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通过活体采卵(OPU)的方法来进行牛体外胚胎生产的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
近年来，体外胚胎生产的技术日益提高，尤其是在牛上应用比较广泛，在1988年由体外生产的胚胎最后可移植到受体的数目达到30000枚，靠超声波引导从活体上采集卵母细胞（OPU）进行体外胚胎的生产的方法现在被广泛采用，这种方法可以使活体持续性的生产胚胎，大大地提高了繁殖效率。且活体采卵是一项非常灵活、方便的技术，通常1周可以采集2次，连续许多周，都不影响供体的繁殖潜力，通常依靠活全采卵的方法（OPU）所获得的平均每8～10个卵母细胞中就可生产出2枚可移植的胚胎，从而提高了胚胎的生产效率，缩短了世代间隔，而且用活体采卵的方法（OPU）所生产的胚胎质量也要好于屠宰的卵巢上所获得的卵母细胞生产的胚胎。目前，这种方法除在牛上应用外、也在其它动物如水牛，马上采用。 相似文献
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目前胚胎工程操作如胚胎体外生产、胚胎克隆等研究所需要的大量成熟卵母细胞主要是由卵母细胞体外成熟 (ＩＶＭ)提供的。尽管许多种动物的ＩＶＭ系统取得了很大的进展 ,但是还不十分完善 ,这在猪尤为突出。例如猪ＩＶＭ -ＩＶＦ系统生产的猪胚胎发育能力很低 ,最多也只有 2 0 %发育到囊胚阶段 ,ＩＶＭ/ＩＶＦ胚胎移植后发育到期的比率也只有 5 %～10 %。目前还不十分清楚导致发育率低的特定原因。就用于体外成熟的卵母细胞来源而言 ,通常应用初情期前母猪中等大小卵泡内的未成熟卵母细胞 ,这些卵泡与排卵卵泡的生理状态有很大的不同 ,或者从… 相似文献
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《家畜生态学报》2021,42(9)
利用幼畜进行超数排卵,产生数量远高于成年母畜生产的窦状卵泡,结合活体取卵、卵母细胞体外成熟和体外受精等技术,大量生产体外胚胎,并移植至成年代孕母畜子宫内,迅速获得众多后代个体的系统工程,被称为幼畜体外胚胎移植技术(Juvenile in Vitro Embryo Transfer, JIVET)。该技术能最大程度地缩短世代间隔,加速遗传选育进度,可为胚胎干细胞、动物克隆和转基因动物制备等研究提供丰富的胚胎试验材料。JIVET技术成败的关键在于幼畜的超数排卵和体外成熟环节。该文综述了幼畜超数排卵的生理基础、幼畜的超数排卵效果;同时从卵泡液微环境、卵丘细胞状态、卵母细胞的细胞质和细胞核成熟以及体外成熟的优化方案等方面介绍了幼畜卵母细胞体外成熟的研究进展。 相似文献
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人及绵羊卵泡液对绵羊卵母细胞体外成熟受精及发育的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
人及绵羊卵泡液对绵羊卵母细胞体外成熟受精及发育的影响孙风俊，Ｐ．Ｈｏｌｍ，Ｂ．Ｉｒｖｉｎｅ，Ｒ．Ｆ．Ｓｅａｍａｒｋ前言近年来，有报道阐述了在培养液中添加同卵泡液产生良好的效果，用于卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ），进一步体外授精（ＩＶＦ）并对ＩＶＭ、ＩＶＦ... 相似文献
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为建立稳定高效的活体采卵-体外受精技术体系,提高体外胚胎生产效率,本研究先利用屠宰场采集的新鲜卵巢卵母细胞进行体外受精,通过胚胎发育潜力来筛选最佳的体外胚胎培养液;再进一步研究不同种公牛精液和供卵母牛对活体采卵-体外受精效率的影响。结果显示,CR1aa培养液和mCR1aa培养液卵裂率差异不显著（P>0.05）,但mCR1aa组的囊胚发育率显著提高（28.1% vs 20.6%,P<0.05）;选取的3头荷斯坦种公牛精液的活体采卵-体外受精胚胎的卵裂率差异不显著（P>0.05）,但1号种公牛精液体外受精后囊胚率（38.7%）显著高于2号和3号（23.8%&22.9%）（P<0.05）;随机选择的3头活体采卵供体母牛（H1、H2、H3）获得的头均可用卵母细胞数无显著差异,但H1和H2供体母牛体外受精胚胎的卵裂率和囊胚率均显著高于H3供体牛（P<0.05）,且H1供体牛体外受精囊胚率显著高于H2供体牛（P<0.05）。结果表明,mCR1aa培养液能显著提高体外受精囊胚发育率,适用于体外胚胎生产;种公牛精液和供体母牛个体差异会直接影响活体采卵-体外受精胚胎的生产效率,为奶牛活体采卵-体外受精生产技术体系的优化提供参考。 相似文献
