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为研究不同断奶日龄对仔猪肝脏热休克蛋白70(Hsp70)、热休克蛋白90(Hsp90)和热休克蛋白27(Hsp27)表达的影响,对24头体重相近、健康的杜长大仔猪,按断奶日龄(14、21、28、35日龄)进行随机分组,每组包含6个重复,于42日龄处死取样,用蛋白免疫印迹法检测肝脏中上述蛋白的表达水平。结果表明,35日龄断奶组肝脏Hsp70蛋白表达水平显著低于21日龄断奶组(P0.05),35日龄断奶组Hsp90蛋白表达水平均显著低于14日龄和28日龄断奶组(P0.05),35日龄断奶组Hsp27蛋白表达水平均显著低于其他3个断奶组(P0.05)。结果提示,仔猪肝脏Hsp70、Hsp90及Hsp27蛋白表达量受断奶日龄影响显著。 相似文献
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热休克蛋白70是生物体在各种应激条件下产生的蛋白之一,具有维持细胞自身稳定等多种生物学功能,与胚胎的生长发育有着密切的内在联系。目前及今后若干年热休克蛋白70与胚胎生长发育研究领域都将是世界各国生命科学研究的热点,同时也是极有希望的研究领域。文章就热休克蛋白70自身,热休克蛋白70与胚胎畸形发生的关系,以及热环境条件下热休克蛋白70与胚胎生长发育的关系作一综述。 相似文献
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建立了环境热应激和睾丸局部热处理猪动物模型,用RT-qPCR和Western blot法检测了热休克蛋白家族成员Hsp60和Hsp90 mRNA和蛋白表达水平的变化,用免疫组织化学方法检测Hsp60和Hsp90在猪睾丸的组织细胞学定位。RT-qPCR和Western blot结果显示,与对照组相比,环境热应激组和局部睾丸热应激组Hsp60和Hsp90 mRNA和蛋白的表达量均显著升高。免疫组织化学结果显示,对照组Hsp60主要表达在精母细胞和支持细胞的细胞质,环境热应激组和局部睾丸热应激组Hsp60免疫阳性从精母细胞的细胞质转移至精原细胞的细胞核。热处理前后Hsp90定位于精原细胞和长形精子细胞。环境高温热应激和局部睾丸热刺激导致Hsp60和Hsp90表达升高,提示Hsp60和Hsp90在热应激猪睾丸精子发生过程中发挥重要作用。 相似文献
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山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolum subsp.Capripneumoniae,Mccp)引起的高度接触性传染病,热休克蛋白Hsp70,在Mccp所有蛋白翻译后功能和结构的表达起作用。以Mccp中国分离株87001为模板,扩增了Hsp70的全序列,将该序列克隆到pMD18T载体上并测序。将序列与其它已知动物支原体的Hsp70序列进行分析比较。测序结果87001株Hsp70基因全长1773bp,编码591个aa,第631～633位TGA在支原体编码色氨酸而不是作为终止密码子。将该序列与多种致病支原体Hsp70基因进行分析比较,发现87001株Hsp70基因与山羊支原体山羊亚种(Mcc)、丝状支原体丝状亚种SC的DNA同源性为99.3%～99.4%,氨基酸同源性为99.2%～99.3%,而与非同种支原体猪肺炎支原体232株等Mhp菌株的DNA和氨基酸同源性仅为64.5%～74.4%和59.3%～77%。这表明DnaK基因在种内高度保守,种间差异较大。原核表达得到大小为41Kd的目的蛋白,经Westernblot证实,纯化蛋白可与Mhp阳性猪血清反应,具有免疫活性。 相似文献
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《The British veterinary journal》1994,150(6):569-583
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本试验旨在了解绵羊肺炎支原体（Mo）标准Y98株Hsp70基因生物学特性,以期利用该基因表达蛋白建立ELISA方法。本研究应用DNAStar、Bioedit 7.0、ClustalX 3.0、Mega 4.0软件与Protparam、TMpred、IEDB在线工具对Hsp70蛋白的理化参数、跨膜结构、信号肽、二级结构、B细胞表位及与其他支原体Hsp70蛋白进化关系进行了比对分析。结果显示,Mo Y98株Hsp70蛋白理论分子质量为66.14 ku,pI值为5.08,为稳定的可溶性蛋白。该蛋白无跨膜结构,不分泌信号肽,存在多处具有免疫原性的肽段,具有形成抗原表位的优势结构,是建立免疫学方法较为理想的靶蛋白。与多种支原体Hsp70基因进化关系分析结果表明,该蛋白与Mo进化关系最近,与丝状支原体簇成员亲缘关系较远,为进一步分析Mo致病机理提供了理论依据。 相似文献
