iTRAQ技术分析无乳链球菌牛源株与人源株差异表达蛋白     

郭长明  袁橙  朱善元  王安平  吴双  王永娟  左伟勇  洪伟鸣  秦枫 《中国兽医学报》2018,(6)

为了分析无乳链球菌牛源株ATCC13813与人源株A909差异蛋白质组,提取ATCC13813与A909全菌蛋白,iTRAQ技术标记后,进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定和定量,质谱数据通过Mascot 2.2和Proteome discoverer 1.4软件分析,并对差异蛋白进行GO功能注释和KEGG pathway通路分析。结果显示,共鉴定出差异表达蛋白350个(P0.05),与ATCC13813相比,在A909中上调表达蛋白174个(比值1.5),下调表达蛋白176个(比值0.667)。生物信息学分析预测这些蛋白主要涵盖28个生物学功能,14个通路。本研究为阐明不同宿主来源株无乳链球菌致病性差异奠定基础。  相似文献   

无乳链球菌dnaJ基因缺失株的构建及其致病性研究     

郭长明  吴植  吴双  王永娟  王安平  刘广锦  刘永杰  朱善元 《中国畜牧兽医》2019,(9)

为研究dnaJ基因序列与细菌致病力的关系,本研究构建了dnaJ基因缺失株和互补株,并对其致病性进行验证。参照GenBank中无乳链球菌GD201008-001(登录号:NC_018646)目的基因序列分别设计引物,PCR克隆dnaJ基因上、下游同源臂基因序列,通过融合PCR将两个片段连接到一起,构建dnaJ基因上、下游同源臂融合片段,PCR克隆含有启动子序列的dnaJ基因。将dnaJ基因上、下游同源臂融合片段和含有启动子序列的dnaJ基因分别连接链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET4s和pSET2,电转化GD201008-001感受态细胞,构建dnaJ基因缺失株ΔdnaJ和互补株CΔdnaJ。通过分析ΔdnaJ和CΔdnaJ的遗传稳定性与形态学变化对dnaJ上、下游基因转录的影响,以及生长速率和斑马鱼攻毒试验评价dnaJ基因对无乳链球菌毒力的影响。经PCR鉴定和测序证明,ΔdnaJ和CΔdnaJ构建成功;与野生株GD201008-001相比,ΔdnaJ和CΔdnaJ在细菌染色形态上均无明显差异,但ΔdnaJ在液体培养基中的生长速度明显减缓;dnaJ基因的缺失未对相邻基因的转录造成影响;ΔdnaJ对斑马鱼的毒力明显下降,对斑马鱼的LD_(50)为5.68×10~4 CFU,约是野生株的241倍。dnaJ基因对无乳链球菌的毒力有显著影响,本试验结果为进一步探究无乳链球菌dnaJ基因的功能提供了参考依据。  相似文献   

四环素耐药基因在鸡源沙门氏菌中的分布和传播     

王晓泉  王彦红  吴双  焦新安  潘志明  刘秀梵 《中国家禽》2007,29(9):10-12,18

试验分析了84株鸡源沙门氏菌分离株的四环素耐药性,用PCR方法检测四环素耐药基因在分离株中的分布情况。结果显示,四环素耐药率为49%(41/84),鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅携带tet(A)基因(23/23),肠炎沙门氏菌和德尔卑沙门氏菌携带tet(A)(8/18)、tet(B)(17/18)或tet(G)(10/18)三种基因,tetC基因在这些沙门氏菌中都没有检测到。该类基因多数位于结合性质粒上,但是不在整合子范围内。  相似文献   

永寿县牧草情况调查     

董建平  张养民  吴双彦  李文刚 《畜牧兽医杂志》2008,27(1):53-54

永寿县于2002年承担了国家"天然草原植被恢复与建设"项目,在牧草开发方面结合县情做了一定的工作,取得了一定的成绩,积累了一定的经验,为此笔者对永寿县牧草开发情况进行了初步调查,现报告如下:  相似文献   

鸽常规石蜡切片制作技术的体会及改良     

吴双  朱善元  王安平  王永娟  左伟勇  洪伟鸣  秦枫 《黑龙江畜牧兽医》2015,(6):53-54

为了使传统的石蜡切片技术满足病理研究与诊断的需要,针对鸽的石蜡切片制作过程中易出错的环节,探讨制作优良鸽石蜡切片的具体方法,对制作过程中取材、固定、修整、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改良,镜检结果表明获得了高质量的石蜡切片。  相似文献   

