中革兰氏阳性菌检出率较高(73.5%).子宫内膜炎病原菌以单一菌株感染为主(47.6%).采用Kirby-Barer法测定了鉴定菌株对13种抗微生物药的体外药物敏感性.链球菌、大肠杆菌和葡萄球菌对氨苄西林不敏感,而对卡那霉素和庆大霉素敏感性较高;大肠杆菌对青霉素和氨苄西林全部耐药(100%),对四环素和多西环素耐药率较高(均为83.3%);溶血性链球菌对青霉素和四环素全部耐药,对链霉素耐药率为80%;相对而言,表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌的耐药率较低;氟喹诺酮类对各种分离菌株比较敏感. 相似文献
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引起猪链球菌病的病原多为C群的兽疫链球菌(S.zooepidemicus)和类马链球菌(S.epuisimilis),D群的猪链球菌(S.suis),以及E、L、S、R等群。猪链球菌按照荚膜多糖抗原的不同可将其分成35个荚膜血清型,即1～34和1/2型(同时含有1型和2型抗原的菌株),早期曾将猪链球菌分类到兰氏分类法R、S、和T群,实际上与兰氏R、S和T群分别对应的是荚膜2、1和15型。对人致病的大多属于A族,A族又称为化脓性链球菌,在动物中对人类造成严重威胁是猪链球菌,尤其是血清2型链球菌不仅对猪的致病性最强,而且可感染特定人群并致死,是一种重要的人畜共患病病原菌。… 相似文献
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本研究考察了培养基、培养时间对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDITOF MS)快速鉴定猪、鸡源大肠杆菌和肠球菌的影响。结果表明:在哥伦比亚血琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基和肠球菌显色营养琼脂培养基上培养对粪肠球菌、屎肠球菌的鉴定没有显著区别;在哥伦比亚血琼脂培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基上培养对大肠杆菌的鉴定没有显著区别,而麦康凯培养基则不适合大肠杆菌的快速鉴定。大于24h的培养时间对大肠杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌3种细菌快速鉴定均有不同程度的影响,其中对大肠杆菌的影响最为显著,而对粪肠球菌的影响最小。重复性实验中,大肠杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌的鉴定分值均在90%以上,批间、批内变异系数均小于5%,说明本实验方法稳定性和重复性良好。与传统的生化鉴定方法比较,MALDITOF MS法操作简单快速、准确,可有效提升动物源细菌分离鉴定的工作效率。 相似文献
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采用改良结晶紫半定量法和微量肉汤稀释法分别对152株大肠杆菌进行生物被膜形成能力分析和12种常用抗菌药物敏感性试验。同时,利用棋盘稀释法评价四种藏兽医药用植物(马蹄黄、偏翅唐松草、华丽龙胆和岩生忍冬)不同提取部位(甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和石油醚)、屎肠球菌乙酸乙酯提取物与高耐药率抗生素(氯霉素、土霉素、氨苄西林和磺胺甲噁唑)联合对10株多重耐药大肠杆菌(E1-E10)杀菌活性,以探讨不同药物组合对E6生物被膜的清除作用。实验结果显示：152株大肠杆菌多表现为中等成膜能力和无成膜能力表型,对氯霉素、磺胺二甲嘧啶、土霉素、氨苄西林、磺胺甲噁唑的耐药率均高于90%,对二氟沙星、环丙沙星、阿米卡星、头孢噻呋、妥布霉素和头孢曲松的耐药率均低于50%,其中阿米卡星的敏感率最高,耐药率仅为19.90%;马蹄黄甲醇提取物、偏翅唐松草乙酸乙酯提取物、华丽龙胆甲醇提取物和岩生忍冬乙酸乙酯提取物、屎肠球菌S16和S17乙酸乙酯提取物对E1～E10的MIC范围分别为3.93～15.63、3.93～31.52,7.81～15.63、7.81～31.52、0.42～13.38和0.45～3.63 mg/mL;四... 相似文献
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我国部分地区个体奶牛场乳房炎细菌学调查 总被引：19，自引：3，他引：16
在对成都、兰州、郑州、济南、哈尔滨、南昌六个城市 10 5个个体奶牛场所做的乳房炎流行病学调查的基础上 ,采集各种类型乳房炎奶样 2 80头份 (340个乳室 ) ,经细菌分离鉴定共分得12种 316株菌 ,牛只和乳室出菌率分别为 84 .2 9%和 80 %。其中与乳房炎有密切关系的病原菌 7种180株 ,主要为停乳链球菌 (37.78% )、大肠杆菌 (2 4 .4 4% )、无乳链球菌 (15 .5 6 % )、金黄色葡萄球菌 (13.33% )、绿脓杆菌 (4.4 4% )、克雷伯氏菌 (2 .2 2 % )、变形杆菌 (2 .2 2 % ) ,不同地区的牛场细菌分布有所不同。同时采集桶奶样 15 2份 ,其中 119份检出各种细菌 ,出菌率为 78.2 8% ,经细菌分离鉴定分得 7种 14 0株 ,其中与乳房炎有密切关系的病原菌 4种 35株 ,主要为停乳链球菌(6 8.5 7% )、大肠杆菌 (17.14 % )、乳房链球菌 (11.4 3% )、无乳链球菌 (2 .86 % )。该项细菌学调查初步明确了我国个体奶牛场细菌学分布状况 ,为个体牛场进一步综合防治奶牛乳房炎提供了科学依据。 相似文献