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1.
以秋菊（Chrysanthemum morifolium Ramat.）抗寒品种‘星光灿烂’为材料,利用RT-PCR和RACE方法从叶片中克隆了ω-3脂肪酸去饱和酶基因,命名为CmFAD7,GenBank登录号为KC567246。该基因cDNA 全长1 284 bp,编码428个氨基酸,相对分子量为48.98 kD,等电点为9.07,编码的氨基酸序列与高山还阳参同源性最高（84%）。该蛋白含有?12-FADs保守结构域和3个跨膜螺旋,N端含有一段叶绿体转运肽,属于膜脂肪酸去饱和酶超级家族。采用实时荧光定量PCR和气相色谱法研究低温胁迫下叶片和根系中CmFAD7的表达量及脂肪酸含量变化,CmFAD7在根系和叶片中均有表达,叶片中的表达量高于根系。根系中5 ℃时表达量最高,叶片中–4 ℃时最高,在–8 ℃时叶片和根系表达量均较低;随着处理温度的降低,叶片中C18:3含量呈逐渐上升趋势,根系中变化不明显。结果表明,菊花CmFAD7与抗寒性有关,低温条件下不同器官的表达量有较大差异。 相似文献
2.
《果树学报》2015,(6)
【目的】分离和克隆‘库尔勒香梨’(Pyrus sinkiangensis Yu)果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Ps PL,了解其在香梨果实不同时期转录水平上的表达差异,为香梨果实成熟软化机制研究提供理论依据。【方法】以‘库尔勒香梨’果肉组织为试验材料,通过RT-PCR和RACE技术得到Ps PL c DNA全长序列,并利用生物信息学方法对其进行分析和功能预测。运用实时荧光定量(q RT-PCR)技术,分析Ps PL基因在香梨果实生长发育后期及货架期的表达特性和差异。【结果】Ps PL基因c DNA全长序列为1 245 bp,Gen Bank收录号为KJ547669,该基因共编码414个氨基酸,属于果胶裂解酶家族基因,与其他植物PL基因编码的氨基酸序列有较高的同源性,与苹果同源性最高,达到97%;Ps PL在不同时期香梨果实中的表达差异很大,在生长发育后期表达量很低,盛花后150 d表达量最高。【结论】同源克隆了‘库尔勒香梨’Ps PL基因,可能在该梨果实软化过程中起到作用。 相似文献
3.
香蕉泛素结合酶基因与果实成熟关系的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
根据香蕉果实采后早期成熟的抑制缩减杂交文库获得的香蕉泛素结合酶基因片段,从香蕉（Musa acuminate L. AAA group‘Brazilian’）果实中克隆了泛素结合酶基因的cDNA全长,命名为MaUCE1。该cDNA全长890 bp,编码152个氨基酸。BlastX分析表明,该基因所推导的氨基酸序列与烟草（BAB40310）、小麦（AAA34310）、拟南芥（L19351）和马铃薯（ABA46759）有较高的一致性（95.39%、95.39%、92.11%和90.79%）,并且结构域分析发现该序列具有泛素结合酶E2的酶活性中心部位和一个与其他真核生物泛素E2酶相同,在泛素E2硫酯键形成中具有催化活性,并在进化上高度保守的半胱氨酸残基。该基因在香蕉根、茎、叶、花、果实中均有表达,但在花和果实中的表达量较高,并且在果实成熟后期表达量升高,与淀粉磷酸化酶活性变化一致,与淀粉含量的变化呈负相关,暗示该基因可能参与香蕉果实成熟过程中的分解代谢,而与果实成熟启动无关。 相似文献
4.
以番木瓜（Carica papaya L.）果实为研究材料，通过前期构建的果实成熟数字基因表达谱，克隆得到1个编码WRI家族调控因子的基因，命名为CpWRI3。氨基酸序列比对和进化分析发现CpWRI3与拟南芥AtWRI3/4同源性较高。转录因子活性分析表明，CpWRI3具有一定的转录激活活性。实时荧光定量PCR分析表明，CpWRI3的表达水平随着果实成熟不断升高，采后8 d达到峰值，表明其在果实成熟的后期发挥重要作用。在果实中瞬时过量表达CpWRI3促进了月桂酸、棕榈油酸和亚油酸含量的提升。体外凝胶阻滞试验（EMSA）证实CpWRI3能与下游靶基因Cp KAS1和Cp ACC1启动子上AW-box元件的序列特异结合。利用荧光素酶系统进一步证明CpWRI3可以在植物体内诱导CpKAS1和CpACC1启动子的表达。上述结果表明CpWRI3能参与调控月桂酸、棕榈油酸和亚油酸等脂肪酸合成。 相似文献
5.
