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《黑龙江畜牧兽医》2020,(5)
为了建立一种快速、灵敏且特异的沙门氏杆菌快速筛选检测方法——聚合酶螺旋反应(polymerase spiral reaction,PSR),试验针对沙门氏杆菌菌毛保守操纵子bcfD基因设计特异性扩增引物,通过优化反应温度、dNTPs浓度、Mg~(2+)浓度和反应时间以确定最佳反应体系;随后选取4株沙门氏杆菌标准菌株和12株近源菌进行特异性试验;通过菌落计数法和倍比稀释法确定PSR方法的最低检测灵敏度,并与常规PCR方法进行敏感度比较;用稀释后的沙门氏杆菌纯菌液人工随机污染40份不含沙门氏杆菌的生猪肉样品,模拟并评价PSR方法在现场检测中的应用效果。结果表明:试验成功建立并优化了PSR方法,最佳反应温度为65℃、dNTPs浓度为0.3 mol/L、Mg~(2+)浓度为3.0 mmol/L、最佳反应时间为45 min;PSR方法可以特异性扩增4株沙门氏杆菌,而对其他12株近源菌的扩增结果呈阴性;经菌落计数和倍比稀释后,PSR方法的最低检出量为4×10~(1 )cfu/mL,为常规PCR方法的100倍;从40份经人工随机污染生猪肉样品中共检测出阳性样品7份,与传统培养法的检测结果一致,检出率均为17.5%。说明试验建立的PSR方法对沙门氏杆菌的检测特异性强、灵敏度高,且不需要昂贵的设备即可在短时间内实现对沙门氏杆菌属的快速检测。 相似文献
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人类沙门氏杆菌病的发生近年来有普遍上升趋势，因此作为人类食物链中的禽肉、蛋及其制品的沙门氏杆菌污染问题越来越受到人们的关注。为了减少和消除沙门氏杆菌对养禽业的危害，保障人类的健康．除了积极改善家禽饲养公理中的卫生状况，做好生物安全性工作和消除饲料中的沙门氏杆菌污染等综合性措施外，免疫学防制（菌苗的研制和应用）是沙门氏杆菌控制计划中的重要内容。据报道，给鸡群接种沙门氏杆菌苗苗能为之提供理想的保护。试验证实．活菌苗能激发接种鸡的肠道局部免疫反应和全身性细胞介导免疫反应，从而抑制野强菌株的增殖和排菌，… 相似文献
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促生素用于预防鸡的沙门氏杆菌感染 总被引：1，自引：0，他引：1
禽类沙门氏杆菌是造成人类沙门氏杆菌病的重要原因之一,因此,对养禽场净化沙门氏杆菌感染在世界范围内受到广泛重视。为达到此目的曾用化学治疗剂及抗生素治疗和菌苗免疫等措施,但只取得了有限的成功。1973年,荷兰学者介绍一种“竞争性排斥机制”用于控制雏鸡的沙门氏杆菌感染的技术。在其后的近二十年的时间里,许多学者对此机制进行了大量的研究工作,并将该项技术应用于 相似文献
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沙门氏杆菌与沙门氏杆菌症对畜禽生产及人类健康的威胁已受到公众的重视。沙门氏菌(SALMONELLA)是肠杆菌常见的一种重要病原性菌属，已知的沙门氏菌血清有2499个，在自然界中广泛分布，几乎所有的血清型皆会污染食物以致发病，该菌污染饲料后，不仅引起动物中毒，造成菌血症， 相似文献
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参考GenBank中兔巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌的fim2的基因序列,应用Premier 5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合巴氏杆菌和波氏杆菌快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对巴氏杆菌和波氏杆菌参考菌株进行PCR扩增,分别能从各自的基因组中扩增出与试验设计相符的644bp和425bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为巴氏杆菌16SrRNA和波氏杆菌fim2基因序列。该方法对波氏杆菌的检测下限为4×102 CFU,对巴氏杆菌的检测下限为6×101 CFU。对兔源性沙门菌、葡萄球菌、大肠杆菌、魏氏梭菌扩增结果为阴性。表明所建立的RT-PCR检测技术具有特异、快速和敏感的特点,可用于鉴别诊断兔巴氏杆菌和波氏杆菌以及2者混合感染。 相似文献