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热应激蛋白70(Hsp70)作为分子伴侣,对胃肠道黏膜细胞的保护及其免疫调控具有重要作用,然而,其作用机理尚未完全清楚。本文综述了Hsp70在胃肠道中的表达与定位,阐述其对胃肠道黏膜的保护功能,特别是Hsp70介导免疫调控的分子生物学机理。 相似文献
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为了探究宿主蛋白Hsp90AB1在狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)复制过程中的功能,以RABV疫苗毒株HEP-Flury感染鼠神经瘤母细胞N2a为模型,分析Hsp90AB1对RABV复制的影响。采用RNA干扰的方式,发现Hsp90AB1基因敲降后可影响病毒基因的转录及其表达,而未影响病毒的反基因组水平以及病毒感染力,表明Hsp90AB1在转录或蛋白表达水平上影响RABV的复制。由此初步发现Hsp90AB1在RABV复制过程中的作用方式,为继续深入研究Hsp90AB1在RABV感染过程中的作用机制提供了基础数据。 相似文献
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选取12头皮特兰和24头二花脸仔猪,体重达到（20±1）kg时,随机选取6头皮特兰和12头二花脸进行2h运输,其余仔猪作为对照组。采用HE染色、免疫组织化学以及酶联免疫吸附试验技术,通过对不同品种仔猪运输前后肝脏、肾脏、胃的损伤以及Hsp47的定位、定量观察,研究运输应激与Hsp47表达之间的关系。结果表明：2h运输应激后,二花脸和皮特兰仔猪各组织的实质细胞均有不同程度的损伤;Hsp47主要分布在肝脏的中央静脉和窦状隙内皮细胞、肾小球和远曲小管上皮细胞、胃的黏膜层和黏膜下层结缔组织内;在肾脏和胃组织中,皮特兰仔猪在运输后Hsp47含量增加（P〈0．05）,但二花脸仔猪的相应值未见显著差异,2个品种肝脏中Hsp47含量在运输前后的变化无差异。Hsp47在受检组织中尽管有表达增加的趋势,但2个不同品种仔猪组织中Hsp47含量升高的程度不同,说明二者对运输应激的敏感性不同,二花脸仔猪具有更强的抗应激能力。 相似文献
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《中国家禽》2018,(23)
研究对鸡Hsp60基因进行了扩增以及原核与真核表达载体构建。构建的原核表达载体GST-HSP60经IPTG诱导,SDS-PAGE分析获得了Hsp60的融合表达蛋白。采用纯化的GST-HSP60蛋白免疫小鼠制备抗Hsp60多克隆抗体。Western blot以及间接免疫荧光分析证明,所制备的抗Hsp60多克隆抗体不仅能识别转染真核表达载体pcDNA3.1-Hsp60表达的外源性鸡源Hsp60蛋白,而且能有效识别内源性鸡源以及人源的Hsp60蛋白。这些Hsp60基因表达载体的构建以及抗Hsp60蛋白特异性多克隆抗体的制备为进一步研究Hsp60生物学功能及其在家禽疫病中的潜在作用奠定了基础。 相似文献
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为了研究分枝杆菌热休克蛋白(Hsp70)对猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的免疫佐剂作用,以自聚肽ELK16为纯化标签,分别与Hsp70和PCV2 Cap基因融合后诱导表达,利用离心洗涤法进行融合蛋白纯化,获得了纯化的融合蛋白ELK16-Cap、ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70,其纯度高达95%、96%和85%,产量分别为92、84和83 mg/L;接着用PBS、ELK16-Cap、ELK16-Cap+弗氏不完全佐剂(IFA)、ELK16-Cap+ELK16-Hsp70和ELK16-Cap-Hsp70分别免疫小鼠,初免后21 d ELK16-Cap-Hsp70免疫组抗体水平达到最高;在二免后2周取免疫小鼠脾脏淋巴细胞,用试剂盒检测细胞因子表达,TNF-α浓度依次为588.55、802.55、995.55、1 382.55和1 719.55 pg/mL,IFN-γ浓度依次为46.30、92.22、155.56、470.37和518.15 pg/mL,IL-12浓度依次为14.72、28.06、20.83、31.39和34.72 pg/mL。这些研究结果表明,Hsp70对刺激PCV2 Cap蛋白ELISA抗体产生的作用优于IFA,但两者融合蛋白的刺激作用较强;与Cap蛋白融合的Hsp70对刺激TNF-α、IFN-γ和IL-12产生的作用较强,而ELK16-Hsp70+ELK16-Cap对3种细胞因子产生的刺激作用次之。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2010,(13)