香蕉谷胱甘肽过氧化物酶基因MaGPX 的克隆和表达分析 总被引：2，自引：0，他引：2
谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPXs）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶,是植物体清除活性氧的一种主要酶,与植物抗逆性密切相关。本研究中从香蕉根中克隆了一个编码谷胱甘肽过氧化物酶的cDNA,命名为MaGPX（GenBank 登录号为：JX094345）。序列分析结果表明,该基因全长989 bp,存在一个完整的开放阅读框504 bp,编码168 个氨基酸。氨基酸序列分析表明其具有GPX 家族典型的保守结构域。与其他植物的谷胱甘肽过氧化物酶基因相比,具有较高的相似性。与水稻、谷子、小麦、大麦、玉米和甜橙编码的氨基酸序列的同源性分别为85.12%、84.82%、83.93%、83.33%、82.14%和80.36%。利用荧光定量PCR 技术分析了该基因在香蕉不同器官中的表达特异性及不同胁迫条件下的表达特性,结果表明,MaGPX 在香蕉的根、球茎、叶片、花和果实中均有所表达,其中在花和根中表达量较高,而在叶片中的表达量最低。在盐、涝害、干旱和枯萎病胁迫下MaGPX 表达量升高,表明该基因表达具有器官差异性和受胁迫的诱导。本研究为进一步研究MaGPX 的生物学功能及其应用奠定了基础。 相似文献
6.
杨梅酸性转化酶基因cDNA分离及表达分析 总被引：1，自引：0，他引：1
杨梅果实富含蔗糖,酸性转化酶是蔗糖代谢关键酶,根据植物酸性转化酶基因保守区序列设计引物,提取杨梅叶片RNA,逆转录获得cDNA,以此为模板通过PCR技术扩增到长度为516bp的基因片段,克隆入pMD18-T载体中,命名为MrIVR1(GenBank:DQ339699)。测序及同源性检索表明,该基因推导氨基酸序列与君子兰、葡萄、草莓、胡萝卜等酸性转化酶基因氨基酸序列同源性为60%～69%。运用ClustalX软件对植物转化酶基因进行了系统树分析,结果显示,MrIVR1编码的蛋白质属于细胞壁酸性转化酶。半定量RT-PCR表达分析显示,MrIVR1基因在杨梅果实发育早期表达量最高,随着果实的发育表达量下降,在成熟果实中表达水平较低。 相似文献
7.
利用抑制消减文库从香蕉中分离到一个cDNA片断,结合RACE技术获得该基因的全长序列。该全长cDNA共含1 285个碱基,通过Blastx同源性分析结果显示它与香蕉的一个S-adenosyl-L-methionine synthase(SAMS)基因(GenBank序列号为AF004317)具有82%的碱基同源性,编码的氨基酸顺序有93%同源性,但在cDNA的5’和3’非编码区同源性较低。设计特异引物对此基因进行RT-PCR分析表明,正常成熟的香蕉果实,采后当天表达量较高,随后略有降低,至采后12 d又达到一个相对较高值后迅速下降;高锰酸钾处理的果实,整个成熟期该基因均表现一个比较高的表达量;乙烯利处理的果实,采后表达量明显下降且处在一个比较稳定的水平。 相似文献
8.