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为了了解屠宰场生猪肉被沙门氏杆菌污染的情况,试验对采集的20份生猪肉进行细菌分离培养、选择性培养、生化试验、革兰氏染色、沙门氏杆菌外膜蛋白C(Omp C)基因PCR检测等方法进行鉴定,采用MegAlign软件绘制分离菌16S rRNA遗传进化树。结果表明:从屠宰场生猪肉中分离到一株疑似沙门氏杆菌,命名为GZ-Q1株; GZ-Q1株为革兰氏阴性的短小杆菌;生化试验结果与沙门氏杆菌的生化特性基本相符; Omp C基因PCR检测可见约204 bp的目的条带; GZ-Q1株与猪霍乱菌株(CP007639. 1)的同源性最高,为99. 9%。说明从屠宰场生猪肉中分离的GZ-Q1株为猪霍乱沙门氏杆菌。 相似文献
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随着人民生活水平的提高,人们对肉、蛋、奶的需求越来越多,相应地养鸡业发展迅速,但是随着集约化、规模化程度的增强,疾病的治疗难度增大,成为制约养鸡业发展的难题。鸡沙门氏杆菌病是养鸡场的一种常见病,是由沙门氏杆菌引起的,包括鸡白痢、鸡副伤寒、鸡伤寒等病,对鸡的健康危害很大,给养鸡场带来严重的经济损失,而且也严重威胁人类的健康,带菌鸡所产下的鸡蛋有30%~40%带有沙门氏菌,人们食用这种鸡蛋及其蛋制品后 相似文献
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控制动物细菌感染的新方法 总被引：1，自引：0，他引：1
控制动物细菌感染的新方法潘世昱译李增光校山东省青岛正大有限公司青岛市２６６１０９）最近几年，由沙门氏杆菌引起的动物感染和公共卫生问题越来越受到人们的重视，特别是肠炎沙门氏杆菌和鼠伤寒沙门氏杆菌已成为世界各国关注的焦点。虽然有的国家通过血清学检测和淘汰... 相似文献
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为建立一种更加准确、敏感的鸭疫里默氏杆菌检测方法,根据鸭疫里默氏杆菌16S rRNA基因序列设计2对巢式PCR引物,在完成最佳反应条件筛选、特异性、敏感性、重复性试验的基础上,建立巢式PCR检测方法.结果表明,建立的巢式PCR对1、2、10、X型鸭疫里默氏杆菌的16S rRNA都能扩增出特异性片段,而对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门菌、鸭源金黄色葡萄球菌的基因组不能扩增出特异性片段,DNA最小检测量为0.392 fg/μL,是常规PCR的1 000倍.该巢式PCR方法具有快速、敏感、特异、通用的优点,可用于鸭疫里默氏杆菌感染的检测、分子流行病学调查和分离菌株的快速鉴定. 相似文献
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广东地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及双重PCR检测方法的建立 总被引：2，自引：0，他引：2
对来自广东地区疑似鸭疫里默氏杆菌病的病鸭组织进行了病原菌的分离培养和生化鉴定,确定得到20株鸭疫里默氏杆菌,动物回归试验结果表明,分离的鸭疫里默氏杆菌具有很强的致病性.对这20株鸭疫里默氏杆菌进行的药敏试验表明,分离株已广泛产生耐药性.参照已经发表的2对引物以细菌全菌体为模板建立双重PCR方法,结果均能扩增出2条目的片段,经测序证实为鸭疫里默氏杆菌,而对鸭源大肠杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门菌和鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性.说明建立的双重PCR方法能快速、准确的检测出鸭疫里默氏杆菌,并具有高度特异性,可用于鸭疫里默氏杆菌的快速鉴定和快速诊断. 相似文献