胡桃楸、白桦纯林及其混交林土壤微生物特性研究     

于瑛楠  李宇光  吴双 《安徽农业科学》2015,(19):138-140

[目的]研究胡桃楸、白桦纯林及其混交林土壤微生物特性.[方法]以3种人工林土壤微生物为研究对象,采用稀释平板法、BIOLOG微平板法及土壤理化性质常规测定方法对3种林型内土壤微生物特性进行了研究.[结果]土壤微生物数量以胡桃楸林最多,且显著高于其他2种林型;微生物多样性指数则以混交林显著较高;微生物数量与多样性指数彼此间呈现出极显著的正相关性,并与土壤有机质、水解氮、速效钾也呈显著的正相关,而与其他土壤理化性质的相关性却并不明显.[结论]营建混交林不仅具有相对较高的物种多样性,而且较为稳定,因此混交林营造具有一定的现实意义和发展前景.  相似文献   

农民对饮水安全水价承受能力的研究     

吴双  储楚  胡阳  张力  孙伯明 《安徽农业科学》2012,40(34):16891-16892,16905

为准确把握农民饮水安全水价的承受能力,制定合理的饮水安全水价,借鉴国内外条件价值评估法与水费支出系数法的理论与研究方法,调查分析了研究区域内农民饮水安全水价经济承受能力与心理承受能力。以江苏省赣榆县为例,通过问卷调查,计算分析了农民对饮水水价的承受能力及影响因素。  相似文献   

抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备与鉴定     

左伟勇  洪伟鸣  吴双  王安平  朱善元 《江苏农业科学》2012,40(1):43-45

利用重氮法将盐酸克伦特罗(CL)分别与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,以CL - KLH为免疫原免疫BALB/c小鼠,以CL- BSA为检测原,采用杂交瘤技术获得1株针对CL的单克隆抗体细胞株(5D7).抗体的亚类为IgG1,通过竞争阻断试验证明其具有良好的特异性和敏感性,利用Protein -G Sepharose亲和层析系统纯化单克隆抗体5D7,单克隆抗体5D7对CL的IC50约为4.6 ng/mL.  相似文献   

抗微生物肽Alloferon的研究进展     

洪伟鸣  左伟勇  吴双  王健  朱善元 《江苏农业科学》2012,40(12)

Alloferon-1和Alloferon-2是分离自昆虫细胞的2个小肽,研究结果表明Alloferon-1和Alloferon-2具有抗病毒和抗肿瘤的活性.本文就Alloferon-1和Alloferon-2的抗病毒、抗肿瘤的作用效果及其在兽医临床上的应用进行了综述.  相似文献   

黑龙江省夏季低温指数变化特征分析     

田宝星  吴双  杨帆  陈晶  赵放  宫丽娟 《黑龙江农业科学》2019,(4)

为了解近44年来黑龙江省夏季低温指数的分布规律和变化趋势。利用1971-2014年黑龙江省80个气象台站夏季日最低气温和平均气温观测资料,结合低温指数模型,通过趋势变化、小波分析和Mann-Kendall检测等方法,分析黑龙江省夏季低温指数的变化特征。结果表明:黑龙江省夏季平均低温指数呈减少趋势,夏季低温指数在20世纪80、90年代和21世纪初变化不明显,而2010s以来明显减少,夏季平均低温指数较春季小。气温从1980s升温以来,低温指数明显减少,夏季低温指数自1970s中期以来明显减少,低温指数序列突变开始于1983年前后,夏季低温指数变化与气温呈负相关。夏季低温指数存在18～32 a,6～14 a和4～8 a三个尺度的周期变化,其中18～32 a尺度非常稳定且具全域性,在1980s中期以前6～14 a尺度较为稳定,在1980s中期以后4～8 a尺度较为稳定,7～12 a尺度年周期变化最明显但有局域性(1980s中期以前),24～31 a尺度能量虽弱且具有全域性。夏季低温指数有26、8、和5 a的主周期,其中第一主周期为8 a,平均周期为5.5 a;第二主周期为26 a,平均周期为14.5 a。  相似文献