茄子甲硫氨酸亚砜还原酶（SmMsrA）基因cDNA全长的克隆和分析 总被引：1，自引：0，他引：1
以茄子单性结实品系D-10花后7 d的单性结实果实为试材,并以在茄子单性结实抑制差减文库中差异表达的EST片段Z569为基础,利用RACE技术,获得一个934 bp的cDNA全长序列,为甲硫氨酸亚砜还原酶A基因,命名为SmMsrA。基因编码区共600 bp,编码199个氨基酸。氨基酸序列分析显示该基因编码的蛋白具有甲硫氨酸亚砜还原酶基因家族结构域和保守基本序列GCFWG,与杨树甲硫氨酸亚砜还原酶A（MsrA）蛋白三级结构相似性较高,为67%。蛋白多序列比对和进化树分析表明,SmMsrA与番茄MsrA蛋白的同源性最高（92%）,进化距离最近。采用荧光定量PCR对单性结实品系D-10和非单性结实品系03-2中不同结实性果实发育过程中SmMsrA的表达量进行测定,结果表明：在不同结实性的子房和果实发育过程中SmMsrA基因都有表达,单性结实品系在低温条件下开花当天子房中的SmMsrA的表达量最高。 相似文献
9.
以鸭梨为试材,采用qRT-PCR技术克隆鸭梨果实几丁质酶基因PbChi Ⅱ,并对几丁质酶氨基酸序列进行聚类分析;同时采用荧光定量PCR的方法对鸭梨植株不同器官及水杨酸(salicylic acid,SA)和梨轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana de.Not.f.sp.piricola(Nose)Koganecawa et.Sokwwa)处理后几丁质酶基因的表达量进行了分析,以期为该基因的进一步研究与利用提供参考依据。结果表明:PbChi Ⅱ基因长度为969bp,核苷酸序列及推导的氨基酸序列与沙梨的同源性均达到100%,该基因属于第Ⅱ类几丁质酶基因;PbChi Ⅱ在根和果实中表达量较大。在鸭梨果实中,SA和病原菌可诱导该基因表达,且表达量在48h达到最高,初步推测PbChi Ⅱ可能参与SA介导的植物抗病防卫反应的信号通路及轮纹病菌引起的防卫反应。 相似文献
10.
基于膜脂代谢组学研究低温诱导的桃果实采后膜脂代谢变化与冷害的关系。与4℃相比，8℃延缓了桃果实磷脂降解、磷脂酸（PA）生物合成以及脂肪酸去饱和酶基因表达水平的增加，进而降低PA积累和脂肪酸去饱和过程，保持高水平的磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）组分和脂肪酸不饱和度，最终延迟桃果实冷害发生。8℃诱导桃果实差异脂质代谢物数量显著增加，并在贮藏后期保持较高水平的甘油二酯（DAG）和较低水平的甘油三酯（TAG）组分，可能是8℃诱导的采后桃果实正常后熟软化过程和冷害作用的结果。综上所述，8℃下桃果实的膜脂代谢动态变化利于冷害的延迟。 相似文献
11.
苹果属观赏海棠McCHS基因的克隆及实时定量表达 总被引：3，自引：1，他引：2
以苹果属观赏海棠‘王族’品种叶片提取的总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得一个1529bp的查尔酮合成酶(Chalcone sythase,CHS)基因的cDNA序列,其基因编码区共1167bp,编码389个氨基酸,命名为McCHS。使用实时荧光定量PCR和紫外可见光分光光度计,对3类不同叶色的观赏海棠品种‘火焰’(Malus‘Flame’,叶片绿色)、‘绚丽’(Malus ‘Radiant’,新叶红色)、‘高原之火’(Malus ‘Prairifire’,新叶红色)和王族(Malus ‘Royalty’,叶片紫色)幼叶和功能叶中的McCHS表达及其花色苷含量进行测定分析,结果表明:McCHS在4个品种的幼叶和功能叶中均有表达,其幼叶表达量的变化与叶片中花色苷含量的变化一致;除‘绚丽’外的功能叶表达量变化和花色苷含量变化也一致,‘绚丽’功能叶的特殊情况可能涉及花色苷合成途径中的其他酶和转录因子。 相似文献
12.