为了研究抗热应激中药对高温应激下肉鸡肝脏热应激蛋白70(Hsp70)表达的调控效果,试验采用免疫组织化学染色和Western-blot法测定了肝脏中Hsp70的定位定量变化。结果表明:高温应激后,肝脏细胞阳性率明显增加,药方试验组肝脏细胞阳性率高于常温组,但低于高温对照组;West-ern-blot检测结果显示高温对照组、药方试验组肝脏中Hsp70含量显著增加(P0.05),且药方试验组肝脏中Hsp70含量在第3,7天与高温对照组相比显著增加(P0.05)。说明抗热应激中药可通过增加肝脏中Hsp70蛋白含量来提高机体细胞热耐受水平,达到保护作用。 相似文献
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为了得到Hsp70与TAT-PTD（protein transduction domain）的融合蛋白，利用PCR的方法先将9个TAT基因序列置于Hsp70基因序列之前，再克隆到pEASY—E1载体上。pEASY—E1／TAT—Hsp70重组子在大肠杆菌Transetta（DE3）内诱导表达，纯化后经Westernblot鉴定，证明其是具有生物学活性的目的蛋白。试验成功得到了可溶性TAT—Hsp70融合蛋白，为应用蛋白转导技术进一步研究Hsp70对细胞的热保护机制奠定了基础。 相似文献
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ich is 《畜牧兽医科技信息》2003,(3)
in contrast with its insignificant effect on recognition of general information in both tests. As regards the effect of the very act of taking notes (the encoding function of note-taking), no significant effect has been found in any condition in either test. 相似文献
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1. Withdrawal of cholecalciferol (D3) supplement from a layers diet drastically reduced blood 25‐hydroxycholecalciferol (25‐OH‐D3), 1α,25‐dihydroxycholecalciferol (calcitriol) and egg specific gravity (SG) within two weeks, followed by a decrease in blood total calcium (Ca).
2. Doubling the D3 supplement in the control diet (27.5 μg or 1100 IU/kg) almost linearly increased the circulating concentration of 25‐OH‐D3 without raising the concentration of calcitriol, Ca, or egg SG.
3. Replacing D3 by the optimal concentration of calcitriol (5 μg/kg diet) improved egg SG after 21 weeks of treatment without increasing blood calcitriol or total Ca.
4. By itself, 24,25‐dihydroxycholecalciferol [24,25‐(OH)2D3] was unable to maintain normal blood levels of calcitriol, Ca or egg SG and, when added together with calcitriol in the diet, tended to elevate blood Ca but suppress the beneficial effect of calcitriol on shell quality, with little or no effect on blood calcitriol. 相似文献