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不同采卵方式对绵羊卵母细胞质量、体外成熟及体外受精的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
随着胚胎工程及胚胎相关技术的发展,绵羊卵母细胞和绵羊胚胎的需求量日益增加.获得尽可能多的结合型卵母细胞是体外受精的关键环节.本试验通过剖切法和抽吸法两种不同采卵方式获取卵母细胞并进行体外成熟培养.剖切法获得的卵母细胞数量高于抽吸法,所用时间相差不大.A、B级卵母细胞的比例在剖切法中显著高于抽吸法(P＜0.05),抽吸法所采集的C级卵母细胞显著高于剖切法(P＜0.05);剖切法中卵丘扩散率和第一极体排出率要显著高于抽吸法(P＜0.05),受精后不同时期胚胎的发育率差异不显著(P＞0.05).表明剖切法是采集绵羊卵母细胞的理想方法. 相似文献
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刘瑞三 《河南畜牧兽医(综合版)》2000,(6)
该研究项目综合应用牛卵母细胞体外成熟（ＩＭ）,体外受精（ＩＶＦ）,ｈＡＬＢ乳腺表达质粒的显微注射,胚胎的体外培养（ＩＶＣ）,槽式ＰＣＲ技术鉴定胚胎中ｈＡＬＢ基因整合与否,以及性别决定基因（ＳＲＹ基因）的分子鉴定和胚胎移植等技术,首次获得一头雄性转人血清白蛋基因的试管牛。专家认为本成果的创造性在于:（１）克隆了山羊Ｂ-酪蛋白基因启动子和上游调控区的序列,并与含有内含子１的人血清白蛋白全长ｃＤＮＡ构成重组融合基因,用于指导在动物乳腺特异表达ｈＡＬＢ。（２）在３３只小鼠中获得８只转人血清白蛋白基因小鼠,整合率为… 相似文献
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[目的]研究牛活体采卵-体外受精（ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF）体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统。[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸索,重点考查体外胚胎培养液中添加瘦素（leptin）对囊胚率的影响。选取13～15月龄健康荷斯坦奶牛及和牛各10头作为供体,进行活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外胚胎生产,记录可用卵数及可用囊胚数,统计卵裂率、囊胚率;2个品种牛的体外冷冻胚胎解冻后,以荷斯坦奶牛为受体进行胚胎移植,移植后45 d统计妊娠率。[结果]添加30 U/mL的leptin可以显著（P<0.05）提高屠宰场来源牛体外胚胎的囊胚率。随机选择供体牛活体采卵,平均每头荷斯坦奶牛获得可用卵7.5枚,平均每头和牛获得可用卵8.1枚;荷斯坦奶牛及和牛的卵裂率分别为84.00%、82.71%,二者差异不显著（P>0.05）。体外培养条件下,平均每头荷斯坦奶牛获得可用囊胚4.3枚,平均每头和牛获得可用囊胚3.7枚;荷斯坦奶牛的囊胚率（57.33%）显著... 相似文献
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应用活体采卵技术可以从活体母牛反复采集大量系谱明确的卵母细胞,用于胚胎的体外化生产。本文将对牛活体采卵技术的研究进展和操作方法进行综述,分析影响活体采卵效果的因素和存在问题,并论述活体采卵在家畜育种和胚胎生物技术等方面的应用前景。 相似文献