The change in calcium (Ca) concentration with time, the distribution of Ca within various leaves, and leaf and tipburn development were studied in field-grown lettuce (Lactuca sativa L.) cultivar ‘Cobham Green’.Ca distribution between and within leaves followed two distinct patterns. The average concentrations in the outer leaves were always higher than in the inner leaves. The concentrations at the periphery of the outer leaves was always greater than in the midrib, whereas for the inner leaves the converse was true.Tipburn only occurred in the inner leaves; it developed on only those leaves and those parts of the leaf which expanded most rapidly.Thus, tipburn development appears to depend on the supply of Ca relative to the rate of leaf growth. 相似文献
13.
14.
樱桃不同节位叶片光合特性与解剖特征比较研究 总被引：13，自引：1，他引：13
以3个甜樱桃栽培品种佐藤锦、斯坦勒和那翁为试材,研究了新梢不同节位叶片光合速率(Pn)变化及叶绿素(Chl.)和比叶重(SLW)对其的影响。分析了不同品种叶片解剖结构与Pn的关系。结果表明:樱桃枝条不同叶位叶片的Pn呈单峰曲线变化,枝条中上部的叶片Pn较大,且有较高的稳定性,叶片发育和生理成熟度以及环境因素的影响是Pn出现单峰变化的重要因素;Chl.含量随着叶片的发育而增加,叶片成熟后,叶片Chl.含量与Pn之间不存在相关关系;不同叶位叶片SLW与Pn表现显著正相关;樱桃不同品种间叶片气孔密度、栅栏组织与海绵组织厚度比值与Pn存在极显著正相关。 相似文献
15.
为明确不同苗龄臭柏异形叶(鳞叶和刺叶)空间分异影响因素及其对环境的适应性，通过田间盆栽试验，研究100%和10%光照环境下1年生和3年生臭柏异形叶空间分异特征和光合生理特性。结果表明：(1)苗龄、透光率、叶片位置对臭柏鳞刺比有显著影响和交互效应，光照环境是影响1年生臭柏鳞刺比的主要因素，叶片位置是影响3年生臭柏鳞刺比的主要因素。(2)遮光处理是影响1年生臭柏叶片光合生理的主要因素，叶形是影响3年生臭柏叶片光合生理的主要因素。(3)遮光处理是影响1年生和3年生臭柏异形叶叶绿素荧光参数的主要因素。因此，1年生臭柏是异形叶分异的关键时期。3年生臭柏异形叶已完成分异，其鳞叶为优势叶片，刺叶具有耐阴性。 相似文献
16.
西葫芦银叶病发病叶片叶绿素代谢及其荧光特性 总被引：2，自引：1，他引：1
研究了西葫芦银叶病发病叶片和叶柄叶绿素代谢特性和叶片叶绿素荧光参数的变化。与对照相比，发病叶片和叶柄叶绿素总量(Chl.a+b)，叶绿素a (Chl.a)，叶绿素b (Chl.b)含量均下降；轻度与重度发病叶片叶绿素a/b增加，中度发病叶片与对照差异不显著，而叶柄比对照降低。西葫芦银叶病对叶片Chl.b的影响比Chl.a大，而对叶柄Chl.a的影响比Chl.b大。发病叶片和叶柄叶绿素酶活性升高，从而使叶绿素降解加速，叶绿素合成中间产物Protoporphyrin IX (Proto IX)，Magnesium protoporphyrin IX (Mg-Proto IX)，Protochlorophyllide (Pchlide)含量降低，Uroporphyrinogen Ⅲ (Uro Ⅲ)含量增加，表明叶绿素合成在 Uro Ⅲ到 Proto Ⅸ受阻。发病叶片最大光化学量子产量(Fv/Fm)，光系统Ⅱ(PSⅡ)的潜在活性(Fv/Fo)，实际光化学效率(φPSⅡ)，光化学淬灭系数(qP)降低，非光化学淬灭系数(NPQ)增加。试验结果表明，西葫芦银叶病破坏了叶绿素合成和降解的动态平衡，叶绿素合成受阻和叶绿素降解加速是导致叶片叶绿素含量降低的原因；发病叶片叶绿体PSⅡ活性受到抑制。 相似文献
17.