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随着哺乳动物胚胎工程技术的深入研究和商业性胚胎移植技术的迅猛发展,胚胎的需求量日益增加,单纯依靠超数排卵获得胚胎的方法成本高、采胚数量有限,远远不能满足科学研究和生产的需要.因此,充分挖掘优良母畜的繁殖潜力,深入研究卵泡卵母细胞体外生产胚胎的机理,建立一整套体外快速生产优质廉价胚胎的技术体系,为胚胎工程前沿研究和加速良种家畜的良种繁育进程提供优质胚胎具有巨大的科研价值与现实意义.卵母细胞体外成熟是体外生产胚胎的一个基础环节,对胚胎工程技术的其它环节产生决定性影响.本研究受山西省自然基金(20021089)资助,本文就牛羊卵巢卵母细胞体外成熟的因素作一阐述. 相似文献
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超数排卵是体外获得大量卵母细胞和胚胎的有效手段之一。20世纪80年代后期，范必勤等首次在中国报道有关兔子超数排卵技术的研究，此后我国各地学者开展了大量研究工作。FSH是超数排卵过程中常用的激素，通常要连续多次注射。为了减轻劳动力， 相似文献
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电激活对完全体外化牛细胞核移植的影响 总被引：22，自引：1，他引：21
牛卵母细胞在体外成熟２３～２４ｈ时去核，去核卵用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲激活（Ⅰ组）或不激活（Ⅱ组），然后将体外受精、发育的８～３２细胞期胚胎的单个卵裂球注入卵周隙，用８０Ｖ／ｍｍ４０μｓ两次电脉冲诱导卵裂球与去核卵母细胞融合。Ⅰ组操作后存活率和融合率（８８．４％和５５．０％）显著低于Ⅱ组（９５．９％和６５．１％，Ｐ＜０．０５）。融合卵体外培养２４ｈ和５～８ｄ后，Ⅰ组核移植胚胎的卵裂率和桑椹／囊胚发育率（６３．０％和１５．２％）与Ⅱ组（５０．５％和７．８％）无显著差异，但Ⅰ组结果均好于Ⅱ组。将来自两组的２５枚桑椹和囊胚移植到１６头同期受体，在已检查过的８头受体中２头受体妊娠，其中１头于妊娠后４个多月流产，１头于妊娠期满后产出一雄性牛犊。研究结果表明：去核卵母细胞的电激活尽管对重组卵的存活与融合不利，但可改善核移植胚的卵裂和发育。本研究在我国首次获得牛细胞核移植的成功，证明用ＩＶＭ卵母细胞和ＩＶＦ胚胎进行完全体外化的牛细胞核移植是可行的。 相似文献
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牛体外受精胚胎卵裂阶段对其体发育能力影响的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
将经过体外成熟培养（ＩＶＭ），体外受精（ＩＶＦ）后获得的牛早期胚胎，按其所处卵裂阶段的不同，划分为２细胞、３～４细胞和５细胞以上３个试验组，在体外条件十继续培养到发育囊胚和孵化囊胚阶段，以观察在胚胎早期，受精卵裂发育的快慢与其后胚胎所获得的继续发育能力的关系。结果显示，牛早期胚胎体囊胚发育率的高低，与其在体外培养（ＩＶＣ）前卵裂发育的快慢成正比。在ＩＶＦ后４２～４６ｈ处于２细胞、３～４细胞和５细胞 相似文献
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牛卵母细胞体外成熟、体外受精和胚胎培养的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
牛卵母细胞体外成熟、体外受精和胚胎培养的研究进展陈学进＊（中国农业大学动物科技学院·北京·１０００９４）牛胚胎移植技术是继人工授精技术之后，家畜繁殖领域的第二次革命，增加优秀后代的遗传进展，但这一技术未能广泛应用的一个主要限制因素就是超数排卵处理个体... 相似文献
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牛羊体外受精研究的重大进展 《畜牧与饲料科学》1989,10(1):42-42
随着商业性胚胎移植技术的迅速发展,对家畜早期胚胎的需求量越来越大,由传统的超数排卵、体内受精所获得的胚胎已远不能满足这一需要,因此通过家畜卵巢卵母细胞的体外培养、体外受精技术作为解决早期胚胎来源的一个重要途径正在国际范围内引起重视。内蒙古大学实验动物研究中心,利用屠宰场采到的大量牛羊卵巢卵母细胞进行体外培养、体外受精处理获得成功,其成熟率和受精率分别达70％、90％以上。把这种体外受精卵 相似文献