银叶病对西葫芦叶片光合特性和叶绿体超微结构的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
以西葫芦杂交种‘硕丰早玉’为材料, 烟粉虱诱导西葫芦银叶病, 研究了其对叶片净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和叶绿体超微结构的影响。结果表明, 西葫芦发生银叶病后, 叶片光合速率降低, 气孔导度降低, 胞间CO2浓度增加。与健康叶片相比, 发病叶片叶绿体膜受损, 叶绿体数量和体积均减少, 基粒数和片层数减少, 淀粉粒数量和大小减少。西葫芦发生银叶病后, 叶绿体超微结构的变化可能是导致发病叶片叶绿素含量降低和光合速率下降的重要原因。 相似文献
18.
《International Journal of Fruit Science》2013,13(4):77-91
Abstract The optimum leaf number required for normal fruit growth in the regular bearing mango cultivar ‘Amrapali’ and the biennial bearing cultivars ‘Chausa’, ‘Dashehari’ and ‘Langra’ were studied by isolating individual fruits with known numbers of supporting leaves by shoot girdling at the time of fruit set. There were significant differences in the leaf area (249.01-1817.10 cm2), fresh weight (7.0-77.0 g) and dry weight (3.7-50.0 g) of leaves on shoots having 30, 20, 10 and 5 leaves as compared with control in different cultivars. In both types of cultivars, there was a progressive reduction in fruit size in terms of total fruit, pulp, peel, and seed weight with decreasing numbers of supporting leaves, however, a minimum reduction (2.4%) in fruit growth in ‘Amrapali’ was noticed with 30 supporting leaves. A nonsignificant difference in photosynthetic rate with varying number of leaves was found but its efficiency in leaves was higher in ‘Amrapali’ as compared with biennial bearing cultivars. Starch accumulation in the leaves was reduced by shoot girdling. The stomatal resistance of the leaves of girdled shoots was comparable with that of leaves on control shoots. In all the cultivars except ‘Amrapali’ it was observed that 30 leaves, the maximum retained on a shoot, could not support the growth of a single fruit to normal size. The data on rate of photosynthesis in different pool size of leaves and fruit growth in girdled and nongirdled shoots clearly show that fruit development depends not only on the current assimilates but also to a great extent on reserves. A 14CO2 feeding experiment showed a higher rate of carbon fixation in the leaves of girdled shoots than in the control shoots, but the translocation of 14C assimilated to the developing fruits on the girdled and control shoots was comparable. The results also indicated that developing fruits are major sinks for current photosynthates as more than 60 percent of the 14C exported from the treated leaf was found in the fruit in all instances. 相似文献
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Sedoheptulose-1, 7-bisphosphatase (SBPase; EC 3.1.3.37) is a key enzyme in the photosynthetic carbon reduction cycle (Calvin cycle). In the present study, a full-length cDNA encoding SBPase (designated as CsSBP, GenBank accession no. FJ911553) was isolated from cucumber (Cucumis sativus L. cv. ‘Jinyou 3’) grown in solar-greenhouse by RT-PCR and RACE. The cDNA contained 1452 nucleotides with a complete open reading frame (ORF) of 1167 nucleotides, which was deduced for encoding a peptide of 388 amino acids whose molecular mass was inferred to be 42 kDa with its isoelectric point at 6.17. Sequence comparison analysis showed that the deduced amino acid of SBPase from cucumber leaves had high homology to that from other species. Expression analysis by real-time PCR and Western blot revealed that CsSBP mRNA and protein was most abundant in leaves, detectable in stems and fruits, but invisible in roots. A similar difference was found in SBPase activity among leaves, stems, fruits and roots. CsSBP expression at the mRNA and protein level was the highest in mid-position leaves (4th–8th apical expanded leaves) of plants, medium in base position leaves (12th), and the lowest in upper position leaves (1st). However, SBPase activity decreased successively as leaf position declined. The net photosynthetic rate (Pn) of mid-position leaves was also found to be the highest, but that of base-position leaves was lower than upper-position leaves. The diurnal variations of gene expression and SBPase activity in optimal functional leaf (6th leaf) was a single-peak pattern curve, which was similar to that of Pn, and the peak appeared at 12:00. These data indicate that CsSBP expresses only in green tissues of cucumber plants and there are close positive correlations between SBPase activity and gene expression at the mRNA and protein levels, and between SBPase activity and Pn in leaves of cucumber plants. 相似文献